可能原因: 1. RNA与转染试剂比例不佳。可进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳。 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。 3. RNA效率不高。选择最优RNA,并采用已知高效的RNA做对照。 4. RNA酶污染。建议无RNA酶和内毒素的吸头、离心管和溶液等材料和实验器具。 5. 转染后培养时间不够。在mRNA水平可以到48 小时以后验证结果,在蛋白水 …
阅读更多 »CCK8实验,应该每次做标准曲线吗?
建议每次做。虽然细胞是一样的,但是细胞的状态不一定一样,对于状态不一样的细胞,建议每次做标准曲线。如果试剂的批号不一样,灵敏度可能会有轻微的差异,对于不同的批号建议分别做标准曲线。 如需了解更多关于cck8产品的信息,请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »体内转染(Entranster)与小胶质细胞M2极化和脑炎性保护作用研究
小胶质细胞介导的炎症会导致脑出血(ICH)继发性损伤。活化的小胶质细胞在脑损伤和修复中具有促炎症(M1)和抗炎(M2)的双重功能。miR-124是一种有效的在脑损伤后抗小胶质细胞的抗炎药。然而,ICH后小胶质细胞的M1/M2极化的调节作用还未见报道。现分享一篇体内转染(Entranster)与小胶质细胞M2极化和脑炎性保护作用研究的文献,以供参考。
阅读更多 »RNA转染与水通道蛋白1和肺动脉平滑肌细胞迁移研究
肝肺综合征(HPS)以肺内血管扩张(IPVD)引起的动脉氧合缺陷为特征。肺血管重塑(PVR)是IPVD的一个重要病理特征,然而,有关该过程的内在机制的细节尚不明确。现分享一篇RNA转染(Entranster)与水通道蛋白1和肺动脉平滑肌细胞迁移研究的文献,以供参考。
阅读更多 »同样是慢病毒感染,为什么你的感染效率那么低?
在慢病毒感染细胞过程中,会遇到哪些问题呢? 1.在细胞感染时, MOI是一个非常重要的指标,如何确定MOI值呢? MOI:复感染指数,是指病毒对细胞的感染能力,MOI越高,细胞越难被感染。通常把某株细胞有80%被感染时所用的病毒颗粒数和细胞数目的比值作为该株细胞的MOI。 MOI=(病毒滴度×病毒体积)/细胞数目 感染条件及MOI的选择原则: 1. 在细胞形 …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与HIV-1 TAT泛素化和羧基末端区的稳定性和活性调控研究
人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)的反转录激活因子(TAT)蛋白已知经历泛素化。然而,泛素化在调节TAT稳定性和活性方面的作用尚不清楚。 现分享一篇DNA转染(Entranster)与HIV-1 TAT泛素化和羧基末端区的稳定性和活性调控研究的文献,以供参考。
阅读更多 »体内转染(engreen)与异甘草素和大鼠早期脑损伤研究
脑内出血(Intracerebral hemorrhage,ICH)可引起有效的氧化应激反应和炎症过程,异甘草素(Isoliquiritigenin)是一种类黄酮物质,可以激活核因子E2相关因子2(Nrf2)介导的抗氧化系统,负调控核因子B(NF-κBκκ)和NOD受体家族。现分享一篇体内转染(Entranster-in vivo)与异甘草素和 …
阅读更多 »Frontiers in Neuroscience | 厦门大学医学院:如何才能有效缓解神经炎症疼痛?
《Frontiers in Neuroscience》期刊上新发表的神经相关文章“Long Non-coding RNA Uc.48+ Small Interfering RNA Alleviates Neuroinflammatory Hyperalgesia in Gp120-Treated Rats v …
阅读更多 »细胞DNA转染效率低的原因
DNA转染效率低的原因可从以下几方面找: 1.质粒DNA或混和液中含有血清。 对策:用无血清培养基或Opti-MEM培养基。 2.质粒DNA和转染试剂的比率不是最优 对策:对大多数细胞而言,质粒DNA和转染试剂的比例为1:2-1:3,一般要做优化实验,比例从1:0.5-1:5 逐一检测。 3.质粒DNA 已部分降解或质量不够好 对策:用好的质粒纯化试剂确保质 …
阅读更多 »动物实验系列篇章之七—— 实验动物的处死
当实验中途停止或结束时,实验者应站在实验动物的立场上以人道的原则去处置动物,原则上不给实验动物任何恐怖和痛苦,也就是要施行安乐死。安乐死是指实验动物在没有痛苦感觉的情况下死去。实验动物安乐死方法的选择取决于动物的种类与研究的课题。 一、蛙 类 常用金属探针插入枕骨大孔,破坏脑脊髓的方法处死。将蛙用湿布包住,露出头部,左手执蛙,并用食指按压其头部前端,拇指按压 …
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