英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
非洲绿猴（African Green Monkeys, AGM）是猿免疫缺陷病毒（SIV）的天然宿主，虽然SIV复制水平较高，但不会发展为艾滋病。在健康成年AGM中观察到CD4（+）T细胞的降低和CD8（dim） T细胞升高，这可能部分解释了SIV诱导的疾病进展的缺失。阐明使这种天然宿主与SIV共存而无进展性疾病发生的机制可能有助于了解艾滋病的 …
阅读更多 »Cell Death Discovery | 南京大学口腔医学院：牙周膜成纤维细胞铁下垂机制新发现
《Cell Death Discovery》期刊上发表的题为“Periodontitis-level butyrate-induced ferroptosis in periodontal ligament fibroblasts by activation of ferritinophagy“的文章表明牙周炎水平的丁酸盐通过激活 NCOA4 …
阅读更多 »ECL发光液与低浓度TBBPA促进子宫内膜癌细胞侵袭和迁移研究
四溴双酚A(TBBPA)是目前全球生产量和使用量最大的溴代阻燃剂之一, 也是新型潜在的拟增热点POPs和环境内分泌干扰物, 被广泛应用于电子电器产品、纺织品、泡沫家具及建筑材料等, 以提高阻燃性。目前一些研究表明, 在空气、土壤、水体和水体沉积物等环境中已检测到TBBPA的存在。 TBBPA已经被国际癌症研究机构(IARC)列为致癌物质 …
阅读更多 »siRNA转染至细胞有哪些方法？
siRNA导入细胞有以下几种方法：化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素：细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术（Entranster）是最为常用的方法，而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好 …
阅读更多 »siRNA细胞转染效率低下的原因
1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这 …
阅读更多 »怎样提高悬浮细胞的siRNA转染效率？
悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。 目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成 …
阅读更多 »提高RNA转染效率的几点建议
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮肤，头发，所有徒手接触过 …
阅读更多 »体内转染与CREB1基因沉默和血管性痴呆小鼠认知功能障碍研究
血管性痴呆（VD）是老年痴呆的第二大病因，仅次于阿尔茨海默病（AD），在西方国家占所有痴呆病例的17.6%，研究表明在世界东部地区，包括中国和日本人口中，认知功能障碍的人数要更多。认知功能障碍广泛被认为是痴呆患者的经典特征。VD，以各种脑血管疾病为特征的损伤综合征主要与缺血性脑血管疾病相关。目前，VD的确切发病机制仍不清楚。因此，有必要更详细地阐明该病症背后 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与睫状体神经营养因子和阿尔兹海默症治疗研究
通过其病理特征，即老年斑和神经纤维缠结来抑制阿尔茨海默病（AD）进展，是一种有效的治疗方法。许多研究表明睫状体神经营养因子（CNTF）不仅能够促进神经元生长和维持细胞存活，还可显著降低淀粉样蛋白β（Aβ）聚集和沉积。现分享一篇ECL发光液（enlight）与睫状体神经营养因子和阿尔兹海默症治疗研究的文献，以供参考。
阅读更多 »shRNA转染后，什么时候做RT-PCR最好?
shRNA转染后，进行RT-PCR的最佳时间取决于多种因素，包括细胞类型、转染效率、shRNA的表达和目标基因的降解速度。一般来说，在转染后的24到72小时内进行RT-PCR是比较常见的时间点。具体来说： 24小时后：在这个时间点，可以开始检测到shRNA的表达以及目标基因的初步下调情况。对于一些高效的shRNA，这个时间点可能已经有显著的基因沉默效果。 4 …
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