英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
为了达到高的转染效率，在转染实验过程中，需要注意以下几点： 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与丝切蛋白敲降和小鼠出血性脑损伤研究
脑血管破裂引起的脑内出血（ICH）与死亡率和发病率显著相关。临床研究的重点是减轻原发性损伤，血肿形成和扩张，这在很大程度上是无效的，表明继发性损伤引起的炎症贯穿于整个损伤过程。现分享一篇 体内转染（Entranster）与丝切蛋白敲降和小鼠出血性脑损伤研究的文献，以供参考。
阅读更多 »细胞转染siRNA后，目标基因的表达反而升高的原因是什么？
siRNA转染后目标基因不降反升的现象可能由多种原因引起，常见的因素包括： siRNA设计不合理： siRNA的靶点选择不佳，未能有效靶向目标基因的mRNA，导致抑制效果差或反而激活了基因表达。可以尝试设计不同的siRNA靶点或使用更为优化的siRNA工具进行设计。 转染效率问题： 低转染效率可能导致siRNA无法进入足够多的细胞，从而未能有效抑制目标基因。 …
阅读更多 »shRNA转染实验步骤
下面以Entranster-R4000试剂为例，说一下shRNA转染步骤（24孔板） 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞：提前一天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞汇合度（Confluence）在30％左右为宜，转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那 …
阅读更多 »体内转染siRNA （Entranster）的方法研究肺微血管内皮功能
小GTP酶Rab5可以控制囊泡接到的质膜蛋白运输，其在血管内皮（VE）-钙黏蛋白的内化作用功能仍然未知，血管内皮（VE）-钙黏蛋白是一种内皮特异性跨膜元件，可以调节内皮细胞的极性和屏障功能。现分享一篇应用体内转染siRNA （Entranster-in vivo）的方法研究肺微血管内皮功能的文献，以供参考。
阅读更多 »动物体内转染实验，局部注射，应如何取样观察结果？
由于局部注射容易造成药液分布不均，在注射的近端，药液浓度高，效果明细；远端，药液浓度低，效果低一些。所以，一方面，需要尽量将药液均匀覆盖全部靶组织，另一方面，后续实验取样时，在保证实验的情况下，尽量取注射区域附近的组织，不取或者少取药液覆盖差的组织，以增加实验效果。 如需了解更多关于动物体内转染试剂的信息，请点击https://www.engr …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与肺癌细胞凋亡研究
肺癌是最常见的恶性肿瘤之一，是全世界范围内恶性肿瘤死亡原因的首位，非小细胞肺癌约占肺癌病例的80%。肺癌被认为是一种遗传疾病，内源性致病基因的异常表达导致基因组的不稳定性，从而增加癌细胞的运动性和侵袭性。尽管可以成功治疗原发性恶性肿瘤，但仍有四分之一以上的患者在术后复发和远处转移。现分享一篇运用体内转染（Entranster-in vivo）的方 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与丹参酮ii-磺酸钠和BKca通道研究
丹参酮ii-磺酸钠（ds-201）是丹参酮ii-a的水溶性衍生物，可诱导血管舒张并激活BKca通道。为了探讨ds-201在BKca通道上的作用机制，现分享一篇ECL发光液（enlight）与丹参酮ii-磺酸钠和BKca通道研究的文献，以供参考。 文献地址：https://www.nature.com/articles/aps201485
阅读更多 »体内转染（entranster）与蛛网膜下腔出血后早期脑损伤研究
钠/氢交换因子1（NHE1）在生理条件下维持中枢神经系统（CNS）的细胞内PH（phi）稳态中起着重要作用，并与脑缺血引起的神经元死亡和细胞内Na离子和Ca离子超载有关。然而，其在蛛网膜下腔出血（SAH）诱发的早期脑损伤（EBI）中的作用和潜在机制尚未得到充分探讨。现分享一篇体内转染（entranster）与蛛网膜下腔出血后早期脑损伤研究的文献，以供参考。 …
阅读更多 »DNA转染与干细胞自我更新和多能性维持的研究
干细胞是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的原始细胞，包括胚胎干细胞、成体干细胞和诱导多能干细胞（IPS）。干细胞具有非常重要的理论研究意义和临床应用价值。利用胚胎干细胞建立多种细胞类型的体外分化系统，使人们能够在细胞和分子水平上研究哺乳动物的发育过程；不同发育阶段的细胞可确定胚胎发育和细胞分化的分子机制 …
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