siRNA导入细胞有以下几种方法:化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素:细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术(Entranster)是最为常用的方法,而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与DNA酶1和糖尿病研究
脱氧核糖核酸酶I(DNaseI)是38 kDa糖蛋白的非限制性核酸酶。它可以水解单链和双链DNA中的磷酸二酯键。内源性DNA酶I是促进细胞凋亡过程中染色质分解的核酸内切酶之一。作为分泌型内切酶,DNaseⅠ是体液中主要的核酸酶,如血清和尿液。在人类中,胰腺是DNASi I的合成和分泌的主要来源,占血清中D …
阅读更多 »腺病毒实验常见问题
1、腺病毒载体对目的基因的长度是否有要求? 有要求。对E1和E3双缺失的腺病毒载体,比如AdMax的Kit C、Kit D等,其总包装的外源片断要求小于8 kb。而对于只有E1缺失或E3缺失的载体,比如Kit A、Kit B等,外源片断要求小于5 kb。注意,外源片断指包括启动子、外源基因和poly A等在内的整个插入片断。 2、如何提高腺病毒的活性? 提高 …
阅读更多 »DNA转染与RAB31沉默对骨肉瘤细胞增殖和迁徙影响研究
骨肉瘤(Osteosarcoma,OS)是人类原发性恶性骨肿瘤中最常见的一种类型,具有远距离侵袭和局部侵袭的潜在倾向。OS主要见于青少年儿童,首次发病多为15-19岁。骨肉瘤是一种侵袭性恶性肿瘤,起源于间充质(因而是肉瘤)的原始转化细胞,表现为成骨细胞分化和产生恶性骨样。现分享一篇DNA转染(entranster)与RAB31沉默对骨肉瘤细胞 …
阅读更多 »ECL发光液与锌指因子ZNF121和上皮细胞增殖研究
MYC是一种强有力的癌基因蛋白,调节多种细胞过程,包括增殖、凋亡、分化、干细胞特性、衰老和迁移。MYC主要作为转录因子发挥作用,与大量蛋白质相互作用,MYC相互作用蛋白的鉴定和对于理解MYC功能是非常重要的。现分享一篇ECL发光液(enlight)与MYC相互作用蛋白-锌指因子ZNF121和上皮细胞增殖研究 …
阅读更多 »体内转染与miR let-7 和miR-278 调节昆虫变态和卵发生研究
昆虫的发育、变态和繁殖主要受幼激素(JH)和20-羟蜕皮酮(20E)的控制。虽然20E能引起幼虫/若虫蜕皮和变态,但JH通过抑制20E的变质作用来维持幼体的形态。JH也能刺激许多昆虫物种的雌性生殖方面,包括发育前的发育、卵黄生成和卵发生。尽管人们对20E基因中的miRNA调控机制已经有了一定的了解,但对于miRNA与JH基因中的JH信号通路的相 …
阅读更多 »体内转染与NIX/BNIP3L通路在大鼠创伤性脑损伤中潜在作用研究
NIX/BNIP3L被称为促凋亡蛋白,也与有丝分裂有关。以往的研究表明,NIX可能参与脑出血后的神经元凋亡,但在缺血性脑损伤的二尖瓣病变中也起到保护作用。NIX在治疗创伤性脑损伤中的作用尚不清楚。现分享一篇体内转染(engreen)与NIX/BNIP3L通路在大鼠创伤性脑损伤中的潜在作用研究的文献,以供参考。 文献地址:https://journ …
阅读更多 »慢病毒适用于哪些细胞?
慢病毒(Lentivirus)载体是以 HIV-1 (人类免疫缺陷1型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。具有感染谱广泛、可以有效感染分裂期和静止期细胞、长期稳定表达外源基因等优点,因此成为导入外源基因的有力工具。现在慢病毒系统已经被广泛应用到各种细胞系的基因过表达、RNA干扰、microRNA研究以及活体动物实验中。 慢病毒有如下特点: ● 感染范围广 …
阅读更多 »体内转染(entranster)与Mir-191靶向作用于vezf1抑制急性缺血性卒中后血管生成研究
急性缺血性脑卒中(Acute ischemic stroke,AIS)是我国的一大公共卫生问题。血管生成障碍在缺血性脑损伤的发展中起着重要作用。最近的研究已经证实,microRNAs(miRNAs)是血管生成的重要调节因子,但对血管生成相关的microRNAs在AIS中的确切作用知之甚少。现分享一篇体内转染(entranster)与Mir-19 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与三氯乙烯和肝癌发生研究
三氯乙烯(TCE)是一种挥发性有机化学试剂,已广泛应用于工业有机溶剂中,是大气、土壤、地下水和食品中的常见污染物。由于肝脏是主要的TCE靶器官之一,TCE引起的肝损伤在职业工作者中经常被报道,TCE暴露被怀疑与肝癌的风险增加有关。在动物实验中,TCE处理可诱导小鼠肝细胞癌(HCC),但其机制尚不清楚。现分享一篇RNA转染(Entranster)与三氯乙烯和肝 …
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