可从以下几方面进行优化: 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与香烟烟雾提取物接触后平滑肌细胞的增殖研究
动脉粥样硬化是发病率和死亡率的主要原因。动脉粥样硬化的特点是血管平滑肌细胞(SMCs)过度增殖,是多种因素联合作用的结果。流行病学调查表明,吸烟与动脉粥样硬化密切相关,在血管平滑肌细胞(SMC)的过度增殖起着关键性作用。现分享一篇ECL发光液(enlight)与香烟烟雾提取物接触后平滑肌细胞的增殖研究的文献,以供参考。
阅读更多 »细胞转染siRNA后,目标基因的表达反而升高的原因是什么?
siRNA转染后目标基因不降反升的现象可能由多种原因引起,常见的因素包括: siRNA设计不合理: siRNA的靶点选择不佳,未能有效靶向目标基因的mRNA,导致抑制效果差或反而激活了基因表达。可以尝试设计不同的siRNA靶点或使用更为优化的siRNA工具进行设计。 转染效率问题: 低转染效率可能导致siRNA无法进入足够多的细胞,从而未能有效抑制目标基因。 …
阅读更多 »体内转染(entranster)与PLCE1和心肌缺血再灌注损伤研究
心肌缺血再灌注(I/R)损伤是冠状动脉疾病发病率和死亡率的主要因素。如何在避免或减少I/R损伤的同时保证缺血心肌组织血供的恢复,一直是临床实践中的一个关键问题。最近的研究发现,炎症细胞因子水平与心肌功能损害和缺血后细胞坏死有关。炎症反应在心肌I/R损伤中起着重要作用,研究表明,当抗炎药抑制炎症时,I/R诱导的损伤有所改善。磷脂酶C ε-1(PL …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与脂肪细胞、尼古丁和内皮细胞损伤研究
吸烟是导致动脉粥样硬化的重要危险因素之一,可引起血管内皮损伤。同时,脂肪细胞是血管周围脂肪组织(PVAT)的主要细胞类型。PVAT是最大的内分泌和旁分泌器官,解剖学中直接与外模连接,这可能对血管内皮细胞损伤中发挥关键作用。现分享一篇ECL发光液(enlight)与脂肪细胞、尼古丁和内皮细胞损伤研究的文献,以供参考。
阅读更多 »RNA转染影响因素
转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染,因RNA与DNA大小不同,转染条件不同,所需的试剂也应不同,所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster-R4000. RNA转染时RNA的用量 RNA转染的用量必须参考RNA转染试剂说明,因为RNA …
阅读更多 »Theranostics | 复旦大学儿童医院报道:揭开I型糖尿病的发病机制
该团队在《Theranostics》期刊上发表了题为“Circular RNA circPPM1F modulates M1 macrophage activation and pancreatic islet inflammation in type 1 diabetes mellitus”的论文。实验将circular RNA 通过体内转染 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与富亮氨酸重复激酶2加重脑出血诱导的继发性脑损伤研究
富亮氨酸重复激酶2(LRRK2)是家族性和突发性帕金森病(PD)的遗传原因,它与神经元死亡、囊泡运输、线粒体功能障碍和炎症有关。然而,其在脑出血(ICH)引起的继发性脑损伤(SBI)中的作用尚不清楚。现分享一篇体内转染(Entranster)与富亮氨酸重复激酶2加重脑出血诱导的继发性脑损伤研究的文献,以供参考。
阅读更多 »体内转染与关附甲素对神经性疼痛的抑制作用研究
神经性疼痛是指由影响躯体感觉系统的病变或疾病引起的疼痛,属于慢性疼痛。神经性疼痛的病理生理特征是自发性疼痛、热痛觉过敏或疼痛过敏。目前对神经性疼痛的药理学方法仅能使大约50%的患者疼痛减轻30-50%。再加上这些治疗的疗效有限,不可忍受的副作用,依从性较低,神经性疼痛仍然难以治疗,因此,迫切需要研究和开发新的神经性疼痛药物。现分享一篇体内转染(e …
阅读更多 »RNA转染与IL-17下调小鼠胶原性关节炎嗅间充质干细胞的免疫抑制能力研究
嗅间充质干细胞(OE-MSCs)是嗅觉固有层中一种新的常驻干细胞类型。OE-MSCs通过调节T细胞的反应,包括调节性T细胞(Treg)的上调和Th1/Th17细胞的下调而发挥其免疫抑制能力。作为炎性细胞因子,IL-17在胶原诱导性关节炎(CIA)的发展过程中起着关键的作用。然而,目前尚不清楚IL-17水平的升高是否会影响OE-MSCs在炎症状态 …
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