1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮肤,头发,所有徒手接触过 …
阅读更多 »体内转染(entranster)与心肌缺血后背根神经节P2X4导致交感神经活动异常研究
冠状动脉阻塞继发心肌缺血(MI)是一种严重的心脏病,发病率和死亡率都很高。交感传入通路是心肌梗死信号传导的关键。背根神经节(DRG)神经元的感觉输入在控制交感神经输出到心脏的过程中起着重要作用。 心肌缺血可激活交感传入神经末梢,常伴有血压升高和交感传出兴奋,引起交感兴奋反射。冠状动脉闭塞模型还通过激活缺血左心室的感觉神经末梢来诱导交感神经反射。交感 …
阅读更多 »体内转染let-7d(Entranster)与肾细胞癌治疗研究
肾细胞癌(RCC)是成年人肾脏最常见的恶性肿瘤,占肾脏恶性肿瘤的90%以上,恶性程度高。其发病率约为成年人恶性肿瘤的3%,。肾细胞癌预后很差,对放疗、化疗均不敏感。目前,局部肾细胞癌的治疗取得了很大的进展,但是对于转移性肾细胞癌治疗的选择非常有限。因此,鉴定新的肾细胞癌生物标志物以及具有更好疗效的抗肿瘤药物仍亟待解决。mirRNA是内源性的非编 …
阅读更多 »体内转染(entranster)与MST1介导的大鼠脑出血继发性脑损伤研究
脑出血(ICH)是一个严重的公共卫生问题,可导致成人的高致残率和死亡率。细胞凋亡是ICH后继发性脑损伤(SBI)的标志。哺乳动物不育系20样激酶-1(MST1)是一种细胞凋亡促进激酶,是Hippo信号通路的一部分,参与细胞死亡、氧化应激和炎症反应。然而,MST1在ICH诱导的SBI中的作用和潜在机制尚未完全清楚。现分享一篇体内转染(entranster)与M …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与巨噬细胞抗炎作用研究
巨噬细胞(macrophage)活化是宿主防御病原微生物的关键过程,可引起炎症级联反应和炎症介质的释放,如TNF-α、IL-6和NO。反过来这些介质会引起炎症反应以及对邻近组织和巨噬细胞本身产生伤害。现分享一篇DNA转染(Entranster)与巨噬细胞抗炎作用研究的文献,以供参考。
阅读更多 »怎么根据病毒的TCID50计算给毒的MOI值
根据病毒的TCID50值计算给毒的MOI(Multiplicity of Infection,感染倍数)通常需要几个步骤。MOI 是指每个宿主细胞上平均感染的病毒颗粒数。 步骤概述: 知道病毒的TCID50值:TCID50 是一种病毒活性的度量,表示每单位体积(通常为每毫升)病毒悬液中,能在 50% 的细胞文化中引起感染的病毒数量。单位通常是病毒颗粒数/毫升 …
阅读更多 »导师再也不用担心我的体内转染实验了
EntransterTM-in vivo是英格恩生物公司(Engreen Biosystem Co,Ltd.)最新研发合成的用于动物体内转染的转染试剂。 作用原理: EntransterTM-in vivo体内转染试剂,通过纳米技术合成,非脂质体,通过物理作用与核酸结合,浓缩包裹核酸,从而保护核酸免受免疫系统破坏,并通过物理作用将核酸富集在细胞表面,增强核酸 …
阅读更多 »电转染实验时,siRNA有什么要求?
使用高纯度、无菌的siRNA。确定电转染的最佳siRNA浓度。建议在250-750nM最终浓度范围内的进行siRNA不同浓度的梯度实验。建议设置一个非靶向或无意义的siRNA对照序列,以验证实验siRNA的特异性。同时也验证,针对单个基因用多个siRNA序列实验产生的表型是否是由于脱靶 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与膜联蛋白A7和大鼠继发性脑损伤研究
谷氨酸兴奋性中毒参与了脑出血(ICH)引起的继发性脑损伤(SBI)。突触体相关蛋白23(SNAP23)和SNAP25分别参与突触前谷氨酸的释放和突触后谷氨酸受体(NMDA受体)运输,这两者对于谷氨酸介导的兴奋性毒性都是必不可少的。SNAP23和SNAP25具有较高的同源性,SNAP23被证明可与膜联蛋白A7(ANXA7)相互作用。现分享一篇体内 …
阅读更多 »siRNA转染(Entranster)与树突状细胞的表观遗传修饰研究
根据不同的环境,树突状细胞(DC)可能变现为活跃或耐受性,但表观遗传修饰是否参与这些过程鲜为人知。现分享一篇siRNA转染(Entranster-R4000)与树突状细胞的表观遗传修饰研究的文献,显示表观遗传修饰可以调节人体单核细胞来源的DCs(DC)分化为活性或耐受DC。
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