用siRNA进行transient transfection不稳定,几代细胞以后,症状就会消失,所以在转染几天(1-3)后要立刻抽提蛋白,进行分析。 用质粒中的shRNA进行转染,如果质粒含有抗生素位点,可以进行筛选,获得较稳定的细胞株系,但需要时间较长 用病毒中的shRNA进行感染(infection),抗生素筛选后,可以获得很稳定细胞株系。 瞬时RNAi …
阅读更多 »体内转染与LncRNA AK016739抑制成骨细胞分化和骨形成研究
中老年妇女绝经后骨质疏松症研究的发病率为50%,然而现有疗法的效果并不理想。新的证据证明长非编码RNA(lncrnas)与多种生理和病理过程相关,包括发育、致癌和骨的形成。然而,有关lncRNAs调节骨形成的报道相对有限。现分享一篇体内转染(entranster)与LncRNA AK016739抑制成骨细胞分化和骨形成研究的文献,以供参考。
阅读更多 »转导细胞的检测分析
1. 制备载体储备液。 2. 以每个靶细胞不同的MOI 或载体剂量转导靶细胞。 腺病毒载体: 100~ 10 000 个病毒颗粒/靶细胞。腺相关病毒载体: 10 000~ 100 000 个病毒基因组/靶细胞。慢病毒载体: MOI5 ~ 500 。 3 在转导后3 ~ 5 天对转入基因的表达进行评价。 对于载体编码蛋白质,有多种方法可用来评价转导细胞中转入基 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与肺癌细胞凋亡研究
肺癌是最常见的恶性肿瘤之一,是全世界范围内恶性肿瘤死亡原因的首位,非小细胞肺癌约占肺癌病例的80%。肺癌被认为是一种遗传疾病,内源性致病基因的异常表达导致基因组的不稳定性,从而增加癌细胞的运动性和侵袭性。尽管可以成功治疗原发性恶性肿瘤,但仍有四分之一以上的患者在术后复发和远处转移。现分享一篇运用体内转染(Entranster-in vivo)的方 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与siRT3过表达抑制肾肿瘤细胞生长研究
SIRT3是NAD+依赖性的线粒体蛋白脱乙酰酶,参与调节中枢代谢和线粒体蛋白稳定。SIRT3在肾透明细胞癌(CCRCC)中被下调,这是肾癌的最常见形式。尽管ccRCC具有典型的Warburg样表型、线粒体功能障碍和脂肪沉积增高的特征,但SIRT3是否参与肿瘤的发生和发展尚不清楚。现分享一篇ECL发光液(enlight)与siRT3过表达抑制肾肿瘤细胞生长研究 …
阅读更多 »体内外RNA转染(Entranster)与sirtuin3和肾缺血再灌注损伤研究
缺血再灌注(I/R)可引起急性肾损伤,其特征是增加活性氧(ROS)和线粒体损伤,并破坏肾小管上皮细胞的细胞极性、细胞骨架完整性和细胞基质和细胞-细胞相互作用。线粒体蛋白sirtuin 3(SIRT3)可能有助于减轻或预防I/R损伤。SIRT3过表达有助于恢复急性肾损伤模型中线粒体的动态变化。但关于SIRT3是否能够及如何减轻I/R引起的急性肾 …
阅读更多 »体内转染与一氧化碳对心脏骤停后改善神经功能作用研究
功能失调的线粒体与心脏骤停(CA)后的神经损伤有关。尽管一氧化碳(CO)在临床前组织损伤模型中显示出各种潜在的治疗作用,但其在CA中的作用机制仍不清楚。现分享一篇体内转染(engreen)与一氧化碳在老年大鼠心脏骤停后改善神经功能的新作用研究的文献,文献旨在研究一种新的一氧化碳放分子对CA术后大脑线粒体功能障碍和神经损伤的影响。 文献地址:htt …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与Trim2和神经炎症和认知缺陷研究
神经炎症作为衰老过程的主要特征,参与了包括阿尔茨海默病(AD)在内的多种衰老相关疾病的发病机制。髓样细胞触发受体2(Tyr2)是一种新发现的AD风险基因,通过调节炎性细胞因子的释放调节外周组织的炎症过程。然而,到目前为止,Trim2在与神经相关的神经炎症、认知缺陷和AD样神经病理学中的作用尚不清楚。现分享一 …
阅读更多 »RNA转染过程中细胞毒性大怎么办?
RNA转染时细胞毒性大可能的原因有: 1.RNA与转染试剂比例不佳。建议进行预实验优化。 2.细胞密度不佳。调整细胞密度。 3.细胞污染。建议彻底清洁所有细胞培养相关用品。 4.转染试剂毒性较大。建议选择毒性较小的非脂质体转染试剂,如纳米材料的Entranster试剂等。
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与玉米黄矮病毒RMV2编码的RNA沉默抑制物鉴定研究
玉米黄矮病毒RMV2(MYDV-RMV2)导致中国安徽省田间玉米植株的矮化和泛黄症状。现分享一篇ECL发光液(Enlight)与玉米黄矮病毒RMV2编码的RNA沉默抑制物鉴定研究的文献,以供参考。
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