1)优化条件:质粒不同,所转染的细胞不同及定量的准确性等因素会导致在一些情况下所做的转染不在该优化条件内。这种情况下需要对质粒转染试剂的配比进行优化。另外,可选用更合适的转染试剂,如Entranster试剂。 2)抑制剂:不要在用于制备DNA-转染试剂复合物的培养基中使用抗生素,EDTA,柠檬酸盐,磷酸盐,RPMI,硫酸软骨素,透明质酸,硫酸葡聚糖或其他硫酸 …
阅读更多 »通过转染双链siRNA 在果蝇S2 细胞中进行RNA 干扰
本方案介绍一种通过试剂向果蝇S2 细胞转运siRNA 以触发RNA 干扰的有效方法。本方案适用于24 孔板内培养的细胞。如果使用其他规格的多孔板、培养瓶或者培养皿,需要根据培养孔的表面积换算细胞密度和试剂用量(表1 ) 。 表1 果蝇细胞转染所用细胞, 转染试剂和siRNA (或者ASO) 的体积 培养板或培养皿 24孔 12孔 6孔 6cm 10cm 每孔 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与纳米羟基磷灰石调控成骨细胞分化研究
羟基磷灰石(HAP)在骨骼形成和骨重塑中起着重要作用。合成HAP与自然形成的HAP相似,已广泛应用于骨科和牙科植入。尽管纳米HAP在高浓度下容易聚集,但分散的纳米HAP在成骨细胞分化中的细胞内命运和作用机制仍有待充分阐明。现分享一篇ECL发光液(enlight)与纳米羟基磷灰石调控成骨细胞分化研究的文献,以供参考。
阅读更多 »怎么样做好siRNA细胞转染实验?
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮 …
阅读更多 »RNA转染(entranster)后沉默现象不明显怎么办?
可能原因: 1. RNA与转染试剂比例不佳。可进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳。 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。 3. RNA效率不高。选择最优RNA,并采用已知高效的RNA做对照。 4. RNA酶污染。建议无RNA酶和内毒素的吸头、离心管和溶液等材料和实验器具。 5. 转染后培养时间不够。在mRNA水平可以到48 小时以后验证结果,在蛋白水 …
阅读更多 »Stem Cell Research & Therapy | 中国人民解放军总医院:如何改善肾间质纤维,防止肾衰老?
发表在《Stem Cell Research & Therapy 》期刊的“Regulation of connective tissue growth factor expression by miR-133b for thetreatment of renal interstitial fibrosis in aged mice …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与富亮氨酸重复激酶2加重脑出血诱导的继发性脑损伤研究
富亮氨酸重复激酶2(LRRK2)是家族性和突发性帕金森病(PD)的遗传原因,它与神经元死亡、囊泡运输、线粒体功能障碍和炎症有关。然而,其在脑出血(ICH)引起的继发性脑损伤(SBI)中的作用尚不清楚。现分享一篇体内转染(Entranster)与富亮氨酸重复激酶2加重脑出血诱导的继发性脑损伤研究的文献,以供参考。
阅读更多 »体内转染(Entranster)lncRNA与乳腺癌治疗研究
长链非编码RNA(lncRNA)是一类转录本长度超过200nt的RNA分子,它们并不编码蛋白,而是以RNA的形式在多种层面上(表观遗传调控、转录调控以及转录后调控等)调控基因的表达水平。LncRNA ASBEL已经被鉴定为编码抗增殖蛋白的BTG3(B细胞易位基因3)基因的反义转录物。 有报道称,在三阴性乳腺癌(TNBC)中BTG3显著下调。现分享 …
阅读更多 »酚红会影响CCK8的检测吗?
不会。培养基中酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不会对检测造成影响。 如需了解更多关于cck8产品的信息,请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与睫状体神经营养因子和阿尔兹海默症治疗研究
通过其病理特征,即老年斑和神经纤维缠结来抑制阿尔茨海默病(AD)进展,是一种有效的治疗方法。许多研究表明睫状体神经营养因子(CNTF)不仅能够促进神经元生长和维持细胞存活,还可显著降低淀粉样蛋白β(Aβ)聚集和沉积。现分享一篇ECL发光液(enlight)与睫状体神经营养因子和阿尔兹海默症治疗研究的文献,以供参考。
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