透析被用于从样品中除去盐和其他杂质,样品被放置在一个多孔的透析袋中,只允许比孔小的分子流出。透析袋被放在大体积的水或者缓冲液中,允许内容物外流,最后通过透析缓冲液把透析袋中的缓冲液取代。透析袋在使用前要洗净,所有的操作都要带手套。1. 根据合适的分子量截留选择透析袋。2. 准备透析袋,做成一个口袋,4’C 储存。3. 将透析袋放在一个大体积的烧杯 …
阅读更多 »western-blot化学发光(ECL)的特异性差是什么原因?
特异性差,出现杂带或非特异条带的原因可能有以下几个方面: 1. 蛋白上样量过大。可降低蛋白上样量。 2. 一抗是多克隆抗体,或一抗、二抗浓度太高。可更换成单克隆抗体,或降低抗体浓度,缩短抗体孵育时间,优化一抗和二抗的使用浓度。 3. 洗膜不充分。可增加洗膜次数和Buffer用量,延长洗膜时间,或在Wash Buffer中添加终浓度0.05%的Tween-20 …
阅读更多 »2024诺贝尔化学奖得主David Baker和他的Rosetta模型
Rosetta模型是一套用于蛋白质结构预测、分子对接和设计的计算工具集,由2024年诺贝尔化学奖得主,华盛顿大学David Baker教授的实验室开发。Rosetta最初被设计用于蛋白质结构预测,但如今已发展成一套多功能的平台,被广泛应用于蛋白质折叠、蛋白质-蛋白质和蛋白质-小分子相互作用、以及新蛋白质设计等领域。 Rosetta模型的核心功能 1.蛋白质 …
阅读更多 »抗体的使用以及储存方式
一、什么是抗体 抗体是一些淋巴细胞直接抵抗外来分子所产生的蛋白质,它们是免疫系统的重要组成成分,是实验室的重要工具。 多克隆抗体是用抗原注射动物产生的,针对相同蛋白质的不同抗原决定簇直接产生的各种不同亲和性的多种免疫球蛋白的混合物。 单克隆抗体是在体外制备的,是免疫淋巴瘤细胞与分泌抗体的浆细胞融合后产生的,整个培养只产生一种抗体(常是IgG) ,直接抵抗外来 …
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