英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
原发性干燥综合征（PSS）是一种全身性自身免疫性疾病。以外分泌腺的淋巴细胞浸润为特征的，主要是唾液腺和泪腺，导致分泌功能的丧失。虽然PSS的病因仍不清楚，但许多研究已经证实树突状细胞（DCS）、NK细胞、B细胞和T细胞参与了SS的发病机制。最近的研究发现，Th1和Th17免疫应答在PSS的发展中起着关键性的作用。髓系来源的抑制性细胞（MDSC）是具有免疫抑制 …
阅读更多 »电转染实验时，DNA有什么要求？
使用Entranster-E电转染试剂进行电转染实验时，应使用高纯度、无菌和无污染的DNA进行电穿孔实验。质粒DNA要求无内毒素，OD值为1.8-2.0。不建议使用微型试剂盒制备DNA，因为它可能含有高水平的内毒素。 不要使用仅用乙醇沉淀法纯化的DNA …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与羟基氯喹和自噬体及宫颈癌SiHa细胞研究
羟基氯喹（Hydroxychloroquine，HCQ），氯喹的羟基化类似物，是一种抗疟原虫溶酶体抑制剂，它抑制溶酶体酸化引起的自噬，并随后阻断自噬体与溶酶体的融合，从而导致自噬体的积累，从而加速肿瘤细胞的死亡。现分享一篇ECL发光液（enlight）与羟基氯喹和自噬体及宫颈癌SiHa细胞研究的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染（Entranster）与mir-200c在乳腺癌细胞上皮间质转化中作用中研究
MirRNAs不仅参与肿瘤的形成，也与肿瘤的分化和侵袭过程有关。然而，目前检测miRNA表达的方法有很大的缺点，如侵入性和不可再生性。上皮间质转化（EMT）在肿瘤转移和耐药方面具有重要作用。现分享一篇体内转染（Entranster）与mir-200c在乳腺癌细胞上皮间质转化中作用中研究的文献，以供参考。
阅读更多 »如何优化RNA转染条件？
可从以下几方面进行优化： 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如 …
阅读更多 »体内转染（entranster）与半滑舌鳎脾脏巨核细胞病毒诱导蛋白和病毒感染所必需的细胞过程
虹彩病毒科是一个双链、二十面体结构的DNA病毒科，能感染昆虫、两栖动物、鱼类和爬行动物等许多无脊椎动物和脊椎动物。目前，虹彩病毒科分为五个属，其中三个属是从水产养殖物种中分离出来的，即蛙病毒、淋巴孢子病毒和巨核细胞病毒。据了解，30多种养殖鱼类（特别是桂鱼、大黄鱼、石鲷、红海鲷、鲈鱼和胸膜吸虫）都会感染巨链病毒。巨细胞病毒感染可导致30%至100%的死亡率， …
阅读更多 »体内转染文章背后的故事
节省时间 河北医科大学附属二院的老师在临床实践中发现在多发性硬化症患者样本中有一个miRNA上调的现象。针对该miRNA的mimics很容易得到，怎么导入动物呢？他们想到了用英格恩动物体内转染试剂，将mimics与体内转染试剂混合后，尾静脉注射小鼠，几天后就可以观察结果，进行PCR，病理等研究，结果发现该miRNA的上调影响到一些免疫细胞的改变，从而导致多发 …
阅读更多 »电转染实验时，siRNA有什么要求？
使用高纯度、无菌的siRNA。确定电转染的最佳siRNA浓度。建议在250-750nM最终浓度范围内的进行siRNA不同浓度的梯度实验。建议设置一个非靶向或无意义的siRNA对照序列，以验证实验siRNA的特异性。同时也验证，针对单个基因用多个siRNA序列实验产生的表型是否是由于脱靶 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与P2Y12 shRNA减轻2型糖尿病大鼠神经病理性疼痛研究
糖尿病性神经病理性疼痛是2型糖尿病（DM）的常见并发症。背根神经节（DRG）中星形胶质细胞（SGCs）的激活通过释放促炎细胞因子在神经病理性疼痛中发挥重要作用。P2Y12受体在DRG的SGCS中表达。现分享一篇体内转染（Entranster）与P2Y12 shRNA减轻2型糖尿病大鼠神经病理性疼痛研究的文献，以供参考。
阅读更多 »转基因表达盒
病毒载体最常用的有遍在启动子(ubiquitous promoters) 、细胞类型特异性启动子和多聚腺苷酸化信号。 遍在启动子• 人类CMV 立即早期启动子• 小鼠干细胞病毒(MSCV) 启动子• CMV 增强子与鸡β-actin 启动子融合的CAG 杂合启动子（也称为CGA 、CBA 或CB ；在不同版本中的长度不同）• 人类EF-α• 人类磷酸甘油酸激 …
阅读更多 »