1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这 …
阅读更多 »体内转染(entranster)与lncRNAuc.48+对2型糖尿病大鼠肝糖原的影响研究
糖尿病(diabetes mellitus,DM)是一组代谢性临床综合征,随着社会的发展和人们生活水平的提高,糖尿病的患病率逐年升高。在发达国家,糖尿病患病率已达3% ~7%,成为仅次于癌症、艾滋病、心脑血管病之后第4位需要优先考虑的疾病,已成为世界第5位死亡主因。我国糖尿病人群的构成,以2型糖尿病为主,占糖尿病人群的90%以上,严重影响着人民健康和社会发展 …
阅读更多 »体内转染与CREB1基因沉默和血管性痴呆小鼠认知功能障碍研究
血管性痴呆(VD)是老年痴呆的第二大病因,仅次于阿尔茨海默病(AD),在西方国家占所有痴呆病例的17.6%,研究表明在世界东部地区,包括中国和日本人口中,认知功能障碍的人数要更多。认知功能障碍广泛被认为是痴呆患者的经典特征。VD,以各种脑血管疾病为特征的损伤综合征主要与缺血性脑血管疾病相关。目前,VD的确切发病机制仍不清楚。因此,有必要更详细地阐明该病症背后 …
阅读更多 »ECL发光液与Polo样激酶1对端粒酶活性影响的研究
端粒的维持受端粒酶活性的调控,包括端粒酶全酶及其相关蛋白。端粒酶的活性在细胞中被精确控制,其失调是癌症的特征之一。端粒酶催化亚单位端粒酶逆转录酶(hTERT)在端粒酶活性中起重要作用。 现分享一篇ECL发光液(enlight)与Polo样激酶1(PLK1)通过影响端粒酶逆转录酶的稳定性上调端粒酶活性研究的文献,以供参考。 文献地址:http:// …
阅读更多 »DNA转染实验中的关键点
1)优化条件:质粒不同,所转染的细胞不同及定量的准确性等因素会导致在一些情况下所做的转染不在该优化条件内。这种情况下需要对质粒转染试剂的配比进行优化。另外,可选用更合适的转染试剂,如Entranster试剂。 2)抑制剂:不要在用于制备DNA-转染试剂复合物的培养基中使用抗生素,EDTA,柠檬酸盐,磷酸盐,RPMI,硫酸软骨素,透明质酸,硫酸葡聚糖或其他硫酸 …
阅读更多 »ECL发光液与siah2-nrf1轴调节肿瘤微环境重构和肿瘤发展研究
肿瘤细胞位于细胞组成和代谢特征高度异质的微环境中。肿瘤代谢异质性也被认为在肿瘤化疗抵抗、远处转移和肿瘤复发中起作用,会导致不良的临床结果。然而,作为细胞内代谢最重要的细胞器,对于线粒体如何对肿瘤微环境信号作出反应以及它们如何调节肿瘤代谢异质性,人们知之甚少。了解线粒体调控在肿瘤微环境中的作用对于破译肿瘤进展的分子基础至关重要。现分享一篇ECL发光 …
阅读更多 »体内转染siRNA (Entranster)的方法研究肺微血管内皮功能
小GTP酶Rab5可以控制囊泡接到的质膜蛋白运输,其在血管内皮(VE)-钙黏蛋白的内化作用功能仍然未知,血管内皮(VE)-钙黏蛋白是一种内皮特异性跨膜元件,可以调节内皮细胞的极性和屏障功能。现分享一篇应用体内转染siRNA (Entranster)的方法研究肺微血管内皮功能的文献,以供参考。
阅读更多 »体内转染(Entranster)与高迁移率族B1在大鼠冠状动脉微栓塞致心肌损伤中的作用研究
冠状动脉微栓塞(CME)是急性心肌梗死(AMI)急诊经皮冠状动脉介入治疗的常见并发症,发生率为15%~20%。它可以直接导致“无血流”或“血流缓慢”。它是AMI患者长期预后不良和主要心脏不良事件的独立预测因子。研究表明,CME引起的局部心肌炎症是导致进行性心功能不全的主要原因。现分享一篇体内转染(Entranster)与高迁移率族B1在大鼠冠状动脉微栓塞致心 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与去分化软骨瘤进展研究
去分化软骨肉瘤(DDCs)是一种特殊类型的肉瘤,约占传统软骨肉瘤(CCS)的10%~15%。DDCs是一种由两种不同成分组成的肿瘤,一种与低级别CCS相邻的恶性肿瘤,两部分之间有清晰的边界。由于早期转移而对化疗缺乏反应,DDCS预后差,5年生存率仅为10%~24%。因此,迫切需要探索CCS发展成为DDCS并找到新的治疗方法。现分享一篇体内转染(Entrans …
阅读更多 »细胞siRNA转染有哪些方法?
siRNA导入细胞有以下几种方法:化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素:细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术(Entranster)是最为常用的方法,而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好。
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