英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
玉米黄矮病毒RMV2（MYDV-RMV2）导致中国安徽省田间玉米植株的矮化和泛黄症状。现分享一篇ECL发光液（Enlight）与玉米黄矮病毒RMV2编码的RNA沉默抑制物鉴定研究的文献，以供参考。
阅读更多 »ECL发光液与蛋白激酶Nemo样激酶基因重组腺病毒载体构建研究
Ｎｅｍｏ样激酶（ｎｅｍｏ-ｌｉｋｅｋｉｎａｓｅ，ＮＬＫ）属于丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶。在果蝇、线虫、爪蟾等多种生物中都存在ＮＬＫ的同源蛋白，其结构存在高度的相似性，显示ＮＬＫ在进化过程中十分保守。研究显示，ＮＬＫ能够结合并磷酸化一系列转录因子，参与多个信号通路的调节，其中包括与发育过程密切相关的信号途径Ｗｎ …
阅读更多 »体内转染与NIX/BNIP3L通路在大鼠创伤性脑损伤中潜在作用研究
NIX/BNIP3L被称为促凋亡蛋白，也与有丝分裂有关。以往的研究表明，NIX可能参与脑出血后的神经元凋亡，但在缺血性脑损伤的二尖瓣病变中也起到保护作用。NIX在治疗创伤性脑损伤中的作用尚不清楚。现分享一篇体内转染（engreen）与NIX/BNIP3L通路在大鼠创伤性脑损伤中的潜在作用研究的文献，以供参考。 文献地址：https://journ …
阅读更多 »慢病毒、腺病毒、AAV 的检测周期分别是多长？
慢病毒 腺病毒 腺相关病毒 外源基因表达时间 2-4天开始表达长时间稳定表达 1-2天开始表达 持续7-14天 7-14开始表达 细胞分裂不旺盛部位可长时间表达 AAV一般注射动物后，会在1周左右开始表达，体内实验一般建议感染后3-4周看第一批结果。持续时间可以长达两年以上。在体内，细胞的生存周期会很长，特别是一些神经元细胞。所以只要细胞不死，AAV基本 …
阅读更多 »体内转染与晚期氧化蛋白产物诱导肠上皮细胞G1期停滞研究
克罗恩病（CD）是一种胃肠道复发性炎症性疾病。在CD的整个发病过程中，肠上皮细胞（IEC）仍然是各种促炎因子的主要靶点。据报道，IEC功能障碍导致肠道通透性增加，共生细菌过度转移到固有层，从而导致慢性粘膜炎症。肠上皮细胞周期阻滞和细胞死亡是肠粘膜炎症的标志，也是CD发病机制中的起始和加重因素。然而，对上皮细胞周期停滞的调节仍知之甚少。现分享一篇 …
阅读更多 »western-blot化学发光（ECL）出现高背景的原因是什么？
做Western Blot发光实验经常有“背景太高”问题的出现，要弄清楚“背景太高”的原因，先要知道“背景”是什么，“背景”也是发光，影响发光的因素就会影响背景。 影响发光的因素主要有：1.含HRP的抗体；2.发光试剂；3.和发光试剂反应的杂质，如含杂质的膜。这里面，在很短时间内曝光造成的背景多是由于含HRP的抗体的因素造成的，抗体浓度过高，洗涤不充分，封闭 …
阅读更多 »细胞电转染实验效率不理想的原因
1. 不合适的电场强度 合适的电场强度对于电转染实验非常重要，电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值，实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2. 细胞选择错误 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与ANO1通道和卵巢癌研究
最常见的卵巢癌是上皮性癌，其中致癌的病因仍然是?以捉摸的。ANO1/TMEM16A是Ca2+激活的Cl-通道（CACS）的成员，已证实其可以促进上皮性癌的发生，然而其是否在卵巢癌的发病机制中发挥作用尚不清楚。现分享一篇体内转染（Entranster）与ANO1通道和卵巢癌研究的文献，以供参考。
阅读更多 »腺病毒实验常见问题
1、腺病毒载体对目的基因的长度是否有要求？ 有要求。对E1和E3双缺失的腺病毒载体，比如AdMax的Kit C、Kit D等，其总包装的外源片断要求小于8 kb。而对于只有E1缺失或E3缺失的载体，比如Kit A、Kit B等，外源片断要求小于5 kb。注意，外源片断指包括启动子、外源基因和poly A等在内的整个插入片断。 2、如何提高腺病毒的活性？ 提高 …
阅读更多 »ECL发光液与LncRNA GHET1和膀胱癌对吉西他滨的化疗耐药性研究
膀胱癌（BC）是一种由膀胱中某些细胞不受控制的恶性增殖引起的疾病。在中国泌尿生殖系统肿瘤发病率排名第一，在西方仅次于前列腺癌。随着根治性BC切除综合治疗的不断进展，临床疗效有了很大提高，但晚期BC术后易发生复发转移，其5年生存率仍徘徊在45%左右。化疗能有效抑制前列腺癌的复发和转移，但耐药制约了其临床应用，严重影响了临床疗效。众所周知，BC的化 …
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