外伤性脊髓损伤(SCI)是造成死亡和终身残疾的主要原因。然而,对脊髓损伤的病理过程还没有完全了解。F-BOX/WD重复序列包含蛋白5(FBXW5),是scf型E3泛素连接酶复合物的一个亚单位,在调节各种病理方面具有重要作用。然而,对于fbxw5对SCI进展的影响知之甚少。 现分享一篇体内转染(entranster)与fbxw5减少可减轻脊髓损伤 …
阅读更多 »SCI:调节心肌梗死的关键基因
心肌梗死是通过心肌细胞死亡诱导心脏衰竭一个重要原因。然而,唾液酸在心肌细胞凋亡中的作用机制尚不清楚。最近,大连医科大学的研究人员在关于心肌梗死的研究中发现,唾液酸转移酶siat7a是心肌梗死的重要影响因素。这项研究结果发表在最近的《Basic Research in Cardiology》杂志,可以帮助揭示心肌梗死治疗的潜在靶标。 心肌梗死(myocardi …
阅读更多 »siRNA转染过程中常见问题及解答
1.RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率和总的细胞数量就很重要,一般细胞数量较少时转 …
阅读更多 »慢病毒浓缩纯化的方法有哪些?
慢病毒纯化工艺,依据其纯化原理主要分为超速离心、密度梯度离心、PEG离心、超滤、切向流、离子交换层析等方法。当前主要的慢病毒纯化均是由上述中的一种或几种方法组合在一起完成。 对于大部分的细胞感染以及普通的动物实验来说,推荐使用超速离心方法对慢病毒进行浓缩。超滤过程中留下的细胞碎片会导致细胞毒性,直接影响病毒的应用。 病毒上清/粗纯病毒 科研级慢病毒 科研 …
阅读更多 »Cancer Gene Therapy | 郑州大学附属医院:卵巢癌患者或将迎来新的希望
研究团队通过RNA体内转染实验(EntransterTM-in vivo, Engreen)发现沉默MAFG-AS1的表达可以减缓EMT的进程,转移,并且通过抑制NFKB1介导的细胞凋亡可减少卵巢癌细胞IGF1表达。这项成果发表在了《Cancer Gene Therapy》期刊上(“LncRNA MAFG-AS1 promotes the malignant …
阅读更多 »RNA转染与非连接蛋白Cx32在宫颈癌细胞中作用的研究
缝隙连接蛋白(Cx)构成脊椎动物的缝隙连接(GJ),可调节重要的细胞过程,包括电耦合,增殖,分化和凋亡。与最初在上世纪60年代提出的“接触增长抑制”概念一致,GJ和CX被公认为肿瘤抑制;恶性肿瘤的特点是GJ的缺失。在恶性肿瘤细胞中,转染Cx以GJ依赖的方式提高放疗/化疗诱导的细胞凋亡(有毒的“旁观者效应”)。Cx在宫颈癌中的作用尚不清楚。现分享一篇RNA转染 …
阅读更多 »siRNA转染(entranster)与成纤维细胞瘤细胞(l929-a)研究
L929成纤维细胞瘤细胞(l929-a)和L929纤维肉瘤细胞(l929-n)是不同的细胞系,常用于肿瘤坏死的细胞毒性因子α(TNFα)的研究,TNFa已被报道可诱导两种细胞系的坏死。然而,当比较TNFα诱导的在这两个细胞系的细胞死亡时,l929-n表现出典型的RIP3依赖性细胞坏死,在l929-a中却不是。现分享一篇运用siRNA转染(entranster …
阅读更多 »ECL发光液与尿液中抗凝剂导致的蛋白变化研究
生物标志物最基本的性质是变化。但是血浆中的变化是难以维持的,因为它是由机体的稳态机制严格控制的。尿液没有稳态机制。此外,尿液部分是血液过滤,系统信息可以反映在尿液中。我们假设血液的变化可以更灵敏地反映在尿液中。现分享一篇ECL发光液(enlight)与尿液中抗凝剂导致的蛋白变化研究的文献,以供参考。 文献地 …
阅读更多 »siRNA细胞转染应注意的事项
为了达到高的转染效率,在转染实验过程中,需要注意以下几点: 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »ECL发光液(Enlight)与小鼠DSS诱导的结肠炎研究
炎症性肠病(IBD)与遗传背景、免疫系统和生活方式,包括饮食和其他环境因素有关。它包括溃疡性结肠炎(UC)和Crohn病(CD),以肠慢性炎症为特征。在过去的半个世纪里,IBD的全球发病率稳步上升。有几种药物用于治疗IBD,包括氨基水杨酸盐、皮质类固醇、抗生素和免疫调节剂。然而,这些药物不仅对IBD患者具有有益的作用,而还具有显著的副作用,因此 …
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