1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮肤,头发,所有徒手接触过 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与细胞自噬和大鼠缺血性损伤研究
卒中尤其是缺血性卒中,可能导致严重的神经功能障碍,甚至死亡,在世界范围内有较高的发病率和死亡率。脑缺血后神经元凋亡、自噬、坏死等形态学变化产生细胞死亡的复杂特征。细胞自噬参与了II型程序性细胞死亡,并且在脑缺血中,自噬作用在累积。自噬作用是复杂的,取决于大脑的成熟度,区域的缺血严重程度等。现分享一篇运用体内转染(Entranster-in viv …
阅读更多 »DNA转染与干细胞自我更新和多能性维持的研究
干细胞是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的原始细胞,包括胚胎干细胞、成体干细胞和诱导多能干细胞(IPS)。干细胞具有非常重要的理论研究意义和临床应用价值。利用胚胎干细胞建立多种细胞类型的体外分化系统,使人们能够在细胞和分子水平上研究哺乳动物的发育过程;不同发育阶段的细胞可确定胚胎发育和细胞分化的分子机制 …
阅读更多 »ECL发光液(Enlight)与弓形虫疫苗研究
弓形虫是一种无处不在的原生动物寄生虫,能感染所有恒温动物,包括哺乳动物和鸟类。蛋白质二硫键异构酶(PDI)可以移位到弓形虫速殖子细胞表面,参与调解病原微生物和宿主细胞的相互作用。现分享一篇ECL发光液(Enlight)在弓形虫疫苗研究中应用的文献,以供参考。
阅读更多 »体内转染(entranster)与山奈酚保护小鼠免受d-galn/lps诱导的急性肝功能衰竭影响研究
急性肝功能衰竭(ALF)是一种严重的临床综合征,其特点是无原发性肝病患者肝细胞大量坏死,肝功能明显失代偿,其发病率和死亡率均较高。迄今为止,除了肝移植外,没有有效的治疗方法。因此,寻找治疗ALF的有效药物尤为重要。山奈酚是一种黄酮类化合物,具有抗炎、抗氧化等作用。在肝病治疗中,山奈酚在不同的肝病中有不同的作用。然而,关于山奈酚对ALF影响的研究还很少。现分享 …
阅读更多 »细胞RNA转染的建议
为了做好RNA转染实验,提出几点关于细胞RNA转染实验的建议,供大家参考: 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »动物体内转染操作视频(engreen)
siRNA转染至细胞有哪些方法?
siRNA导入细胞有以下几种方法:化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素:细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术(Entranster)是最为常用的方法,而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好 …
阅读更多 »RNA转染(entranster)与il-17下调小鼠胶原性关节炎嗅间充质干细胞的免疫抑制能力研究
嗅间充质干细胞(oe-mscs)是嗅觉固有层中一种新的常驻干细胞类型。oe-mscs通过调节t细胞的反应,包括调节性t细胞(treg)的上调和th1/th17细胞的下调而发挥其免疫抑制能力。作为炎性细胞因子,il-17在胶原诱导性关节炎(cia)的发展过程中起着关键的作用。然而,目前尚不清楚il-17水平的升高是否会影响oe-mscs在炎症状态下的免疫抑制功 …
阅读更多 »体内转染与HO-1在过敏性哮喘模型小鼠中的作用研究
过敏性哮喘通常被认为是一种以嗜酸细胞炎症为特征的Th2免疫反应。最近的调查显示,Th17细胞在非嗜酸细胞性哮喘(NEA)的发病机制中起重要作用,可导致激素抵抗中性粒细胞性气道炎症。血红素氧合酶-1(HO-1)具有抗炎、抗氧化和抗凋亡作用。然而,它的作用在NEA仍不清楚。先分享一篇运用体内转染siRNA方法(Entranster)研究HO-1在过敏性哮喘模型小 …
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