英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
睾丸生殖细胞瘤(Testic..cell tumors,TGCTs)是青少年和青年男性最常见的实体瘤之一,约占2012年全世界20～39岁男性肿瘤的8.9%。肿瘤生长受癌细胞与肿瘤微环境的串扰调制。最近的进展表明，肿瘤细胞中的miRNA功能障碍可以调节肿瘤微环境以间接决定其进展。然而，这一过程在睾丸生殖细胞肿瘤（TGCTs）中知之甚少。现分享一篇RNA转染（ …
阅读更多 »RNA转染与mir-34a通过靶向Foxp3损害Treg/Th17平衡研究
调节性T（Treg）细胞亚群及其特异性转录Foxp3是通过控制效应器T（Teff）细胞反应维持免疫稳态的独特细胞类型。尽管有Treg/teff紊乱的Treg细胞中的缺陷通常会导致自身免疫性疾病，但其确切机制尚未完全揭示。现分享一篇RNA转染（entranster）与mir-34a通过靶向Foxp3损害Treg/Th17平衡研究的文献，以供参考。 …
阅读更多 »通过转染双链siRNA 在哺乳动物细胞中进行RNA 干扰
长链dsRNA 不能用于多数哺乳动物细胞中，这是由于它能诱导干扰素反应而引发基因表达和细胞凋亡的变化。本方案介绍了一种向哺乳动物细胞中转入短的双链siRNA 的方法，双链siRNA 因其长度过短而不能引起与dsRNA 相关的序列非特异性反应。本方案适用于24 孔板中生长的细胞。如果使用了其他规格的多孔板、培养瓶或者培养皿，则需要根据培养孔的表面积换算细胞密度 …
阅读更多 »siRNA细胞转染注意事项
为了达到高的转染效率，在转染实验过程中，需要注意以下几点： 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与STAT3和髓源性抑制细胞研究
髓源性抑制细胞（MDSC）是一种免疫抑制性网络的主要组成部分。STAT3在调节MDSC方面有重要作用。现分享一篇用RNA转染试剂Entranster-R4000转染miRNA与STAT3和MDSC研究的文献，研究中指出，STAT3的表达可能是由miR-17-5p和miR-20a调节的，研究结果表明miR-17-5p和miR-20a可能通过阻断S …
阅读更多 »siRNA转染（Entranster）与成纤维细胞瘤细胞研究
L929成纤维细胞瘤细胞（l929-a）和L929纤维肉瘤细胞（l929-n）是不同的细胞系，常用于肿瘤坏死的细胞毒性因子α（TNFα）的研究，TNFa已被报道可诱导两种细胞系的坏死。然而，当比较TNFα诱导的在这两个细胞系的细胞死亡时，l929-n表现出典型的RIP3依赖性细胞坏死，在l929-a中却不是 …
阅读更多 »siRNA转染效率不理想怎么办？
siRNA转染效率不理想，常见的原因有： 1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这时转染效率 …
阅读更多 »siRNA转染（Entranster）与细胞骨架蛋白和肝肺综合征研究
肝肺综合征（HPS）是肝病，肺内血管扩张（IPVD）和低氧血症的三联征，动脉低氧血症可引起肺血管重构（PVR）。在最近的研究中，与HPS有关的PVR中肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用已确定；细胞骨架蛋白的变化在细胞增殖中起着重要的作用。但与HPS有关的PVR中细胞骨架蛋白表达与分子机制相关性知之甚少。现分享一篇siRNA转染（Entranster- …
阅读更多 »RNA转染与脊髓损伤后神经细胞凋亡研究
脊髓损伤（SCI）是一种常见的创伤，在损伤组织初始损伤后小时和几天内会有二次细胞变性的发生，会影响到感觉和病变部位运动信号以及神经系统的传导。脊髓损伤后的神经退行性疾病是严重的，其中许多与SCI患者终生残疾有关。现分享一篇RNA转染（Entranster）与脊髓损伤后神经细胞凋亡研究的文献，以供参考。
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与CHL1与胶质瘤细胞研究
与L1CAM同源（接近同源的L1）的细胞粘附分子（CHL1）是细胞粘附分子L1（L1CAM）基因家族的一个成员。虽然其表达和功能已经在一些肿瘤的报道，在小鼠胶质瘤发生发展中的作用尚不清楚。现分享一篇RNA转染（Entranster）与CHL1与胶质瘤细胞研究的文献，以供参考。
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