1.提前一天细胞铺板 提前一天种植细胞,以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整,不要采用过高的细胞密度)。 感染实验 ⑴将EnvirusTM-LV用无血清稀释液稀释(用量参见下表),充分混匀,制成增强剂稀释液。 ⑵将病毒浓缩液用无血清稀释液稀释(用量参见下表),充分混匀,制成病毒稀释液。 注:由于病毒浓度情况不同,具体病毒浓缩液用量酌情依据 …
阅读更多 »Theranostics | 复旦大学儿童医院报道:揭开I型糖尿病的发病机制
该团队在《Theranostics》期刊上发表了题为“Circular RNA circPPM1F modulates M1 macrophage activation and pancreatic islet inflammation in type 1 diabetes mellitus”的论文。实验将circular RNA 通过体内转染 …
阅读更多 »RNA转染与CKS1B和视网膜母细胞瘤细胞研究
视网膜母细胞瘤(RB)是最常见的眼部肿瘤,一般在儿童时期发展,占儿童所有恶性肿瘤病例的2.5%-4%;另外,三分之二的患者在2岁之前被诊断出,95%在5岁之前被诊断出。RB具有独特的临床特点,分为单侧RB约占75%,双侧RB约占25%。RB的发病率在世界上分布不均,在印度、非洲和北美土著后裔中发病率增加。 …
阅读更多 »RNA转染效率低的原因是什么?
RNA转染效率低,可能的原因: · 转染试剂不适合。建议选择RNA专用转染试剂,如Entranster试剂。 · 转染试剂和RNA的量不够,或者比例不对。优化实验条件,调整试剂和RNA用量,优化二者比例。 · 检测时间有问题。适当调整检测时间。 · RNA质量问题。选择纯度高的RNA。 · 细胞状态不佳。调整细胞状态,调整细胞融合度。
阅读更多 »体内转染(entranster)与Trim47调节脑缺血再灌注损伤研究
脑缺血是导致死亡和长期残疾的主要原因。Tripartite Motif-47(Trim47)是Trim家族蛋白的一员,据报道参与了各种疾病的细胞凋亡和炎症。然而,trim47在脑缺血/再灌注(I/R)损伤中的潜在分子机制仍不清楚。现分享一篇体内转染(entranster)与Trim47调节脑缺血再灌注损伤研究的文献,以供参考。 文献地址:https://sc …
阅读更多 »电转染实验时,方波形式的电转条件是什么?
一般来说,方波脉冲的理论起始条件可通过指数衰减参数来确定,即在保持电容不变的情况下,将脉冲长度减半,电压增加约10%。之后的优化可在理论计算的脉冲电压附近以10 V为梯度增减。如果不知道指数衰减脉冲条件,可通过测试电压、电容和脉冲长度范围找到最佳的方波脉冲条件。对于engreen的Entranster-E …
阅读更多 »体内转染(entranster)与lncRNAuc.48+对2型糖尿病大鼠肝糖原的影响研究
糖尿病(diabetes mellitus,DM)是一组代谢性临床综合征,随着社会的发展和人们生活水平的提高,糖尿病的患病率逐年升高。在发达国家,糖尿病患病率已达3% ~7%,成为仅次于癌症、艾滋病、心脑血管病之后第4位需要优先考虑的疾病,已成为世界第5位死亡主因。我国糖尿病人群的构成,以2型糖尿病为主,占糖尿病人群的90%以上,严重影响着人民健康和社会发展 …
阅读更多 »体内转染与TAR DNA结合蛋白功能丧失和继发性脑损伤研究
TAR DNA结合蛋白-43(TDP-43)是一种多功能的DNA和RNA结合蛋白,参与RNA转录、选择性剪接,并可调节细胞中mRNA的稳定性。TDP-43已被证明是患有肌萎缩侧索硬化症(ALS)和额颞叶变性(FTLD)患者中神经元和胶质细胞包涵体病理学培养基的关键组分。最近的报告表明,TDP-43蛋白是一种 …
阅读更多 »腺相关病毒和其他病毒相比有哪些优势?
腺相关病毒( adeno-associated virus,AAV) 是一类细小病毒,基因组为单链DNA,对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。通常需要腺病毒或疱疹病毒帮助其在体内复制扩增。重组腺相关病毒(recombinant AAV, rAAV)是利用AAV2 型基因组与不同血清型的衣壳蛋白基因组结合产生的混合体病毒载体,可将目的基因的CDS 区序列或者 …
阅读更多 »Theranostics | 关于1型糖尿病的新发现
复旦大学儿童医院儿科研究所的团队在《Theranostics》上发表了题为“Circular RNA circPPM1F modulates M1 macrophage activation and pancreatic islet inflammation in type 1 diabetesmellitus”的论文。文章阐明了 …
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