英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
下面以Entranster-R4000试剂为例，说一下mRNA转染步骤（24孔板） 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞：提前一天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞汇合度（Confluence）在30％左右为宜，转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那么 …
阅读更多 »体内转染与HO-1在过敏性哮喘模型小鼠中的作用研究
过敏性哮喘通常被认为是一种以嗜酸细胞炎症为特征的Th2免疫反应。最近的调查显示，Th17细胞在非嗜酸细胞性哮喘（NEA）的发病机制中起重要作用，可导致激素抵抗中性粒细胞性气道炎症。血红素氧合酶-1（HO-1）具有抗炎、抗氧化和抗凋亡作用。然而，它的作用在NEA仍不清楚。先分享一篇运用体内转染siRNA方法（Entranster）研究HO-1在过敏性哮喘模型小 …
阅读更多 »细胞增殖检测的最佳方法——CCK8
CCK8, Cell Counting Kit-8，CCK-8试剂含有WST-8（化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐），是近年新开发的一种更新的水溶性四唑盐检测，原理与WST-1类似：在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与小胶质细胞活化防止脑缺血损伤研究
缺血性中风是导致全球范围内死亡和残疾的主要原因之一，是一个重大的公共卫生问题。为了阐明了缺血性脑损伤的病理机制，科研人员付出了巨大的努力。为此，针对中风引起的神经炎症是治疗中风的一个有吸引力的策略。现分享一篇体内转染（Entranster）与小胶质细胞活化防止脑缺血损伤研究的文献，以供参考。
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与玉米黄矮病毒RMV2编码的RNA沉默抑制物鉴定研究
玉米黄矮病毒RMV2（MYDV-RMV2）导致中国安徽省田间玉米植株的矮化和泛黄症状。现分享一篇ECL发光液（Enlight）与玉米黄矮病毒RMV2编码的RNA沉默抑制物鉴定研究的文献，以供参考。
阅读更多 »siRNA转染（Entranster）与成纤维细胞瘤细胞l929-a研究
L929成纤维细胞瘤细胞（l929-a）和L929纤维肉瘤细胞（l929-n）是不同的细胞系，常用于肿瘤坏死的细胞毒性因子α（TNFα）的研究，TNFa已被报道可诱导两种细胞系的坏死。然而，当比较TNFα诱导的在这两个细胞系的细胞死亡时，l929-n表现出典型的RIP3依赖性细胞坏死，在l929-a中却不是。现分享一篇运用siRNA转染（Entr …
阅读更多 »体内外RNA转染（Entranster）与sirtuin3和肾缺血再灌注损伤研究
缺血再灌注（I/R）可引起急性肾损伤，其特征是增加活性氧（ROS）和线粒体损伤，并破坏肾小管上皮细胞的细胞极性、细胞骨架完整性和细胞基质和细胞-细胞相互作用。线粒体蛋白sirtuin 3（SIRT3）可能有助于减轻或预防I/R损伤。SIRT3过表达有助于恢复急性肾损伤模型中线粒体的动态变化。但关于SIRT3是否能够及如何减轻I/R引起的急性肾 …
阅读更多 »电转染实验影响因素
1 电场参数 电场是电转染的重要因素，细胞在电场的作用下，膜通透性增加或是形成小孔，以完成转染过程。因此电场强度是应该被优化的主要参数。电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。因此，一个适宜的电场强度至关重要。 不同细胞系具有不同的最佳场强值，其确定方法除了实验直接测定比较不同场强下转染率的高低外，还可以 …
阅读更多 »体内转染与儿茶酚丁胺影响神经性疼痛机制研究
神经性疼痛（NPP）是许多中枢神经系统损伤或疾病的结果。以往的研究表明，NPP是由p2x4受体介导的，p2x4受体在背根神经节（DRG）的卫星胶质细胞（sgcs）上表达。儿茶酚丁胺（CST）是一种神经内分泌多功能肽，可能参与了NPP的发病机制。现分享一篇体内转染（engreen）与儿茶酚丁胺影响神经性疼痛机制研究的文献，以供参考。 文献地址：ht …
阅读更多 »一个抑制脑中风的miRNA
MicroRNAs（miRNAs）是一类非编码小RNA，miRNAs能结合到靶基因mRNA的3’非翻译区诱导转录退化和/或抑制翻译。miRNA在多种病理生理过程中发挥着重要的作用。 Let-7c是最丰富且高度保守的miRNA。以往的研究表明，let-7c通过调节细胞增殖和细胞凋亡抑制癌细胞存活率。最近研究表明Let-7c是巨噬细胞极化的重要调节器。 Let- …
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