肝癌是全球第二大癌症死亡原因,每年新增78.25万例,死亡74.55万人。东亚地区肝癌发病率最高,仅中国就占世界总病例和死亡人数的50%左右。肝细胞癌(HCC)占原发性肝癌绝大多数。根据巴塞罗纳临床肝癌分期分类,肿瘤大小、血管浸润和转移是决定肝癌患者临床分期和预后的关键因素。因此,识别与肿瘤生长、侵袭和转移相关的关键分子和信号通路有助于我们了解 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与富亮氨酸重复激酶2加重脑出血诱导的继发性脑损伤研究
富亮氨酸重复激酶2(LRRK2)是家族性和突发性帕金森病(PD)的遗传原因,它与神经元死亡、囊泡运输、线粒体功能障碍和炎症有关。然而,其在脑出血(ICH)引起的继发性脑损伤(SBI)中的作用尚不清楚。现分享一篇体内转染(Entranster)与富亮氨酸重复激酶2加重脑出血诱导的继发性脑损伤研究的文献,以供参考。
阅读更多 »直接克隆法构建重组腺病毒基因组
pShuttle 质粒被用来将携带的目的基因转移到腺病毒载体骨架中。步骤1 ~9 阐述了将目的基因克隆到有双筛选系统的pSh-pkGFP 质粒中。目前在使用的pShuttle 或pSh-pkGFP 中包含一个CMV 启动子驱动的表达盒,,可以用来克隆外源基因或替换启动子。1. 在无菌的05mL 离心管中将外源基因载体和pSh-pkGFP 载体分别用以下条件消 …
阅读更多 »如何能够做好siRNA转染实验?
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮 …
阅读更多 »体内转染与mir-301a抑制和脑缺血/再灌注大鼠的神经保护作用研究
脑缺血病具有发病率高、致残率高、死亡率高等特点,其主要治疗原则是恢复缺血区的血液再灌注。但一旦发生脑缺血,血液再灌注短期恢复后神经损伤会进一步加重,称为脑缺血再灌注(I/R)损伤。总的来说,脑I/R损伤的病理生理机制非常复杂,在I/R损伤过程中涉及到各种元素,如氧化应激、凋亡和炎症反应。更重要的是,炎症反应和细胞凋亡被认为是诱发脑I/R损伤的主要 …
阅读更多 »shRNA转染后,什么时候做RT-PCR最好?
shRNA转染后,进行RT-PCR的最佳时间取决于多种因素,包括细胞类型、转染效率、shRNA的表达和目标基因的降解速度。一般来说,在转染后的24到72小时内进行RT-PCR是比较常见的时间点。具体来说: 24小时后:在这个时间点,可以开始检测到shRNA的表达以及目标基因的初步下调情况。对于一些高效的shRNA,这个时间点可能已经有显著的基因沉默效果。 4 …
阅读更多 »siRNA转染与卫星胶质细胞中P2X7受体研究
嘌呤信号能够引起炎症和免疫反应。卫星胶纸细胞(SGCs)中的P2X嘌呤受体7(P2X7)的激活可能是促进炎症和神经性疼痛中一个必不可少的组成部分。长链非编码RNAs(lncRNAs)参与多种生理和病理过程。现分享一篇针对lncRNA BC168687的小干扰RNA(Entranster)对高糖和高游离脂肪酸环境下卫星胶纸细胞P2X7受体表达的影响的文献,以供 …
阅读更多 »RNA转染与人鼻病毒1B基因敲除和干扰素应答的再激活研究
人鼻病毒(HRV)是属于Picornaviridae家族肠道病毒属的单链正义RNA病毒。它在20世纪50年代首次被发现。将近60年后,已经鉴定出超过100种血清型/基因型病毒。HRVs(HV-A,-B,-C)是所有年龄组,尤其是儿童中呼吸道感染最常见的原因,但尚未开发出有效的治疗HVS的药物。现分享一篇RN …
阅读更多 »ECL发光液与上皮性卵巢癌差异表达蛋白的鉴定及验证研究
卵巢癌是女性死亡的第五大死因,也是最致命的妇科肿瘤。每年新增卵巢癌病例22280例,死亡率15500例,占女性新增癌症病例的3%和所有癌症死亡病例的6%。卵巢上皮性癌(EOC)由于盆腔脏器位置深,早期诊断困难,因此初诊时60%以上的患者处于晚期。EOC的标准治疗是手术,其次是铂类辅助化疗。虽然EOC的治疗 …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与镰刀菌细胞毒性研究
在自然界中,微生物镰刀菌病原体普遍侵入宿主植物、动物和人类,并且共生次生代谢物真菌毒素。除农业经济损失外,以脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)为例,这些物质通常是对食品安全、动物和人类健康带来严重威胁。虽然全世界对食品中DON阈值的许多规定都是严格立法的,但DON对婴儿、青年和老年人群的毒性和安全限度仍存在相当大的争议,这实际上是由于对DON毒性的准确和广泛接受的 …
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