英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
谷氨酸兴奋性中毒参与了脑出血（ICH）引起的继发性脑损伤（SBI）。突触体相关蛋白23（SNAP23）和SNAP25分别参与突触前谷氨酸的释放和突触后谷氨酸受体（NMDA受体）运输，这两者对于谷氨酸介导的兴奋性毒性都是必不可少的。SNAP23和SNAP25具有较高的同源性，SNAP23被证明可与膜联蛋白A7（ANXA7）相互作用。现分享一篇体内转染（Entr …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与顺铂耐药的卵巢癌细胞株研究
卵巢癌是妇科恶性肿瘤患者死亡的主要原因。卵巢癌的早期诊断是困难的，但其进展很快。标准治疗是手术切除，其次是铂-紫杉类化疗。然而，传统的手术和化疗的疗效相当差，铂耐药的癌症在六个月内约25%的患者复发，总的5年生存率约为31%。为了提高卵巢癌的生存率，提高患者的生活质量，迫切需要新的治疗靶点，需要更深入地了解耐药的分子机制。现分享一篇ECL发光液（en …
阅读更多 »RNA转染实验的影响因素
1. 转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的，而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染，因RNA与DNA大小不同，转染条件不同，所需的试剂也应不同，所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster试剂. 2. &n …
阅读更多 »细胞电转染实验的几点建议
1. 电场强度要合适 合适的电场强度对于电转染实验非常重要，电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值，实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2. 细胞状态要好 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞（15代以内，传代后2 …
阅读更多 »如何优化RNA转染条件？
可从以下几方面进行优化： 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与褪黑激素降低吸烟引起的高血糖研究
吸烟是一种不健康的生活习惯。糖尿病是多因素的，与环境因素和生活方式有关。值得注意的是，糖尿病似乎受到吸烟的严重影响，包括稳态模型评估在内的临床流行病学调查表明吸烟可能会干扰血糖平衡，但吸烟对高血糖和β细胞的作用机制尚不清楚。现分享一篇ECL发光液（enlight）与褪黑激素降低吸烟引起的高血糖研究的文献，以供 …
阅读更多 »RNA转染（entranster）与Stat3抑制可增强cdn诱导的sting信号和抗肿瘤免疫研究
环GMP-AMP合成酶（cgas）-干扰素基因刺激剂（sting）通路是先天免疫的关键调节因子，在肿瘤治疗中已成为一个有前途的药物靶点，但由于其在肿瘤发展和免疫中的二分法作用，使得该通路在肿瘤治疗中的应用变得更加复杂。白细胞介素-6/Stat3通路的反馈激活可减弱Sting通路的激活和诱导的抗肿瘤免疫。现分享一篇RNA转染（entranster）与Stat3 …
阅读更多 »质粒DNA转染实验效率影响因素
1， 质粒的构建：启动子的选择 启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响，但是对转染结果却有着微妙的影响。 2， 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的 …
阅读更多 »siRNA细胞转染效率低的原因是什么？
1. siRNA与转染试剂比例不佳 由于siRNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了siRNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这时转染效率和总的细胞数量就很重要，一般细 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与鼻腔倒乳头状瘤恶变为鳞状细胞癌研究
鼻腔肿瘤是一种罕见的恶性肿瘤，每年全球发病率约为1/10万。组织学上，鼻腔肿瘤分为肉瘤、嗅神经母细胞瘤、粘膜黑色素瘤和癌。鼻腔肿瘤中55%以上为癌，包括鳞状细胞癌（SCC）、腺癌和腺样囊性癌，倒置乳头状瘤（IP）是鼻腔和鼻窦常见的良性肿瘤。IPS的恶性转化率小于27%，但其转化过程中涉及的组织形态学、免疫组化及生物学标记尚不清楚。因此，探索ips …
阅读更多 »