为了达到高的siRNA转染效率,在转染实验过程中,需要注意以下几点: 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RN …
阅读更多 »电转染实验时,细胞密度是多少合适?
进行电穿孔实验时.,需确定每种细胞类型的最佳细胞密度,以使电穿孔效率最大化。对于Entranster-E电转染试剂来说,在含电转试剂的终体系中,电穿孔时的细胞密度一般在1-10×106细胞/ml范围内。对于悬浮细胞,最好是接近10×106细胞/ml的高细胞密度。对于贴壁细胞,建议的细胞密度为1-5×106 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与mir-136诱导骨髓细胞分化研究
免疫细胞谱系规范和功能受祖源和环境因素的影响。免疫细胞,如中性粒细胞、单核细胞和髓系抑制因子细胞在炎症环境中分化的机制尚未完全阐明。现分享一篇RNA转染(Entranster)与mir-136诱导骨髓细胞分化研究的文献,以供参考。
阅读更多 »电转染试剂(Entranster-E)转染Huh7细胞效果图
体内转染(Entranster)与脓毒症相关急性肺损伤研究
脓毒症是一种危及生命的疾病,其特征是器官功能不全。脓毒症被广泛认为是由于感染引起的代偿性抗炎反应和全身炎症反应之间的平衡不稳定。在严重的情况下,炎症、脓毒症可导致急性肺损伤(ALI),更严重地可能会发生急性呼吸窘迫综合征(ARDS)。现分享一篇体内转染(Entranster-in vivo)与丹酚酸B和脓毒症相关急性肺损伤研究的研究,以供参考。
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与多肿瘤相关microRNA调控树突状细胞的存活和寿命研究
树突状细胞(DCS)包括传统的DCS和浆细胞样DCS,是诱导适应性免疫和耐受性的关键性的APC。然而,成熟的DCs也在不同组织和器官中发生凋亡,尤其是淋巴结。DC凋亡是调节耐受和免疫平衡的重要事件。肿瘤使用广泛的免疫抑制策略,如降低树突状细胞(DCS)的寿命和存活率,以减少免疫应答并限制免疫治疗的效果。现分享一篇RNA转染(Entranster)与多肿瘤相关 …
阅读更多 »基因敲除实验和动物体内转染实验(entranster-invivo)对比
基因敲除动物 Entranster-in vivo 技术方法 同源重组等方法获得基因敲除动物,然后进行实验 直接将核酸与转染试剂混合,注射到动物体内 单次实验周期 10~20个月 3天 稳定性 一般 …
阅读更多 »体内外RNA转染(Entranster)与sirtuin3和肾缺血再灌注损伤研究
缺血再灌注(I/R)可引起急性肾损伤,其特征是增加活性氧(ROS)和线粒体损伤,并破坏肾小管上皮细胞的细胞极性、细胞骨架完整性和细胞基质和细胞-细胞相互作用。线粒体蛋白sirtuin 3(SIRT3)可能有助于减轻或预防I/R损伤。SIRT3过表达有助于恢复急性肾损伤模型中线粒体的动 …
阅读更多 »Stem Cells International | 南京大学口腔医学院:与众不同的牙周膜细胞促生机制
研究团队通过病毒感染增强实验(EnvirusTM ,Engreen )发现通过细胞内琥珀酸盐诱导的 HIF-1α 稳定和细胞外琥珀酸盐引起的 GPR91 激活能促进牙周膜细胞增殖、迁移和成骨分化。这项成果发表在了《Stem Cells International》期刊上(“Succinate Supplement Elicited “Pseudohy …
阅读更多 »ECL发光液与AMPA受体在巨噬细胞中TNF-α表达和释放中作用研究
谷氨酸(Glu)是中枢神经系统中一种兴奋性神经递质,并根据其特定的谷氨酸受体发挥多种功能。谷氨酸也是一种营养氨基酸,存在于血液中。谷氨酸受体有两组,它们是离子型受体(IGLURs)和代谢型受体(MGLURs)。IGLURS是根据其对激动剂的选择性分为三个亚型:N-甲基-D-天门冬氨酸受体(NMDA),A-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体(AMPA …
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