英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
下面以Entranster-R4000试剂为例，说一下siRNA转染步骤（24孔板） 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞：提前一天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞汇合度（Confluence）在30％左右为宜，转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那 …
阅读更多 »体内转染（engreen）与异甘草素和大鼠早期脑损伤研究
脑内出血（Intracerebral hemorrhage，ICH）可引起有效的氧化应激反应和炎症过程，异甘草素（Isoliquiritigenin）是一种类黄酮物质，可以激活核因子E2相关因子2（Nrf2）介导的抗氧化系统，负调控核因子B（NF-κBκκ）和NOD受体家族。现分享一篇体内转染（Entranster-in vivo）与异甘草素和 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与三氯乙烯和肝癌发生研究
三氯乙烯（TCE）是一种挥发性有机化学试剂，已广泛应用于工业有机溶剂中，是大气、土壤、地下水和食品中的常见污染物。由于肝脏是主要的TCE靶器官之一，TCE引起的肝损伤在职业工作者中经常被报道，TCE暴露被怀疑与肝癌的风险增加有关。在动物实验中，TCE处理可诱导小鼠肝细胞癌（HCC），但其机制尚不清楚。现分享一篇RNA转染（Entranster）与三氯乙烯和肝 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与骨桥蛋白对肝脏毒性代谢调节作用研究
骨桥蛋白（OPN）是一种众所周知的促炎症分子，在对乙酰氨基酚（APAP）引起的肝毒性中已被观察到。然而，OPN诱导的精确细胞来源及其在APAP诱导的肝毒性中的作用还尚不清楚。现分享一篇体内转染（Entranster）与骨桥蛋白对肝脏毒性代谢调节作用研究的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染与mir-301a抑制和脑缺血/再灌注大鼠的神经保护作用研究
脑缺血病具有发病率高、致残率高、死亡率高等特点，其主要治疗原则是恢复缺血区的血液再灌注。但一旦发生脑缺血，血液再灌注短期恢复后神经损伤会进一步加重，称为脑缺血再灌注（I/R）损伤。总的来说，脑I/R损伤的病理生理机制非常复杂，在I/R损伤过程中涉及到各种元素，如氧化应激、凋亡和炎症反应。更重要的是，炎症反应和细胞凋亡被认为是诱发脑I/R损伤的主要 …
阅读更多 »电穿孔转化感受态E.coli TG1细胞的制备
一、材料和试剂 恒温旋转式摇床 三角烧瓶（容量为1或2L） 50ml灭菌离心管 低温高速离心机 SB培养基 细菌培养用胰化蛋白胨 20g 细菌培养用酵母提取物 5g NaCl 0.5g 去离子水 950ml 250mmol/L KCl溶液 10ml 以5N …
阅读更多 »慢病毒载体
慢病毒属于反转录病毒科，与该科其他病毒一样，病毒粒子携带ssRNA, 必须反转录并整合至宿主细胞基因组（原病毒）产生有效感染。慢病毒的显著特点是其基因组复杂、圆柱形或圆锥形的核衣壳携带病毒基因组。核衣壳被携带包膜糖蛋白的双层膜包裹，包膜糖蛋白负责与细胞表面受体进行相互作用及进入宿主细胞。反转录病毒是几乎所有脊椎动物的主要病原体。人类免疫缺陷病毒l 型（HIV …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与放射增强质粒DNA转染肿瘤研究
迄今为止，大多数基因治疗临床试验都使用了病毒载体，但仍存在多种担忧，包括致癌风险、急性免疫原性、广泛的组织亲嗜性、DNA包装能力有限，以及安全处理和大规模生产的挑战。对于将基因疗法转化为临床治疗来说，改进这些缺点的DNA传递的替代方法是至关重要的。现分享一篇体内转染（Entranster）与放射增强质粒DNA转染肿瘤研究的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染与miRNA-144-3p和脑出血诱导的继发性脑损伤研究
脑出血约占死亡和发病率的50%，有不同的亚型，包括由脑实质深处的小血管破裂引发的脑出血（ICH）。此外，在存活的患者中，75%的患者受到不同程度的运动、感觉、思维定势和其他不可替代的脑功能损伤。即使结合复杂的治疗方法，继发性脑损伤（SBI）也可能发生在ICH之后，令人失望的预后是不可避免的。几十年来，医学研究一直致力于发现一种有效和直接的治疗方 …
阅读更多 »siRNA转染和DNA转染有什么不同？
首先siRNA由于只有二十几个碱基对，相比DNA几千上万对碱基，小了许多。目前大多数转染试剂都针对比较大的质粒DNA，而非小的RNA分子。用于转染DNA的转染试剂和方法并不完全适用于转染siRNA。 其次，siRNA转染比DNA转染对转染试剂细胞毒性的要求严格。由于转染试剂对细胞的毒性往往是对众多基因直接地或间接地上调或下调的结果，这对于过量表达的DNA转染 …
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