英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
RNA转染效率低，可能的原因： · 转染试剂不适合。建议选择RNA专用转染试剂，如Entranster试剂。 · 转染试剂和RNA的量不够，或者比例不对。优化实验条件，调整试剂和RNA用量，优化二者比例。 · 检测时间有问题。适当调整检测时间。 · RNA质量问题。选择纯度高的RNA。 · 细胞状态不佳。调整细胞状态，调整细胞融合度。
阅读更多 »体内转染（entranster）与MST1介导的大鼠脑出血继发性脑损伤研究
脑出血（ICH）是一个严重的公共卫生问题，可导致成人的高致残率和死亡率。细胞凋亡是ICH后继发性脑损伤（SBI）的标志。哺乳动物不育系20样激酶-1（MST1）是一种细胞凋亡促进激酶，是Hippo信号通路的一部分，参与细胞死亡、氧化应激和炎症反应。然而，MST1在ICH诱导的SBI中的作用和潜在机制尚未完全清楚。现分享一篇体内转染（entranster）与M …
阅读更多 »如何优化RNA转染条件？
可从以下几方面进行优化： 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如 …
阅读更多 »Inflammation | 西安交通大学附属医院：促进心肌损伤的杀手
《Inflammation》期刊报道了MiR-23a通过直接靶向CX43和调节有丝分裂吞噬作用参与心肌缺血/再灌注损伤。题为“MiR-23a Is Involved in Myocardial Ischemia/Reperfusion Injury by Directly Targeting CX43 and Regulating Mi …
阅读更多 »CCK8实验中，设定参比波长的目的是什么？必须设定吗？
不一定要设定。CCK8试剂在参比波长没有吸光度。设定参比波长的目的是为了取出由于样品混浊所带来的吸收。 如需了解更多关于cck8产品的信息，请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »RNA转染（entranster）与miRNA-183过表达促进黑质神经元凋亡研究
帕金森病是一种常见的神经系统疾病，是典型的纹状体功能障碍模型。它是仅次于阿尔茨海默病的第二常见神经退行性疾病。帕金森病的特征之一是黑质多巴胺能神经元的逐渐丧失。帕金森病患者通常有震颤、僵硬和运动迟缓的症状。遗传因素和环境因素已被纳入帕金森病的病因。对下丘脑核进行高频脑深部刺激是一种流行的外科治疗方法，但不适用于早期的PD，发展中国家的患者也无法获得。现分享一 …
阅读更多 »International Immunopharmacology | 中国解放军总医院报道: 治疗肺病的新机制
该团队在《International Immunopharmacology》期刊上发表了题为“LPS-induced vein endothelial cell injury and acute lung injury have Btk and Orai 1 to regulate SOC-mediated calcium influx”的论文 …
阅读更多 »pcDNA转染（Entranster）与胞外小泡和食管癌进展研究
食管癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一。其5年生存率低于30%。食管癌分为鳞状细胞癌和腺癌两大类。食管癌多为鳞状细胞癌，占食管癌的90%。近年来，尽管食管癌的治疗进展越来越快，但食管鳞癌患者的总体预后仍然很差，情况仍不容乐观。早期发现和干预对提高食管癌预后具有重要意义。现分享一篇pcDNA转染（Entranster）与胞外小泡和食管癌进展研究的文献，以供参考。
阅读更多 »动物体内转染，局部注射后应如何取样？
使用动物体内转染试剂Entranster-in vivo进行体内转染实验时，由于局部注射容易造成药液分布不均，在注射的近端，药液浓度高，效果明细；远端，药液浓度低，效果低一些。所以，一方面，需要尽量将药液均匀覆盖全部靶组织，另一方面，后续实验取样时，在保证实验的 …
阅读更多 »siRNA答疑专题总结（上）
Q1：如果慢病毒载体中没有抗性标记，只有GFP，请问还能筛选稳转的细胞传代培养吗？ A1：采用流式分选是流式细胞仪的一个功能，有流式细胞仪就可以了。一般实验室对流式都有专门的人员操作，不需要自己动手。由于没有抗性，需要注意分选过程的无菌操作。 Q2：RNA干扰如果用慢病毒做稳转的细胞株，什么样的目的RNA都可以用来干扰来做稳转的细胞株吗，目的RNA所编码蛋白 …
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