L929成纤维细胞瘤细胞(l929-a)和L929纤维肉瘤细胞(l929-n)是不同的细胞系,常用于肿瘤坏死的细胞毒性因子α(TNFα)的研究,TNFa已被报道可诱导两种细胞系的坏死。然而,当比较TNFα诱导的在这两个细胞系的细胞死亡时,l929-n表现出典型的RIP3依赖性细胞坏死,在l929-a中却不是。现分享一篇运用siRNA转染(Entr …
阅读更多 »如何选择慢病毒和腺病毒系统?
慢病毒载体系统和腺病毒载体系统比较 病毒表达系统 慢病毒表达系统(Lentivirus) 腺病毒表达系统(Adenovirus) 病毒基因组 RNA病毒 双链DNA病毒 复制 自主复制 自主复制 是否整合 病毒基因组整合于宿主基因组,长时间、稳定表达外源基因 病毒基因组游离于宿主基因组外,瞬时表达外源基因 感染细胞类型 感染分裂和不分裂细胞,适用于难转染的原 …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与血管生成素-2和肺癌转移研究
肺癌是最常见的恶性肿瘤,血管生成-2(Ang-2)升高,具有高转移率。然而,关于Ang-2促进肺癌细胞增殖和转移的机制仍不清楚。现分享一篇DNA转染(Entranster)与血管生成素-2和肺癌转移研究的文献,以供参考。
阅读更多 »体内转染(Entranster)与富亮氨酸重复激酶2加重脑出血诱导的继发性脑损伤研究
富亮氨酸重复激酶2(LRRK2)是家族性和突发性帕金森病(PD)的遗传原因,它与神经元死亡、囊泡运输、线粒体功能障碍和炎症有关。然而,其在脑出血(ICH)引起的继发性脑损伤(SBI)中的作用尚不清楚。现分享一篇体内转染(Entranster)与富亮氨酸重复激酶2加重脑出血诱导的继发性脑损伤研究的文献,以供参考。
阅读更多 »病毒包装过程中,细胞大量死亡,还有必要收集病毒吗
在病毒包装过程中,如果观察到细胞大量死亡,是否还要收集病毒需要根据具体情况判断。以下是一些可能的考虑因素: 病毒滴度:尽管细胞大量死亡,仍然有可能产生高滴度的病毒。如果病毒滴度足够高,可以继续收集病毒用于后续实验。 污染:细胞大量死亡可能是由于污染引起的。如果怀疑有细菌、真菌或支原体污染,收集病毒可能不是一个好主意,因为污染会影响后续实验的准确性。 病毒本身 …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与菱形蛋白酶RHBDD1诱导蛋白水解靶点研究
在过去的几十年中,研究发现,调节性膜内蛋白水解(RIP)在各种细胞过程中起着重要的作用,包括细胞信号转导、基因转录和凋亡。调节性膜内蛋白水解是蛋白酶在其跨膜区域内切割底物的过程。已鉴定出三种主要的膜内蛋白酶家族,包括金属蛋白酶型S2P家族、C-分泌酶和信号肽肽酶家族和菱形蛋白酶。现分享一篇DNA转染(Entranster)与菱形蛋白酶RHBDD1诱导蛋白水解 …
阅读更多 »电转染实验影响因素
1 电场参数 电场是电转染的重要因素,细胞在电场的作用下,膜通透性增加或是形成小孔,以完成转染过程。因此电场强度是应该被优化的主要参数。电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。因此,一个适宜的电场强度至关重要。 不同细胞系具有不同的最佳场强值,其确定方法除了实验直接测定比较不同场强下转染率的高低外,还可以 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与TAR DNA结合蛋白功能丧失和脑出血后继发性脑损伤研究
TAR DNA结合蛋白-43(TDP-43)是一种多功能的DNA和RNA结合蛋白,参与RNA转录、选择性剪接,并可调节细胞中mRNA的稳定性。TDP-43已被证明是患有肌萎缩侧索硬化症(ALS)和额颞叶变性(FTLD)患者中神经元和胶质细胞包涵体病理学培养基的关键组分。最近的报告表明,TDP-43蛋白是一种核蛋白,可从细胞核到细胞质中形成泛素阳性包涵体(UP …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与Botch蛋白对实验性脑出血大鼠神经保护作用研究
Notch1蛋白的成熟参与脑出血(ICH)后的炎症反应和细胞凋亡。据报道,Botch蛋白可抑制Notch1蛋白的成熟。现分享一篇体内转染(Entranster)与Botch蛋白对实验性脑出血大鼠神经保护作用研究的文献,以供参考。
阅读更多 »慢病毒感染贴壁细胞实验方法
1、 慢病毒转染前18-24小时,将贴壁细胞以1×105/孔铺到24孔板中。使细胞在慢病毒转染时的数量为2×105/孔左右。 2、第二天,用含有6 μg/ml polybrene的2ml新鲜培养基替换原培养基,加入适量病毒悬液。37℃孵育。 3、(对polybrene毒性敏感的细胞选作此步骤)4小时后加入2ml新鲜培养基以稀释polybrene。 4、继续培 …
阅读更多 »