英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
重组腺病毒（AdV）是一种复制缺陷的腺病毒载体系统，在基因治疗、基础生命科学研究等领域被广泛应用。目前常用的腺病毒载体基于人腺病毒5型（Ad5），其基因组是36 kb长的线性双链DNA。腺病毒可通过自身的纤维（fiber）和细胞表面的受体结合被内吞进入细胞，然后从内吞体（endosome）转移到细胞质和细胞核内，借助细胞的转录和翻译机器启动病毒的复制组装。一 …
阅读更多 »体内转染（entranster）与microRNA-146a保护小鼠免受手术创伤引起的认知功能下降研究
术后认知功能障碍（POCD）是一种常见的，发病率和死亡率增加的术后并发症。然而，这种并发症的神经病变发生机制至今仍不清楚。神经炎症，特别是海马体炎症，会导致POCD。最近，越来越多的证据支持micrornas（micrornas）参与调节人类神经系统疾病中的神经炎症。 现分享一篇体内转染（entranster）与microRNA-146a保护小鼠免受手术创伤 …
阅读更多 »体内转染与异甘草素和大鼠早期脑损伤研究
脑内出血（Intracerebralhemorrhage，ICH）可引起有效的氧化应激反应和炎症过程，异甘草素（Isoliquiritigenin）是一种类黄酮物质，可以激活核因子E2相关因子2（Nrf2）介导的抗氧化系统，负调控核因子B（NF-κBκκ）和NOD受体家族。现分享一篇体内转染（Entranster）与异甘草素和大鼠早期脑损伤研究的文献，以供参 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与整合素αvβ3和微重力相关骨丢失研究
机械刺激和生物因素协同调节骨的发育和再生，但其基础机制却知之甚少。微重力诱导骨丢失，这可能地与抗局部细胞因子的发展有关，包括胰岛素样生长因子1（IGF-1）。现分享一篇RNA转染（Entranster）与整合素αvβ3和微重力相关骨丢失研究的文献，以供参考。
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与肠黏膜屏障的信号转导和细菌移位研究
肠上皮表面由一层柱状上皮细胞构成，形成一个与大多数管腔内细菌直接接触的屏障，在防止细菌易位中起着重要作用。肠上皮屏障功能在炎症性肠病（IBD）的发病机制中起着至关重要的作用，但其机制尚未完全阐明。现分享一篇RNA转染（Entranster）与肠黏膜屏障的信号转导和细菌移位研究的文献，以供参考。
阅读更多 »RNA转染与水通道蛋白1和肺动脉平滑肌细胞迁移研究
肝肺综合征（HPS）以肺内血管扩张（IPVD）引起的动脉氧合缺陷为特征。肺血管重塑（PVR）是IPVD的一个重要病理特征，然而，有关该过程的内在机制的细节尚不明确。现分享一篇RNA转染（Entranster）与水通道蛋白1和肺动脉平滑肌细胞迁移研究的文献，以供参考。
阅读更多 »做好siRNA转染的要点
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮 …
阅读更多 »siRNA转染效率不理想的原因是什么？
siRNA转染效率不理想，常见的原因有：1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这时转染效率和总 …
阅读更多 »siRNA转染（entranster）与成纤维细胞瘤细胞（l929-a）研究
L929成纤维细胞瘤细胞（l929-a）和L929纤维肉瘤细胞（l929-n）是不同的细胞系，常用于肿瘤坏死的细胞毒性因子α（TNFα）的研究，TNFa已被报道可诱导两种细胞系的坏死。然而，当比较TNFα诱导的在这两个细胞系的细胞死亡时，l929-n表现出典型的RIP3依赖性细胞坏死，在l929-a中却不是。现分享一篇运用siRNA转染（entranster …
阅读更多 »体内转染与miR let-7 和miR-278 调节昆虫变态和卵发生研究
昆虫的发育、变态和繁殖主要受幼激素（JH）和20-羟蜕皮酮（20E）的控制。虽然20E能引起幼虫/若虫蜕皮和变态，但JH通过抑制20E的变质作用来维持幼体的形态。JH也能刺激许多昆虫物种的雌性生殖方面，包括发育前的发育、卵黄生成和卵发生。尽管人们对20E基因中的miRNA调控机制已经有了一定的了解，但对于miRNA与JH基因中的JH信号通路的相 …
阅读更多 »