非霍奇金淋巴瘤(NHL)是具有很强异质性的一组独立疾病的总称。依据细胞来源将其分为三种基本类型:B细胞、T细胞和NK/T细胞NHL。临床大多数NHL为B细胞型,占总数70%~85%。NHL对放疗敏感。越来越多的证据表明mirRNA在调节细胞放射敏感性中起重要作用。现上传一篇RNA转染(Entranster …
阅读更多 »RNA转染(entranster)与il-17下调小鼠胶原性关节炎嗅间充质干细胞的免疫抑制能力研究
嗅间充质干细胞(oe-mscs)是嗅觉固有层中一种新的常驻干细胞类型。oe-mscs通过调节t细胞的反应,包括调节性t细胞(treg)的上调和th1/th17细胞的下调而发挥其免疫抑制能力。作为炎性细胞因子,il-17在胶原诱导性关节炎(cia)的发展过程中起着关键的作用。然而,目前尚不清楚il-17水平的升高是否会影响oe-mscs在炎症状态下的免疫抑制功 …
阅读更多 »RNA转染与骨形态发生蛋白-2调控PMVECs的肌源性分化研究
肝功能不全和肝硬化影响多种器官系统的脉管系统,导致器官功能受损,导致发病率和死亡率增加。肝肺综合征(HPS)是一种发生在肝硬化晚期的肺微血管疾病,加重原发性肝脏疾病,并引起多种相关并发症。由于HPS在全球范围内受到越来越多的关注,在过去几十年中,HPS的病理研究取得了进展。然而,HPS的病理生理机制尚未确定。 现分享一篇RNA转染(Entranster)与骨 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与利拉鲁肽和MC3T3-E1细胞凋亡研究
近年来,对肠促胰岛素和骨的关系的兴趣不断增加。之前的研究已经表明胰高血糖素样肽-1(GLP-1)及其受体激动剂对骨骼代谢具有有益的合成代谢作用,如通过肠-骨轴促进成骨细胞的增殖和分化。然而,对于GLP-1对成骨细胞凋亡的影响及其相关机制并不清楚。现分享一篇RNA转染试剂(Entranster)与利拉鲁肽和 …
阅读更多 »怎样做好siRNA细胞转染实验
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮 …
阅读更多 »电转染实验影响因素
1 电场参数 电场是电转染的重要因素,细胞在电场的作用下,膜通透性增加或是形成小孔,以完成转染过程。因此电场强度是应该被优化的主要参数。电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。因此,一个适宜的电场强度至关重要。 不同细胞系具有不同的最佳场强值,其确定方法除了实验直接测定比较不同场强下转染率的高低外,还可以 …
阅读更多 »siRNA转染(Entranster)与成纤维细胞瘤细胞l929-a研究
L929成纤维细胞瘤细胞(l929-a)和L929纤维肉瘤细胞(l929-n)是不同的细胞系,常用于肿瘤坏死的细胞毒性因子α(TNFα)的研究,TNFa已被报道可诱导两种细胞系的坏死。然而,当比较TNFα诱导的在这两个细胞系的细胞死亡时,l929-n表现出典型的RIP3依赖性细胞坏死,在l929-a中却不是。现分享一篇运用siRNA转染(Entr …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与二氢杨梅素抑制NLRP3炎性体依赖的细胞焦亡研究
越来越多的证据表明,细胞焦亡和炎性细胞程序性死亡与动脉粥样硬化有关;然而,其潜在的机制仍有待澄清。二氢杨梅素(Dihydromyricetin,DHM),一种天然的黄酮类化合物,据报道有抗氧化和抗炎的生物活性。然而,DHM对于动脉粥样硬化相关细胞焦亡的影响尚不清楚。现分享一篇RNA转染(Entranster)与二氢杨梅素抑制 NLRP3炎性体依赖的细胞焦亡研 …
阅读更多 »siRNA转染效率不理想的原因是什么?
siRNA转染效率不理想,常见的原因有:1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率和总 …
阅读更多 »细胞RNA转染实验的一些建议
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮肤,头发,所有徒手接触过 …
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