英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与睫状体神经营养因子和阿尔兹海默症治疗研究
通过其病理特征，即老年斑和神经纤维缠结来抑制阿尔茨海默病（AD）进展，是一种有效的治疗方法。许多研究表明睫状体神经营养因子（CNTF）不仅能够促进神经元生长和维持细胞存活，还可显著降低淀粉样蛋白β（Aβ）聚集和沉积。现分享一篇ECL发光液（enlight）与睫状体神经营养因子和阿尔兹海默症治疗研究的文献，以供参考。
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与微管稳定性研究
微管介导的细胞事件如细胞内转运和细胞极性的维持高度依赖于微管的稳定性，微管稳定性由细胞中微管相关蛋白（MAPs）的集合控制。MAP7结构域蛋白3（Mdp3）近来被认为是微管稳定性的关键调节因子。然而，如何实现这一功能仍然是不清楚的。现分享一篇DNA转染（Entranster）与微 …
阅读更多 »ECL发光液与TIMP-2对结膜滤过泡疤痕作用研究
滤过术是目前治疗青光眼的主要手术方式之一，功能性滤过泡的形成和维持是其成功的关键。术后伤口愈合包括一系列复杂的动态过程。滤过性手术失败的主要原因是手术区术后成纤维细胞增生、胶原沉积和滤过泡疤痕形成，最终可阻断手术过程中建立的房水引流通道。现分享一篇ECL发光液（Enlight）与金属 …
阅读更多 »慢病毒感染后72小时，效率低，细胞已经长满，有什么办法补救？
在慢病毒感染后72小时感染效率较低、细胞已经长满的情况下，可以尝试以下几个措施来提高感染效率并优化实验条件： 细胞传代或重新播种：如果细胞已经长满（汇合度较高），可能会影响慢病毒的感染效率。可以将细胞进行传代，重新播种在新的培养板上，使其达到较低的汇合度（例如30-50%），然后再进行感染。 优化感染时的MOI（Multiplicity of Infecti …
阅读更多 »体内转染（entranster）与半滑舌鳎脾脏巨核细胞病毒诱导蛋白和病毒感染所必需的细胞过程
虹彩病毒科是一个双链、二十面体结构的DNA病毒科，能感染昆虫、两栖动物、鱼类和爬行动物等许多无脊椎动物和脊椎动物。目前，虹彩病毒科分为五个属，其中三个属是从水产养殖物种中分离出来的，即蛙病毒、淋巴孢子病毒和巨核细胞病毒。据了解，30多种养殖鱼类（特别是桂鱼、大黄鱼、石鲷、红海鲷、鲈鱼和胸膜吸虫）都会感染巨链病毒。巨细胞病毒感染可导致30%至100%的死亡率， …
阅读更多 »siRNA细胞转染操作步骤
下面以Entranster-R4000试剂为例，说一下siRNA转染步骤（24孔板） 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞：提前一天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞汇合度（Confluence）在30％左右为宜，转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那 …
阅读更多 »体内转染（entranster）与荷花碱通过调节nrf2信号对缺血性卒中线粒体的保护作用研究
缺血性中风是导致死亡和长期残疾的主要原因。为了克服临床治疗的局限性，迫切需要有前景的神经保护化合物。神经保护剂仅限于单一靶向药物，这进一步限制了其临床疗效。由于大脑特殊的能量需求，以线粒体为中心的能量微环境是缺血性脑卒中复杂病理学研究的新热点。现分享一篇体内转染（entranster）与荷花碱通过调节nrf2信号对缺血性卒中线粒体的保护作用研究的文献，以供参 …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与ZNF121和乳腺上皮细胞的靶基因调控研究
新型锌指蛋白121（ZNF121）已被证明在物理和功能上与MYC癌蛋白相关联，以调节细胞增殖和可能的乳腺癌发展。为了进一步了解ZnF121在细胞增殖和癌变过程中的作用，现分享一篇DNA转染（Entranster）与ZNF121和乳腺上皮细胞的靶基因调控研究的文献，以供参考。
阅读更多 »DNA转染实验中的关键点
1）优化条件：质粒不同，所转染的细胞不同及定量的准确性等因素会导致在一些情况下所做的转染不在该优化条件内。这种情况下需要对质粒转染试剂的配比进行优化。另外，可选用更合适的转染试剂，如Entranster试剂。 2）抑制剂：不要在用于制备DNA-转染试剂复合物的培养基中使用抗生素，EDTA，柠檬酸盐，磷酸盐，RPMI，硫酸软骨素，透明质酸，硫酸葡聚糖或其他硫酸 …
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