英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
小干扰RNA（siRNA）是通过RNA干扰（RNAi）在体外和体内抑制特定蛋白质合成的有力工具，由于RNAi利用天然途径，即在蛋白质翻译发生之前，在转录后水平上关闭基因表达，因此，siRNA诱导下调基因表达对基础研究和应用研究有着巨大的影响。siRNA及其递送系统的化学修饰已被建议用于改善细胞内siRNA …
阅读更多 »siRNA转染与PKC-β抑制剂和心脏微血管功能研究
PKC-β抑制剂Ruboxistaurin（RBX或βLY333531）可防止糖尿病肾和视网膜微血管并发症。然而，RBX对糖尿病心肌微血管功能的影响尚不清楚。先分享一篇运用siRNA转染（Entranster）的方法与PKC-β抑制剂对糖尿病大鼠心脏微血管功能研究的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染（entranster）与大鼠早期脑损伤诱导的神经元凋亡研究
早期脑损伤（EBI）诱导的神经元凋亡是导致动脉瘤性蛛网膜下腔出血（ASAH）并发症的主要诱因，并可能会增加ASAH患者的死亡率。c-jun N-末端激酶（JNK）已被证实是EBI诱导的细胞凋亡的启动子，然而其机制尚未完全阐明。现分享一篇体内转染（entranster）与大鼠早期脑损伤诱导的神经元凋亡研究的文献，以供参考。
阅读更多 »病毒载体的基本元件
反转录病毒载体 最常用的反转录病毒载体基于Mo -MLV 。第一代载体所携带的转基因的两侧是2 个完整的LTR, 由增强子(U3) 、R 区（即转录起始区，在病毒颗粒中的载体基因组两端均存在）及U5 区构成。病毒载体的包装主要由包装信号序列（ψ）介导，而邻近的gag序列能够显著提高其包装效率。所有反转录病毒载体均携带一个ψ甲序列和部分gag 序列组成的扩展包 …
阅读更多 »体内转染siRNA（Entranster）与神经炎症和认知障碍研究
作为衰老过程中的主要特征，神经性炎症参与几种与衰老相关疾病的发病机制，包括阿尔茨海默氏病（AD）。触发受体表达髓系细胞（TREM）2是一种新的AD致病基因，但是关于TREM2在与衰老相关的神经炎症、认知障碍等方便研究不足。现分享一篇运用体内转染siRNA（Entranster-in vivo）敲降TREM2的方法与神经炎症和认知障碍研究的文献，文献 …
阅读更多 »ECL发光液与低浓度TBBPA促进子宫内膜癌细胞侵袭和迁移研究
四溴双酚A(TBBPA)是目前全球生产量和使用量最大的溴代阻燃剂之一, 也是新型潜在的拟增热点POPs和环境内分泌干扰物, 被广泛应用于电子电器产品、纺织品、泡沫家具及建筑材料等, 以提高阻燃性。目前一些研究表明, 在空气、土壤、水体和水体沉积物等环境中已检测到TBBPA的存在。 TBBPA已经被国际癌症研究机构(IARC)列为致癌物质 …
阅读更多 »细胞RNA转染实验注意事项
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮肤，头发，所有徒手接触过 …
阅读更多 »体内转染与巨噬细胞和人支气管上皮细胞肿瘤转化研究
肺癌是发病率和死亡率增长最快，对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。肺肿瘤发生是一个复杂的过程，包括基因突变或表观遗传变化等多种因素，导致细胞失控增殖、恶性转化和肿瘤转移。其他研究表明，慢性炎症与肝脏和肠道的肿瘤发生密切相关，而许多流行病学研究表明，慢性炎症可能在肺肿瘤发生中起关键作用。现分享一篇运用体内转染（Entranster）方法研究巨噬细胞和人支气 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与间充质信号转导和牙源性上皮干细胞稳态研究
在小鼠中，出生后切牙的持续生长是由位于切牙的近端的牙乳头间充质细胞和牙上皮干细胞协调这两个群体的多能祖细胞所协调的。但两者之间合作的分子机制在很大程度上是未知的。现分享一篇ECL发光液（enlight）与间充质信号转导和牙源性上皮干细胞稳态研究的文献，以供参考。
阅读更多 »直接克隆法构建重组腺病毒基因组
pShuttle 质粒被用来将携带的目的基因转移到腺病毒载体骨架中。步骤1 ~9 阐述了将目的基因克隆到有双筛选系统的pSh-pkGFP 质粒中。目前在使用的pShuttle 或pSh-pkGFP 中包含一个CMV 启动子驱动的表达盒，，可以用来克隆外源基因或替换启动子。1. 在无菌的05mL 离心管中将外源基因载体和pSh-pkGFP 载体分别用以下条件消 …
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