1、 慢病毒转染前18-24小时,将贴壁细胞以1×105/孔铺到24孔板中。使细胞在慢病毒转染时的数量为2×105/孔左右。 2、第二天,用含有6 μg/ml polybrene的2ml新鲜培养基替换原培养基,加入适量病毒悬液。37℃孵育。 3、(对polybrene毒性敏感的细胞选作此步骤)4小时后加入2ml新鲜培养基以稀释polybrene。 4、继续培 …
阅读更多 »Frontiers in Neuroscience | 厦门大学医学院:如何才能有效缓解神经炎症疼痛?
《Frontiers in Neuroscience》期刊上新发表的神经相关文章“Long Non-coding RNA Uc.48+ Small Interfering RNA Alleviates Neuroinflammatory Hyperalgesia in Gp120-Treated Rats v …
阅读更多 »如何做好细胞电转染实验?
要想做好细胞的电转染实验,应注意以下几点: 1. 选择合适的电场强度 合适的电场强度对于电转染实验非常重要,电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值,实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2. 选择合适的细胞 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞(15代以内 …
阅读更多 »体内转染siRNA(Entranster)与神经炎症和认知障碍研究
作为衰老过程中的主要特征,神经性炎症参与几种与衰老相关疾病的发病机制,包括阿尔茨海默氏病(AD)。触发受体表达髓系细胞(TREM)2是一种新的AD致病基因,但是关于TREM2在与衰老相关的神经炎症、认知障碍等方便研究不足。现分享一篇运用体内转染siRNA(Entranster-in vivo)敲降TREM2的方法与神经炎症和认知障碍研究的文献,文献 …
阅读更多 »Stem Cells International | 南京大学口腔医学院:与众不同的牙周膜细胞促生机制
研究团队通过病毒感染增强实验(EnvirusTM ,Engreen )发现通过细胞内琥珀酸盐诱导的 HIF-1α 稳定和细胞外琥珀酸盐引起的 GPR91 激活能促进牙周膜细胞增殖、迁移和成骨分化。这项成果发表在了《Stem Cells International》期刊上(“Succinate Supplement Elicited “Pseudohy …
阅读更多 »ECL发光液与老年大鼠心脏功能与抗氧化防御机制关系研究
衰老在心血管系统中表现出深刻的结构和生理变化。氧化应激是衰老过程中的一个重要因素,它与各种年龄相关的心血管疾病有关。然而,老化心脏中氧化应激的潜在机制仍不清楚。现分享一篇ECL发光液(enlight)与老年大鼠心脏功能与抗氧化防御机制关系研究的文献,以供参考。 文献地址:https://sci-hub.shop/10.1016/j.bbrc.2 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与幽门螺杆菌诱导的TRAF1上调对感染细胞的抗凋亡作用研究
肿瘤坏死因子受体相关因子1(TRAF1)是TRAF家族成员之一,在动脉粥样硬化、淋巴瘤、实体瘤等疾病中有异常表达,但TRAF1在胃癌中的作用尚不清楚。现分享一篇ECL发光液(enlight)与幽门螺杆菌诱导的TRAF1上调对感染细胞的抗凋亡作用研究的文献,以供参考。
阅读更多 »体内转染与TMUB1通过抑制Stat3磷酸化负调节肝再生研究
肝脏具有显著的再生能力。肝损伤或部分肝切除后,正常肝细胞重新进入细胞周期并增殖以恢复原肝体积、质量和功能。尽管肝脏具有强大的再生能力,但每年有近100万人死亡与慢性肝衰竭有关,这表明在这些病例中,肝再生不足以弥补肝细胞的损失或恢复肝功能。 TMUB1(transmembrane and ubiquitin-like domain-containing 1)在 …
阅读更多 »通过转染双链siRNA 在果蝇S2 细胞中进行RNA 干扰
本方案介绍一种通过试剂向果蝇S2 细胞转运siRNA 以触发RNA 干扰的有效方法。本方案适用于24 孔板内培养的细胞。如果使用其他规格的多孔板、培养瓶或者培养皿,需要根据培养孔的表面积换算细胞密度和试剂用量(表1 ) 。 表1 果蝇细胞转染所用细胞, 转染试剂和siRNA (或者ASO) 的体积 培养板或培养皿 24孔 12孔 6孔 6cm 10cm 每孔 …
阅读更多 »电穿孔转化感受态E.coli TG1细胞的制备
一、材料和试剂 恒温旋转式摇床 三角烧瓶(容量为1或2L) 50ml灭菌离心管 低温高速离心机 SB培养基 细菌培养用胰化蛋白胨 20g 细菌培养用酵母提取物 5g NaCl 0.5g 去离子水 950ml 250mmol/L KCl溶液 10ml 以5N …
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