英格恩技术资料

siRNA导入细胞有以下几种方法：化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素：细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术（Entranster）是最为常用的方法，而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好。

胰腺癌仍然是最致命的恶性肿瘤之一，5年生存率低于7%，预后差主要是由于该疾病在早期和治愈阶段难以检测到。虽然手术切除是目前唯一可行的治疗方法，但高达80%的诊断为局部恶化或远处转移疾病的患者不适合切除。胰腺癌的诊断和治疗亟待改进。烟酰胺N-甲基转移酶（NNMT）的在胰腺癌中被报道是异常表达。然而，NNMT在胰腺癌发展中的作用仍然是难以捉摸的。现分享一篇ECL …

小GTP酶Rab5可以控制囊泡接到的质膜蛋白运输，其在血管内皮（VE）-钙黏蛋白的内化作用功能仍然未知，血管内皮（VE）-钙黏蛋白是一种内皮特异性跨膜元件，可以调节内皮细胞的极性和屏障功能。现分享一篇应用体内转染siRNA（Entranster）的方法研究肺微血管内皮功能的文献，以供参考。

肺癌是发病率和死亡率增长最快，对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。肺肿瘤发生是一个复杂的过程，包括基因突变或表观遗传变化等多种因素，导致细胞失控增殖、恶性转化和肿瘤转移。其他研究表明，慢性炎症与肝脏和肠道的肿瘤发生密切相关，而许多流行病学研究表明，慢性炎症可能在肺肿瘤发生中起关键作用。现分享一篇运用体内转染（Entranster）方法研究巨噬细胞和人支气 …

     小干扰RNA（siRNA）是通过RNA干扰（RNAi）在体外和体内抑制特定蛋白质合成的有力工具，由于RNAi利用天然途径，即在蛋白质翻译发生之前，在转录后水平上关闭基因表达，因此，siRNA诱导下调基因表达对基础研究和应用研究有着巨大的影响。siRNA及其递送系统的化学修饰已被建议用于改善细胞内siRNA递送 …

不合适的电场强度 合适的电场强度对于电转染实验非常重要，电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值，实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 细胞选择错误 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞（15代以内，传代后2d）。因为处于对数生长期的细胞分裂旺盛，表面结构致密比稳定 …

公鸡的繁殖性能在家禽生产中起着重要作用。男性生殖腺、雄激素和精子发生对男性维持正常的生殖功能至关重要。同时，年龄也是影响公鸡繁殖性能的重要因素。公鸡生育高峰在37周左右，50～55周左右下降。然而，商业饲养的公鸡往往被期望在更长的时间内保持较高的生育率。如何提高老龄公鸡的生育能力已成为亟待解决的重要问题。ω-3/n-3多不饱和脂肪酸（ω-3/n-3 pufa …

       环状RNA在许多生物系统中被发现。它们大多被认为是microRNA的分子“海绵”，具有许多未知的生物学活性。小干扰RNA作为许多非编码RNA之一，已成为基因表达调控和药物治疗的重要工具。虽然由siRNA介导的靶mRNA裂解具有高度的序列特异性，意外“脱靶”沉默内源基因在细胞中也观察到，这限制了siRNA的进一步应用。脱靶效应的siRNA也能诱导 …

1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮肤，头发，所有徒手接触过 …

嗅间充质干细胞（OE-MSCs）是嗅觉固有层中一种新的常驻干细胞类型。OE-MSCs通过调节T细胞的反应，包括调节性T细胞（Treg）的上调和Th1/Th17细胞的下调而发挥其免疫抑制能力。作为炎性细胞因子，IL-17在胶原诱导性关节炎（CIA）的发展过程中起着关键的作用。然而，目前尚不清楚IL-17水平的升高是否会影响OE-MSCs在炎症状态下的免疫抑制功 …