质粒的构建:启动子的选择 启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响,但是对转染结果却有着微妙的影响。 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果:超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多,特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟,相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如 …
阅读更多 »ECL发光液与五味子提取物对胆汁淤积的肝保护作用研究
胆汁淤积症是一种由胆汁形成或分泌障碍引起的具有毒性胆汁酸滞留的临床综合征。各种肝病由胆汁淤积发展而来,包括胆道闭锁、原发性硬化性胆管炎和原发性胆汁性肝硬化。石胆酸(lca)是一种有毒、疏水的二级胆汁酸,主要由鹅去氧胆酸的细菌7α-去氢氧化作用在肠道内形成。胆汁淤积症患者的LCA水平升高。LCA处理后的啮齿类动物可发生胆汁淤积和肝损伤,因此大鼠已被 …
阅读更多 »30个关于CCK-8的Q&A
Q1: 一个孔中应接种多少个细胞? A1: 当使用标准96孔板时,贴壁细胞的最小接种量至少为1,000 个/孔 (100μl 培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2,500 个/孔 (100μl 培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK-8溶液。 Q2: 能否用3 …
阅读更多 »如何快速实现蝗虫、七鳃鳗、猪等(非小鼠)动物的体内基因敲除/表达?
如何快速实现蝗虫、七鳃鳗、猪等动物的基因敲除呢? 如果实验室研究人体疾病基因,需要稳定表达时,我们可能会选择基因工程小鼠,但如果课题组研究的是其他哺乳动物,比如猪、蝗虫、鱼之类的,基因工程的工作就相对复杂了。首先要设计基因载体,然后打入靶细胞进行同源重组,再培养细胞、筛选……一套工夫下来,要不目的基因没重组,要不模型全死了。要不找公司做?老牌的公司构建基因工 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与病毒性心肌炎治疗研究
柯萨奇病毒是病毒性心肌炎,胰腺炎和无菌性脑膜炎的重要病原体,但没有具体的抗病毒治疗试剂的临床应用。RNA干扰技术可防止病毒感染。现分享一篇运用体内转染方法(Entranster-in vivo)研究治疗病毒性心肌炎的文献,以供参考。
阅读更多 »一个抑制脑中风的miRNA
MicroRNAs(miRNAs)是一类非编码小RNA,miRNAs能结合到靶基因mRNA的3’非翻译区诱导转录退化和/或抑制翻译。miRNA在多种病理生理过程中发挥着重要的作用。 Let-7c是最丰富且高度保守的miRNA。以往的研究表明,let-7c通过调节细胞增殖和细胞凋亡抑制癌细胞存活率。最近研究表明Let-7c是巨噬细胞极化的重要调节器。 Let- …
阅读更多 »Experimental Neurology | circle RNA重庆医科大学钟建军教授团队报道:调控疾病的新方向
钟建军教授团队在《Experimental Neurology》期刊上发表的“Significant changes in circular RNA in the mouse cerebral cortex around an injury site after traumatic brain injury”文章通过携带siRNA的体内转染试 …
阅读更多 »体内转染LncRNA(entranster)与大鼠2型糖尿病大鼠神经性疼痛行为研究
长链非编码RNA(Long non-coding RNA, lncRNA)是长度大于 200 个核苷酸的非编码 RNA。LncRNA通过与其他转录因子相互作用产生复杂的调控网络进而对基因的转录产生影响。小鼠lncRNAs的敲除可导致某些功能异常。研究还发现LncRNA参与了神经系统疾病的病理过程。现分享一篇应用体内转染LncRNA方法(Entranster- …
阅读更多 »Frontiers in Neuroscience | 海军医科大学王文忠教授团队报道:改善高血压氧化应激的新策略
王文忠教授团队在《Frontiers in Neuroscience》期刊上发表了“β-Arrestin1 Reduces Oxidative Stress via Nrf2 Activation in the Rostral Ventrolateral Medulla in Hypertension”论文,研究结果证实b-arrestin1 的过表 …
阅读更多 »英格恩生物和您一起探究靶向LunX抑制肺癌的生长及转移
肺癌是当今世界各国常见的恶性肿瘤,并已成为绝大多数国家癌症死亡的主要原因。最新统计表明每年有超过一万名的患者因肺癌死亡,其中以非小细胞肺癌(NSCLC)最常见,大部分NSCLC患者在就诊时已经出现远处转移病灶。在很长的一段时间里,对晚期或转移性非小细胞肺癌患者除了进行最佳支持治疗外,就只能进行“含铂类药物的化疗”的治疗方法,与最佳支持治疗相比,虽然一定程度上 …
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