英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮肤，头发，所有徒手接触过 …
阅读更多 »体内转染（entranster）与fbxw5减少可减轻脊髓损伤研究
外伤性脊髓损伤（SCI）是造成死亡和终身残疾的主要原因。然而，对脊髓损伤的病理过程还没有完全了解。F-BOX/WD重复序列包含蛋白5（FBXW5），是scf型E3泛素连接酶复合物的一个亚单位，在调节各种病理方面具有重要作用。然而，对于fbxw5对SCI进展的影响知之甚少。 现分享一篇体内转染（entranster）与fbxw5减少可减轻脊髓损伤 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与环状非编码RNA减少基因脱靶效应研究
环状RNA在许多生物系统中被发现。它们大多被认为是microRNA的分子“海绵”，具有许多未知的生物学活性。小干扰RNA作为许多非编码RNA之一，已成为基因表达调控和药物治疗的重要工具。虽然由siRNA介导的靶mRNA裂解具有高度的序列特异性，意外“脱靶”沉默内源基因在细胞中也观察到，这限制了siRNA的进一步应用。脱靶效应的siRNA也能诱导多种细胞凋亡。 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与氧化应激诱导单核细胞坏死研究
细胞坏死是一种缺乏细胞凋亡和自噬特征的细胞死亡。在过去的几年里，人们发现坏死的发生和过程是程序化的，并且受到严格的调节。大量研究表明，死亡配体（如CD95L、TNF和TNF相关的凋亡诱导配体）诱导依赖于含死亡结构域（dd）激酶rip1活性的caspase独立的坏死样细胞的死亡。虽然坏死的诱导机制越来越清楚，但这一过程的执行仍然有些难以捉摸。现分享一篇ECL发 …
阅读更多 »电转染实验的建议
关于细胞的电转染实验，现提出以下几点建议供大家参考： 1. 选择合适的电场强度 合适的电场强度对于电转染实验非常重要，电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值，实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2. 选择合适的细胞 用于 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与间充质信号转导和牙源性上皮干细胞稳态研究
在小鼠中，出生后切牙的持续生长是由位于切牙的近端的牙乳头间充质细胞和牙上皮干细胞协调这两个群体的多能祖细胞所协调的。但两者之间合作的分子机制在很大程度上是未知的。现分享一篇ECL发光液（enlight）与间充质信号转导和牙源性上皮干细胞稳态研究的文献，以供参考。
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与YAP和衰老细胞的存活研究
虽然化疗药物可以诱导衰老以阻止肿瘤细胞进一步分裂，但衰老也可以主要通过衰老相关的分泌表型促进肿瘤发生。因此，应立即清除衰老的肿瘤细胞，防止耐药性和复发。现分享一篇ECL发光液（enlight）与YAP和衰老细胞的存活研究的文献，以供参考。 文献地址：https://sci-hub.shop/10.1016/j.canlet.2016.02.04 …
阅读更多 »动物体内转染操作视频（engreen）
RNA转染影响因素
转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的，而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染，因RNA与DNA大小不同，转染条件不同，所需的试剂也应不同，所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster-R4000. RNA转染时RNA的用量 RNA转染的用量必须参考RNA转染试剂说明，因为RNA …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与乙型脑炎病毒和细胞凋亡研究
流行性乙型脑炎病毒（JEV）感染是一种以神经元死亡为特征的脑组织疾病。然而，人们对其基本机制知之甚少。现分享一篇RNA转染（Entranster）与乙型脑炎病毒和细胞凋亡研究的文献，以供参考。
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