可从以下几方面进行优化: 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如 …
阅读更多 »哪种RNA转染试剂效果更好? Turbofect or EntransterTM-R4000?
近期,上海公卫临床研究中心的一位研究生应用两种转染试剂Turbofect transfection reagent(Thermo)和 EntransterTM-R4000(Engreen)进行了一次RNA转染比较。比较情况如下: 实验方法 转染试剂:Turbofect transfection reagent(Thermo)和 EntransterTM-R4 …
阅读更多 »Plos one 2015:肺癌细胞凋亡的调控——ENTPD5
肺癌是发病率和死亡率增长最快,对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。近50年来许多国家都报道肺癌的发病率和死亡率均明显增高。 肺癌被认为是一种遗传性疾病,其中异常的内源性致病基因的表达造成基因组不稳定,增强肿瘤细胞的活力和侵袭性。尽管成功治疗原发性恶性肿瘤,仍有在1/4以上的术后患者复发、转移。 ENTPD5是一种内质网酶,水解UDP为UMP,促进蛋白的N …
阅读更多 »ECL发光液与亚麻子油和老龄公鸡睾酮相关基因和蛋白质表达研究
公鸡的繁殖性能在家禽生产中起着重要作用。男性生殖腺、雄激素和精子发生对男性维持正常的生殖功能至关重要。同时,年龄也是影响公鸡繁殖性能的重要因素。公鸡生育高峰在37周左右,50~55周左右下降。然而,商业饲养的公鸡往往被期望在更长的时间内保持较高的生育率。如何提高老龄公鸡的生育能力已成为亟待解决的重要问题。ω-3/n-3多不饱和脂肪酸(ω-3/n-3 pufa …
阅读更多 »ECL发光液与睫状体神经营养因子和阿尔兹海默症治疗研究
通过其病理特征,即老年斑和神经纤维缠结来抑制阿尔茨海默病(AD)进展,是一种有效的治疗方法。许多研究表明睫状体神经营养因子(CNTF)不仅能够促进神经元生长和维持细胞存活,还可显著降低淀粉样蛋白β(Aβ)聚集和沉积。现分享一篇ECL发光液(enlight)与睫状体神经营养因子和阿尔兹海默症治疗研究的文献,以供参考。
阅读更多 »做好siRNA转染的要点
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮 …
阅读更多 »体内转染与microRNA-27a控制结核分枝杆菌的细胞内存活研究
结核分枝杆菌(MTB)引起的结核病每年造成数百万人死亡,由于耐药结核病的快速增长,迫切需要开发新的抗结核药物。虽然自噬可调节MTB的细胞内存活,但钙离子(Ca2+)信号在MTB感染期间调节自噬的作用仍不清楚。现分享一篇体内转染与MicroRNA-27a通过调节钙化相关自噬来控制结核分枝杆菌的细胞内存活研究的文献,以供参考。 文献地址:https …
阅读更多 »CNS neuroscience &therapeutics | 北京大学周长满教授团队报道:发现PDCD5在大脑出血中的新作用
周长满教授团队在《CNS neuroscience &therapeutics》期刊上发表的“The Involvement of Programmed Cell Death 5 (PDCD5) in the Regulation of Apoptosis in Cerebral Ischemia/Reperfusion Injury“文 …
阅读更多 »体内转染与miR-155表达上调和脓毒症患者免疫抑制研究
脓毒症是一种主要是由于感染而导致的全身炎症反应,可导致多器官功能障碍综合征,死亡率高。虽然在过去十年中脓毒症的预防和控制取得了进展,但脓毒症仍然是ICU(ICU)患者死亡的主要原因,早期诊断和评估是脓毒症患者预后的关键。因此,开发一种生物标志物用于早期诊断和准确的预后评估是必要的。现分享一篇体内转染(Ent …
阅读更多 »ECL发光液与重组弓形虫CDPK3接种对实验性弓形虫保护性免疫研究
弓形虫是一种普遍存在的、专性的细胞内病原体,可感染包括人在内的几乎所有的恒温动物。目前尚未有特效药物或疫苗能够防控弓形虫病。钙依赖性蛋白激酶(CDPKs)广泛的存在于植物、绿藻和顶复门原虫中,且不存在哺乳动物中。CDPKs在钙离子的调控下,主要参与入侵、胞内增值、逸出、运动和蛋白分泌等重要生物功能的调节。由于其不存在于哺乳动物中,CDPKs成为 …
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