英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
下面以Entranster-R4000试剂为例，说一下siRNA转染步骤（24孔板） 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞：提前一天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞汇合度（Confluence）在30％左右为宜，转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那 …
阅读更多 »转基因动物的那些事儿，想说你为什么这么难？
1980年底Gordon等人首次将克隆的基因注入小鼠受精卵原核，然后移植于假孕的母鼠输卵管,培育出第1个转基因动物。这种将外源性基因用实验方法插入动物生殖细胞的基因组而获得具有插入基因特性，并能正常繁衍的动物称为转基因动物 ( transgenicanimals)。转基因技术是生物学领域最新重大进展之一，已能渗透到生物学、医学、畜牧学等学科的广泛领域。转基因 …
阅读更多 »体内转染与miRNA-144-3p和脑出血诱导的继发性脑损伤研究
脑出血约占死亡和发病率的50%，有不同的亚型，包括由脑实质深处的小血管破裂引发的脑出血（ICH）。此外，在存活的患者中，75%的患者受到不同程度的运动、感觉、思维定势和其他不可替代的脑功能损伤。即使结合复杂的治疗方法，继发性脑损伤（SBI）也可能发生在ICH之后，令人失望的预后是不可避免的。几十年来，医学研究一直致力于发现一种有效和直接的治疗方 …
阅读更多 »RNA转染与大鼠肺辐射损伤中microRNA和mRNA表达谱的整合研究
暴露与辐射中会引起细胞反应，这可能受到基因表达网络的调控。miRNA是一种小的非编码RNA，通过促进mRNA的降解或抑制蛋白质的翻译来调节基因的表达。在放射性肺损伤中miRNA和mRNA的表达模式还不是很清楚，并且miRNA在这个过程中的作用还未有研究。现分享一篇RNA转染（Entranster）与大鼠肺辐射损伤中microRNA和mRNA表达谱的整合研究的 …
阅读更多 »ECL发光液与traf1在幽门螺杆菌相关细胞凋亡和胃癌发生中的作用研究
肿瘤坏死因子受体相关因子1（traf1）是traf1家族成员，在动脉粥样硬化、淋巴瘤和实体瘤等疾病中失调，但traf1在胃癌中的作用尚不清楚。现分享一篇ECL发光液（enlight）与traf1在幽门螺杆菌相关细胞凋亡和胃癌发生中的作用研究的文献，以供参考。 文献地址：https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs …
阅读更多 »体内转染的方法与免疫系统疾病多发性硬化（MS）研究
多发性硬化（Multiple sclerosis，MS）是中枢神经系统的一种慢性脱髓鞘性神经变性疾病。虽然MS的确切发病机制尚不清楚，但CD4 + T细胞介导的自身免疫被认为是发病机制中最重要的方面之一。哺乳动物非编码microRNAs（miRNAs）可参与免疫系统的功能。miR-155的表达与病人多发性硬化症疾病的严重程度和小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎（E …
阅读更多 »RNA转染与Cav3通过Wnt信号通路与骨质疏松大鼠模型骨形成研究
骨质疏松症是一种以骨密度和骨强度降低为特征的疾病，常见于老年人。Caveolin-3（Cav3）是caveolae膜结构域的主要结构蛋白，已被报道可参与细胞信号传导和维持细胞结构。现分享一篇RNA转染（entranster）与Cav3通过Wnt信号通路对骨质疏松大鼠模型骨形成的影响研究的文献，以供参考。 文献地址：https://link.spr …
阅读更多 »Theranostics | 南方医科大学中西医结合医院：一类新的癌症抑制因子，可以靶向胃癌
《Theranostics》期刊上发表的“CCDC65 as a new potential tumor suppressor induced by metformin inhibits activation of AKT1 via ubiquitination of ENO1 in gastric cancer“文章发现了肿瘤抑制因子 CCDC65 …
阅读更多 »如何能够做好siRNA转染实验？
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮 …
阅读更多 »CCK8实验时，如果OD值太低，可以采取什么办法？
可以采取2个办法：① 适当增加细胞数量。② 延长加入CCK8试剂后的染色时间。 如需了解更多关于cck8产品的信息，请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
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