2025年 1 月 19日, 星期日
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英格恩技术资料

siRNA转染效率不理想的原因有哪些?

siRNA转染效率不理想,常见的原因有: 1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率 …

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RNA转染与膝关节骨性关节炎中WISP-1调控机制的研究

       随着生活、工作方式的改变及社会人口的老龄化,骨关节退行性病变已成为高发疾病,其中代表性疾病之一为骨性关节炎(osteoarthritis, OA)。最近研究表明:WISP-1 具有促进关节软骨破坏的作用 。WISP-1 在正常软骨和滑膜中几乎不表达,而在退变的软骨及滑膜(如OA)中WISP-1异常增高,通 …

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30个关于CCK-8的Q&A

Q1: 一个孔中应接种多少个细胞? A1: 当使用标准96孔板时,贴壁细胞的最小接种量至少为1,000 个/孔 (100μl 培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2,500 个/孔 (100μl 培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK-8溶液。   Q2: 能否用3 …

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体内转染与miR let-7 和miR-278 调节昆虫变态和卵发生研究

       昆虫的发育、变态和繁殖主要受幼激素(JH)和20-羟蜕皮酮(20E)的控制。虽然20E能引起幼虫/若虫蜕皮和变态,但JH通过抑制20E的变质作用来维持幼体的形态。JH也能刺激许多昆虫物种的雌性生殖方面,包括发育前的发育、卵黄生成和卵发生。尽管人们对20E基因中的miRNA调控机制已经有了一定的了解,但对于miRNA与JH基因中的JH信号通路的相 …

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CCK8试剂盒工作原理是什么?

       CCK8基于水溶性四唑盐WST8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),WST8在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的脱氢酶还原生成橙黄色的甲臜染料(formazan)。甲臜染料能够溶解在组织培养基中,与活细胞数量成正比。通过比色,可以动态地量化活细胞的数量,从而对细胞增 …

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DNA转染(Entranster)与微管蛋白多翻译后修饰的蛋白质组学分析和功能表征研究

微管蛋白已知会有独特的翻译后修饰(PTMS),如脱酪氨酸和聚谷氨酰化,特别是在非结构化羧基末端尾(CTTS)中。然而,更多传统的微管蛋白的PTMS及其在微管性质和功能的调节中的作用仍然不明确。现分享一篇DNA转染(Entranster)与微管蛋白多翻译后修饰的蛋白质组学分析和功能表征研究的文献,以供参考。

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western-blot化学发光(ECL)出现高背景的原因是什么?

做Western Blot发光实验经常有“背景太高”问题的出现,要弄清楚“背景太高”的原因,先要知道“背景”是什么,“背景”也是发光,影响发光的因素就会影响背景。 影响发光的因素主要有:1.含HRP的抗体;2.发光试剂;3.和发光试剂反应的杂质,如含杂质的膜。这里面,在很短时间内曝光造成的背景多是由于含HRP的抗体的因素造成的,抗体浓度过高,洗涤不充分,封闭 …

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ECL发光液(enlight)与甜菊渣提取物改善D-半乳糖诱导衰老小鼠的氧化应激研究

衰老被定义为是机体内部环境的稳定,生理功能和代谢过程不可避免的退化的一个过程。许多疾病与衰老有关,如帕金森病、糖尿病、动脉粥样硬化、阿尔茨海默病、骨质疏松症、骨关节炎和多种癌症。随着老龄化社会的到来,健康越来越受到重视。氧化应激是由活性氧自由基和抗氧化剂不平衡引起的生物过程,可能导致脂质、蛋白质和DNA的氧化损伤,最终导致死亡。科学证据表明,氧化应激在衰老过 …

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ECL发光液(enlight)与巨噬细胞迁移抑制因子和弓形虫病研究

      弓形虫是一种细胞内原生动物,属于顶端复合体门。这种寄生虫能感染各种温血哺乳动物,包括人类、牲畜和鸟类。据统计,世界上大约三分之一的人口是血清阳性。这种寄生虫在免疫功能低下的病人身上会引起严重的症状,在感染的孕妇身上也会导致流产。此外,流行病学调查的结果表明,弓形虫病的流行给畜牧业造成了巨大的经济损失。       目前,药物(嘧啶、磺胺嘧啶和螺旋 …

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ECL发光液与锌指因子ZNF121和上皮细胞增殖研究

      MYC是一种强有力的癌基因蛋白,调节多种细胞过程,包括增殖、凋亡、分化、干细胞特性、衰老和迁移。MYC主要作为转录因子发挥作用,与大量蛋白质相互作用,MYC相互作用蛋白的鉴定和对于理解MYC功能是非常重要的。现分享一篇ECL发光液(enlight)与MYC相互作用蛋白-锌指因子ZNF121和上皮细胞增殖研究 …

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