使用Entranster-E电转液与指数衰减脉冲电转仪时BHK-21细胞的电转染条件是:对于0.2 cm电转杯,细胞密度为10×10^6 cells/ml,DNA用量为2μg,电转液体积为100μl,电压为150V, 电容为950μF。对于0.4 cm电转杯,细胞密度为10×10^6 cells/ml,DNA用量为5μg,电转液体积为25 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与富亮氨酸重复激酶2加重脑出血诱导的继发性脑损伤研究
富亮氨酸重复激酶2(LRRK2)是家族性和突发性帕金森病(PD)的遗传原因,它与神经元死亡、囊泡运输、线粒体功能障碍和炎症有关。然而,其在脑出血(ICH)引起的继发性脑损伤(SBI)中的作用尚不清楚。现分享一篇体内转染(Entranster)与富亮氨酸重复激酶2加重脑出血诱导的继发性脑损伤研究的文献,以供参考。
阅读更多 »ECL发光液与hexarelin来减轻动脉粥样硬化研究
动脉粥样硬化(AS)是一种进行性的血管疾病,其特征是大动脉内膜和管腔内脂质积聚、炎症、动脉粥样硬化性斑块形成和纤维化,是冠心病的主要原因,并导致心肌梗死。有效的抗AS药物目前在临床上还很少见。因此,迫切需要开发新的抗AS药物,以减少AS的并发症。现分享一篇ECL发光液(enlight)与hexarelin来减轻动脉粥样硬化研究的文献,以供参考。 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)和HIF-1α与肾再生研究
哺乳动物的肾再生已被报道贯穿其一生。损伤后,存活的成熟肾细胞或肾干细胞迁移到受损区域,增殖并重新分化为新的体细胞。然而,实现临床意义的再生已被证明是极具挑战性的,因为肾再生修复是不完整的,不能完全恢复肾脏自己功能。现分享一篇体内转染(Entranster)和HIF-1α与肾再生研究的文献,以供参考。
阅读更多 »DNA转染效率低的可能的原因有哪些?
1.准备不足 做细胞转染的时候,在开展正式实验前要多做预试验,优化转染条件。优化转染条件包括:转染试剂的用量、DNA密度、细胞密度、试剂和DNA混合孵育时间等等。 2.细胞污染 细胞污染也是造成细胞死亡,转染效率低下的一大原因。首先,转染细胞用的质粒必须保证无菌。而现在市场上的一般的质粒提取试剂盒都做不到绝对无菌。分享一个小秘诀:将提完质粒后或者提的最后一步 …
阅读更多 »体内转染与linc-smad7促进成肌细胞分化和肌肉再生研究
骨骼肌来源于胚胎发育过程中的体细胞,这是一个高度协调的过程,涉及到成肌细胞增殖、分化的各个发育阶段,最终融合成多核肌管和肌纤维。这些发育阶段主要是由一系列肌源性调节因子(mrfs)确定,包括肌源性D、肌源性因子5(myf5)、肌生成素和mrf4,以及肌细胞增强因子2(mef2)家族。之前的研究表明,LncRNAs在表观遗传动力学和基因表达方面具有 …
阅读更多 »RNA转染与小干扰RNA在HeLa细胞中的潜在抗病毒作用研究
柯萨奇病毒B3(CVB3)是病毒性心肌病最重要的致病因子,但目前尚无特异性抗病毒药物。小干扰RNA(siRNA)通过转录后基因沉默,已被用作抗病毒治疗策略。现分享一篇RNA转染(Entranster)与小干扰RNA在HeLa细胞中的潜在抗病毒作用研究的文献,以供参考。
阅读更多 »体内转染(Entranster)与丹酚酸B和脓毒症相关急性肺损伤研究
脓毒症是一种危及生命的疾病,其特征是器官功能不全。脓毒症被广泛认为是由于感染引起的代偿性抗炎反应和全身炎症反应之间的平衡不稳定。在严重的情况下,炎症、脓毒症可导致急性肺损伤(ALI),更严重地可能会发生急性呼吸窘迫综合征(ARDS)。现分享一篇体内转染(Entranster)与丹酚酸B和脓毒症相关急性肺损伤研究的文献,以供参考。
阅读更多 »Crispr/Cas9腺病毒构建流程
Crispr/Cas9 简介 CRISPR (clustered, regularly interspaced, short palindromic repeats)是一种来自细菌降解入侵的病毒 DNA 或其他外源 DNA 的免疫机制。目前,来自Streptococcus pyogenes 的CRISPR-Cas9系统应用最为广泛。Cas9 蛋白(含有两个核 …
阅读更多 »RNA转染效率低的原因是什么?
RNA转染效率低,可能的原因: · 转染试剂不适合。建议选择RNA专用转染试剂,如Entranster试剂。 · 转染试剂和RNA的量不够,或者比例不对。优化实验条件,调整试剂和RNA用量,优化二者比例。 · 检测时间有问题。适当调整检测时间。 · RNA质量问题。选择纯度高的RNA。 · 细胞状态不佳。调整细胞状态,调整细胞融合度。
阅读更多 »