帕金森病是一种常见的神经系统疾病,是典型的纹状体功能障碍模型。它是仅次于阿尔茨海默病的第二常见神经退行性疾病。帕金森病的特征之一是黑质多巴胺能神经元的逐渐丧失。帕金森病患者通常有震颤、僵硬和运动迟缓的症状。遗传因素和环境因素已被纳入帕金森病的病因。对下丘脑核进行高频脑深部刺激是一种流行的外科治疗方法,但不适用于早期的PD,发展中国家的患者也无法获得。现分享一 …
阅读更多 »DNA转染与bom-mir-2805在上调家蚕纤维蛋白轻链基因的表达研究
家蚕是世界上最重要的经济昆虫,也是鳞翅目重要的模式生物。家蚕丝腺是一种高度特异性,具有高效合成丝蛋白能力的特殊器官。丝蛋白主要由丝素和丝氨酸组成。丝素基因的表达主要在转录水平上受到时间和空间调控,表现为表达抑制模式。研究表明家蚕miRNAs参与丝蛋白基因的表达调控。另外,家蚕丝腺特异性转录因子(Tfs)如丝腺因子(SGF,包括SGF-1、SGF- …
阅读更多 »siRNA转染实验需要知道的关键点
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮 …
阅读更多 »体内转染siRNA(engreen)与衰老相关的神经炎症研究
作为衰老过程中的主要特征,神经性炎症参与几种与衰老相关疾病的发病机制,包括阿尔茨海默氏病(AD)。触发受体表达髓系细胞(TREM)2是一种新的AD致病基因,但是关于TREM2在与衰老相关的神经炎症、认知障碍等方便研究不足。现分享一篇运用体内转染siRNA(Entranster-in vivo)敲降TREM2的方法与神经炎症和认知障碍研究的文献 …
阅读更多 »western-blot化学发光(ECL)出现高背景的原因是什么?
做Western Blot发光实验经常有“背景太高”问题的出现,要弄清楚“背景太高”的原因,先要知道“背景”是什么,“背景”也是发光,影响发光的因素就会影响背景。 影响发光的因素主要有:1.含HRP的抗体;2.发光试剂;3.和发光试剂反应的杂质,如含杂质的膜。这里面,在很短时间内曝光造成的背景多是由于含HRP的抗体的因素造成的,抗体浓度过高,洗涤不充分,封闭 …
阅读更多 »体内转染(entranster)与大鼠脑外伤后大脑皮层环状RNA变化研究
创伤性脑损伤(TBI)可分为初始损伤和继发损伤两个阶段。继发性损伤可使初始损伤恶化,导致炎症反应增强和细胞死亡增加,导致神经功能缺陷。初始损伤不能改变,但通过有效的治疗可以减轻继发损伤。虽然在过去几十年里已经做出了许多努力,但脑外伤仍然是一种严重的疾病,死亡率和发病率都很高,而且现有的治疗策略也很有限,这给社会和家庭带来了严重的经济负担。脑损伤的复杂生物学机 …
阅读更多 »DNA转染效率低的可能的原因有哪些?
1.准备不足 做细胞转染的时候,在开展正式实验前要多做预试验,优化转染条件。优化转染条件包括:转染试剂的用量、DNA密度、细胞密度、试剂和DNA混合孵育时间等等。 2.细胞污染 细胞污染也是造成细胞死亡,转染效率低下的一大原因。首先,转染细胞用的质粒必须保证无菌。而现在市场上的一般的质粒提取试剂盒都做不到绝对无菌。分享一个小秘诀:将提完质粒后或者提的最后一步 …
阅读更多 »提高RNA转染效率的几点建议
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮肤,头发,所有徒手接触过 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与CHL1与胶质瘤细胞研究
与L1CAM同源(接近同源的L1)的细胞粘附分子(CHL1)是细胞粘附分子L1(L1CAM)基因家族的一个成员。虽然其表达和功能已经在一些肿瘤的报道,在小鼠胶质瘤发生发展中的作用尚不清楚。现分享一篇RNA转染(Entranster)与CHL1与胶质瘤细胞研究的文献,以供参考。
阅读更多 »ECL发光液与存活素抑制对食管癌细胞放射增敏作用的研究
食管癌在中国是一种常见的癌症。手术是食管癌的主要治疗手段,但放疗和化疗在临床分期上也有广泛的应用。放射治疗通常与化疗和靶向治疗相结合。然而,放射治疗效果仍然令人不满意,放射抗性在临床治疗中非常普遍,导致可能的治疗失败。因此,迫切需要提高放射敏感性的策略。现分享一篇ECL发光液(enlight)与存活素抑制对食管癌细胞放射增敏作用的研究的文献,以供参考。
阅读更多 »