英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
RNA转染效率低，可能的原因： · 转染试剂不适合。建议选择RNA专用转染试剂，如Entranster试剂。 · 转染试剂和RNA的量不够，或者比例不对。优化实验条件，调整试剂和RNA用量，优化二者比例。 · 检测时间有问题。适当调整检测时间。 · RNA质量问题。选择纯度高的RNA。 · 细胞状态不佳。调整细胞状态，调整细胞融合度。
阅读更多 »体内转染（Entranster）mirRNA-423-5p与肾小管上皮细胞凋亡研究
肾小管上皮细胞（RPTECs）占到肾脏体积的90%，是构成整个肾小管间质的主要细胞类型。这些细胞对于肾功能至关重要，RPTECs的任何损伤都会使肌纤维母细胞的积累，进而导致肾小管间质纤维化。据报道，microRNAs（miRs）可以调节肾脏对于急性损伤的反应，有些mirRNA被认为在肾功能的维护和肾损伤的发展过程中起重要作用。现分享一篇体内转染（ …
阅读更多 »如何优化细胞RNA转染实验条件？
可从以下几方面进行优化： 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与丹参酮IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用研究
丹参酮 IIA（Tanshinone IIA，Tan IIA）是一种从丹参干根中提取的生物活性物质，具有抑制肿瘤细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用。然而，Tan IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用机制仍有待进一步阐明。现分享一篇运用RNA转染（Entranster）的方法的文献，通过阐明Tan IIA在p53基因缺陷的H1299细胞中的抗肿瘤作用机制，以确定丹参酮IIA …
阅读更多 »提高RNA转染效率的几点建议
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮肤，头发，所有徒手接触过 …
阅读更多 »体内转染（entranster）与荷花碱通过调节nrf2信号对缺血性卒中线粒体的保护作用研究
缺血性中风是导致死亡和长期残疾的主要原因。为了克服临床治疗的局限性，迫切需要有前景的神经保护化合物。神经保护剂仅限于单一靶向药物，这进一步限制了其临床疗效。由于大脑特殊的能量需求，以线粒体为中心的能量微环境是缺血性脑卒中复杂病理学研究的新热点。现分享一篇体内转染（entranster）与荷花碱通过调节nrf2信号对缺血性卒中线粒体的保护作用研究的文献，以供参 …
阅读更多 »体内转染（entranster）与RIP3的缺失和非酒精性脂肪性肝病研究
非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是一种常见且复杂的疾病，具有严重肝脏疾病的高风险。尽管具有如此公众和临床健康的重要性，目前很少有有效的治疗方法可用于NAFLD。现分享一篇体内转染（entranster）与RIP3的缺失和非酒精性脂肪性肝病研究的文献，以供参考。
阅读更多 »基因敲除实验和动物体内转染实验（entranster-invivo）对比
基因敲除动物 Entranster-in vivo 技术方法 同源重组等方法获得基因敲除动物，然后进行实验 直接将核酸与转染试剂混合，注射到动物体内 单次实验周期 10～20个月 3天 稳定性 一般 …
阅读更多 »siRNA转染实验注意事项
为了达到高的转染效率，在转染实验过程中，需要注意以下几点： 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »RNA转染与髓源性抑制细胞的抑制潜能研究
髓系来源的抑制性细胞（MDSC）介导了广泛而深刻的免疫抑制，特别是对T细胞功能的影响。在小鼠中，MDSC的特征是细胞表面分子Gr1(包括巨噬细胞和中性粒细胞标志物Ly6C和Ly6G)和CD11b的表达；在人类中，MDSC通常是CD11b+CD33+HLA-DR2。小鼠CD11b+Gr1+细胞群由两个亚群组 …
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