微管蛋白已知会有独特的翻译后修饰(PTMS),如脱酪氨酸和聚谷氨酰化,特别是在非结构化羧基末端尾(CTTS)中。然而,更多传统的微管蛋白的PTMS及其在微管性质和功能的调节中的作用仍然不明确。现分享一篇DNA转染(Entranster)与微管蛋白多翻译后修饰的蛋白质组学分析和功能表征研究的文献,以供参考。
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与抗病毒天然免疫研究
天然免疫是保护宿主细胞免受微生物感染的第一道屏障。TANK结合激酶1(TBK1)介导的I型干扰素(IFN)诱导在宿主抗病毒反应及免疫平衡方面起着至关重要的作用。现分享一篇运用DNA转染(Entranster-H4000)研究抗病毒天然免疫的文献,以供参考。
阅读更多 »DNA转染效率影响因素
细胞DNA转染效率的影响因素 1.细胞密度 一般来说,当细胞密度达到60%~80%时进行转染可以取得较高的转染效率,过低或过高都会影响转染效果。 2.细胞状态 这点非常关键,很多时候传代次数太少或者太多都将导致细胞对转染试剂敏感度的改变。因此,为了提高转染效率以及转染稳定性、降低细胞毒性,应尽量使用适度传代的细胞系,并在不同次实验时保持细胞传代次数的 …
阅读更多 »细胞DNA转染实验步骤
下面以Entranster-H4000,DNA转染试剂为例,简要说明DNA细胞转染实验步骤 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞密度在60%左右为宜。 2.转染过程 ⑴将0.8μg的DNA用25μl无血清稀释液稀释,充分混匀,制成DNA稀释液。 注意:无血清稀释液建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或1640。 ⑵将2μl的 …
阅读更多 »质粒DNA转染注意事项
1.启动子的选择启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响,但是对转染结果却有着微妙的影响。2.质粒的大小和质量线性化还是超螺旋会影响转染结果:超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多,特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟,相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质粒 …
阅读更多 »DNA转染与促红细胞生成素在软刺裸鲤适应低氧中的作用研究
促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)是一种糖蛋白激素,在红细胞生成中起着重要的调节作用,并启动应对环境挑战的细胞稳态反应。青藏高原是缺氧适应的天然实验室。软刺裸鲤(Gymnocypris dobula)是一种高度专业化的高原裂胸鱼,隶属于青藏高原海拔大于4500米的高海拔淡水河和池塘。但EPO在裂腹鱼适应低氧中的作用尚不清楚。现分享一篇DN …
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