英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
Coxsackie Virus属于小RNA 病毒科，肠道病毒（enteroviruses）属，是导致病毒性心肌炎的主要病毒之一，多发于儿童和青少年，可引起急性心力衰竭，部分可发展为扩张性心肌病，严重危害少年儿童健康，目前临床缺乏特异有效的药物。RNA干扰自1998 年《Science》杂志报道以来，已被广泛 …
阅读更多 »Entranster-in vivo体内转染和病毒体内转染的比较
EntransterTM-in vivo体内转染和病毒体内转染的比较 英格恩动物转染试剂和病毒感染比较 英格恩动物转染试剂 病毒感染 实验周期 最快3天就可以出结果 需要进行克隆、病毒包装等一系列实验，周期短则1个月，长则达数月。 灵活性 更换核酸简单，利于筛选。 更换核酸序列，需要重新构建和包装病毒，复杂而且费工费时。 效果 方法简单，实验环节少，尤其在转 …
阅读更多 »Frontiers in Neuroscience | 厦门大学医学院：如何才能有效缓解神经炎症疼痛？
《Frontiers in Neuroscience》期刊上新发表的神经相关文章“Long Non-coding RNA Uc.48+ Small Interfering RNA Alleviates Neuroinflammatory Hyperalgesia in Gp120-Treated Rats v …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与TRPM7和肾脏保护作用研究
瞬时受体电位M型7（TRPM7）是一种膜离子通道和激酶。TRPM7在肾脏丰富表达，缺血再灌注损伤（IR）可上调TRPM7的表达。我们以前的研究表明，环螺旋B肽（CHBP）改善肾IR相关的损伤，但其作用机制尚不明确。现分享一篇体内转染（Entranster）与TRPM7和肾脏保护作用研究的文献，以供参考。
阅读更多 »电转染实验时，DNA有什么要求？
使用Entranster-E电转染试剂进行电转染实验时，应使用高纯度、无菌和无污染的DNA进行电穿孔实验。质粒DNA要求无内毒素，OD值为1.8-2.0。不建议使用微型试剂盒制备DNA，因为它可能含有高水平的内毒素。 不要使用仅用乙醇沉淀法纯化的DNA …
阅读更多 »体内转染与膜联蛋白A7和大鼠继发性脑损伤研究
谷氨酸兴奋性中毒参与了脑出血（ICH）引起的继发性脑损伤（SBI）。突触体相关蛋白23（SNAP23）和SNAP25分别参与突触前谷氨酸的释放和突触后谷氨酸受体（NMDA受体）运输，这两者对于谷氨酸介导的兴奋性毒性都是必不可少的。SNAP23和SNAP25具有较高的同源性，SNAP23被证明可与膜联蛋白A7（ANXA7）相互作用。现分享一篇体内转染（Entr …
阅读更多 »shRNA转染实验步骤
下面以Entranster-R4000试剂为例，说一下shRNA转染步骤（24孔板） 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞：提前一天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞汇合度（Confluence）在30％左右为宜，转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那 …
阅读更多 »细胞电转染实验的几点建议
1. 电场强度要合适 合适的电场强度对于电转染实验非常重要，电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值，实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2. 细胞状态要好 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞（15代以内，传代后2 …
阅读更多 »DNA转染与Cep70与γ-微管蛋白和有丝分裂纺锤体组装研究
有丝分裂纺锤体的解除与基因组不稳定性有关，这是肿瘤发生和恶性转化的一个重要方面。为了保证染色体传递的准确性，有丝分裂纺锤体由精细的机制组装，并由动物细胞中的着丝粒组织配制。尤其是，中心体蛋白被认为协同作用以确保准确的纺锤体形成，但分子细节仍有待研究。现分享一篇DNA转染（Entranster）与Cep70与γ-微管蛋白相互作用在有丝分裂纺锤体组装中作用的研究 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与环状非编码RNA减少基因脱靶效应研究
环状RNA在许多生物系统中被发现。它们大多被认为是microRNA的分子“海绵”，具有许多未知的生物学活性。小干扰RNA作为许多非编码RNA之一，已成为基因表达调控和药物治疗的重要工具。虽然由siRNA介导的靶mRNA裂解具有高度的序列特异性，意外“脱靶”沉默内源基因在细胞中也观察到，这限制了siRNA的进一步应用。脱靶效应的siRNA也能诱导 …
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