1.转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒DNA转染混用—即使试剂本身兼容DNA和RNA转染,因RNA与DNA大小不同,转染条件不同,所需的试剂也应不同,所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster试剂. 2.RNA转染时RNA的用量 RNA转染的用量必须参考RNA转染试剂说明,因为RNA和 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与冠状动脉微栓塞相关的心功能不全研究
冠状动脉微栓塞(CME)是一种常见的临床事件,可自发或由程序相关的动脉粥样硬化斑块破裂急性冠状动脉综合征患者,特别是在经皮冠状动脉介入治疗(PCI)导致。大隐静脉移植物经皮介入治疗的发生率高达45%。由CME引起的短暂“无血流”或“慢血流”是急性心肌梗死患者长期预后不良的独立预测因素。此外,CME还可导致渐进性心肌功能异常,包括显性心肌梗死、收缩功能障碍、心 …
阅读更多 »细胞DNA转染实验步骤
下面以Entranster-H4000,DNA转染试剂为例,简要说明DNA细胞转染实验步骤 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞密度在60%左右为宜。 2.转染过程 ⑴将0.8μg的DNA用25μl无血清稀释液稀释,充分混匀,制成DNA稀释液。 注意:无血清稀释液建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或1640。 ⑵将2μl的 …
阅读更多 »腺病毒适用于哪些细胞?
重组腺病毒(AdV)是一种复制缺陷的腺病毒载体系统,在基因治疗、基础生命科学研究等领域被广泛应用。目前常用的腺病毒载体基于人腺病毒5型(Ad5),其基因组是36 kb长的线性双链DNA。腺病毒可通过自身的纤维(fiber)和细胞表面的受体结合被内吞进入细胞,然后从内吞体(endosome)转移到细胞质和细胞核内,借助细胞的转录和翻译机器启动病毒的复制组装。一 …
阅读更多 »ECL发光液与尿液中抗凝剂导致的蛋白变化研究
生物标志物最基本的性质是变化。但是血浆中的变化是难以维持的,因为它是由机体的稳态机制严格控制的。尿液没有稳态机制。此外,尿液部分是血液过滤,系统信息可以反映在尿液中。我们假设血液的变化可以更灵敏地反映在尿液中。现分享一篇ECL发光液(enlight)与尿液中抗凝剂导致的蛋白变化研究的文献,以供参考。 文献地 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与PPARα调节肿瘤细胞的增殖和衰老研究
肉碱棕榈酰转移酶(Carnitine palmitoyltransferase 1c,cpt1c),位于线粒体膜外,在脂肪酸的转运和氧化中起着关键的作用。它也参与细胞增殖,是癌细胞衰老的潜在驱动力。然而,其上游调控机制是未知的。过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARαα)是一个配体激活转录因子,可调节脂质代谢和肿瘤进展。现分享一篇ECL发光液(enlight) …
阅读更多 »The British Pharmacological Society | 同济大学医学院郭传勇教授团队报道:非酒精脂肪肝新疗法
郭传勇教授团队在《The British Pharmacological Society》期刊发表了题为“Astaxanthin attenuates hepatic damage and mitochondrial dysfunction in non-alcoholic fatty liver disease by upregulating …
阅读更多 »体内转染与microRNA-155和对乙酰氨基酚诱导的肝脏炎症研究
人体肝脏承担着多种任务,包括解毒,代谢废物的排出、营养摄取和储存、总能量代谢和重要血清蛋白的分泌。其特殊功能使肝脏成为一个极易受到毒性损伤的器官,可能引发肝脏炎症和随后的纤维化和终末期组织损伤。在所有肝毒性化学损伤中,对乙酰氨基酚(APAP)过量被认为是西方国家急性肝衰竭的最常见原因。虽有报道称,美国50%以上的急性肝衰竭病例都与APAP中毒有关 …
阅读更多 »病毒感染细胞实验整体流程
目的基因不能直接整合到大多数真核细胞,常用的手段是将目的基因包装成病毒来感染细胞,从而得到表达满足实验需求。病毒有很多种,常见的有慢病毒和腺病毒。关于慢病毒和腺病毒的原理以及特别前面的文章中都有介绍过,可以搜索关键字查看。今天主要介绍病毒感染细胞的实验流程。 1.构建目的基因到载体 构建手段 一般是根据原始质粒信息确定克隆方案,有以下两种手段。 1)如果原始 …
阅读更多 »相较于MTT法,CCK8试剂盒的优点有哪些?
英格恩生物的CCK8试剂盒具有以下优点: 1.使用方便,省去了洗涤细胞,不需要放射性同位素和有机溶剂; 2.CCK-8法能快速检测; 3.CCK-8法的检测灵敏度很高,甚至可以测定较低细胞密度; 4.CCK-8法的重复性优于MTT 法; 5.CCK-8法对细胞毒性小; 6.CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液,毋需预制,即开即用。 7. 性价比高,比同行的 …
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