英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
反转录病毒载体 最常用的反转录病毒载体基于Mo -MLV 。第一代载体所携带的转基因的两侧是2 个完整的LTR, 由增强子(U3) 、R 区（即转录起始区，在病毒颗粒中的载体基因组两端均存在）及U5 区构成。病毒载体的包装主要由包装信号序列（ψ）介导，而邻近的gag序列能够显著提高其包装效率。所有反转录病毒载体均携带一个ψ甲序列和部分gag 序列组成的扩展包 …
阅读更多 »细胞电转染实验的几点建议
1. 电场强度要合适 合适的电场强度对于电转染实验非常重要，电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值，实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2. 细胞状态要好 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞（15代以内，传代后2 …
阅读更多 »体内转染与CLU4A的抑制缺氧/复氧损伤中的心脏保护作用研究
CLU4A在各种人类癌症中被鉴定为原癌基因。CLU4A在心肌缺血/再灌注损伤中表达上调，但CLU4A在心肌缺血/再灌注损伤中的确切作用尚不清楚，需要研究CLU4A在心肌缺血/再灌注损伤中的潜在机制。现分享一篇体内转染（engreen）与CLU4A的抑制缺氧/复氧损伤中的心脏保护作用研究的文献，以供参考。 文 …
阅读更多 »ECL发光液与蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中线粒体依赖性凋亡研究
据报道，早期脑损伤（EBI）是蛛网膜下腔出血（SAH）患者高死亡率和不良预后的主要原因，细胞凋亡是EBI中最重要的生理病理机制。最近，有研究发现硫氧还蛋白相互作用蛋白（txnip）将内质网应激（ER应激）与神经元凋亡联系起来，并加重EBI。然而，其他潜在的机制仍然未知。现分享一篇ECL发光液（enlight）与硫氧还蛋白相互作用蛋白和蛛网膜下腔出血后早期脑损 …
阅读更多 »体内转染与GATA-4调节脑出血后神经元凋亡研究
GATA结合蛋白4（GATA-4）是GATA转录因子家族的成员，在正常大脑中表达，参与神经炎症反应和衰老。然而，关于GATA-4是否与脑出血（ICH）引起的脑损伤有关的研究很少。现分享一篇体内转染（entranster）与GATA-4调节脑出血后神经元凋亡研究的文献，以供参考。其研究的目的是在体内和体外探讨GATA-4在ICH诱导的继发性脑损伤 …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与血管生成素-2和肺癌转移研究
肺癌是最常见的恶性肿瘤，血管生成-2（Ang-2）升高，具有高转移率。然而，关于Ang-2促进肺癌细胞增殖和转移的机制仍不清楚。现分享一篇DNA转染（Entranster）与血管生成素-2和肺癌转移研究的文献，以供参考。
阅读更多 »电转感受态细胞的制备
1、 -80℃冰箱保存的菌种在SOB 固体平板上划单菌落； 2、次晨，挑选单克隆感至内含1ml SOB 液体培养基的试管中，37℃，300rpm，6 hr； 3、然后转接到含400ml SOB 液体培养基的2L 摇瓶中（按1:500 的量转接），300rpm，4hr，然后每隔2 min 测一次OD ，至OD =0.76； 4、立刻置冰水浴中骤冷，可以选择在一 …
阅读更多 »RNA转染与骨形态发生蛋白-2调控PMVECs的肌源性分化研究
肝功能不全和肝硬化影响多种器官系统的脉管系统，导致器官功能受损，导致发病率和死亡率增加。肝肺综合征（HPS）是一种发生在肝硬化晚期的肺微血管疾病，加重原发性肝脏疾病，并引起多种相关并发症。由于HPS在全球范围内受到越来越多的关注，在过去几十年中，HPS的病理研究取得了进展。然而，HPS的病理生理机制尚未确定。 …
阅读更多 »RNA转染注意事项
为保证RNA转染的高效率，在转染过程中应注意： 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）mirRNA-423-5p与肾小管上皮细胞凋亡研究
肾小管上皮细胞（RPTECs）占到肾脏体积的90%，是构成整个肾小管间质的主要细胞类型。这些细胞对于肾功能至关重要，RPTECs的任何损伤都会使肌纤维母细胞的积累，进而导致肾小管间质纤维化。据报道，microRNAs（miRs）可以调节肾脏对于急性损伤的反应，有些mirRNA被认为在肾功能的维护和肾损伤的发展过程中起重要作用。现分享一篇体内转染（ …
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