英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
该团队在《Frontiers in Neuroscience》期刊上发表了题为“MiR-128-3p Alleviates Spinal Cord Ischemia/Reperfusion Injury Associated Neuroinflammation and Cellular Apoptosis via SP1 Suppression …
阅读更多 »shRNA转染后，什么时候做RT-PCR最好?
shRNA转染后，进行RT-PCR的最佳时间取决于多种因素，包括细胞类型、转染效率、shRNA的表达和目标基因的降解速度。一般来说，在转染后的24到72小时内进行RT-PCR是比较常见的时间点。具体来说： 24小时后：在这个时间点，可以开始检测到shRNA的表达以及目标基因的初步下调情况。对于一些高效的shRNA，这个时间点可能已经有显著的基因沉默效果。 4 …
阅读更多 »提高RNA转染效率的几点建议
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮肤，头发，所有徒手接触过 …
阅读更多 »RNA转染与mir-155调节胶质瘤细胞增殖和侵袭研究
胶质瘤是成人最常见的原发性恶性脑肿瘤，尽管治疗有所改善，脑胶质瘤患者的预后和生存率仍然非常差。特别是，根据目前WHO脑肿瘤分类，多形性胶质母细胞瘤是最恶性的胶质瘤。探索胶质瘤发生、发展的分子机制，已成为发展胶质瘤新的治疗策略的迫切需求。最近的研究已经报道了脑肿瘤细胞中miRNAs的改变，表明它们在癌基因或抑癌基因中的作用。 现分享一篇RNA转染（Entran …
阅读更多 »动物实验系列篇章之五——实验动物的采血法
实验研究中，经常要采集实验动物的血液进行常规质量检测、细胞学实验或进行生物化学分析，故必须掌握正确的采集血液的技术。采血方法的选择，主要决定于实验的目的和所需血量以及动物种类。 一、大鼠、小鼠的采血方法 (一)剪尾采血：需血量很少时常用本法，如作红、白细胞计数、血红蛋白测定、制作血涂片等可与此法。动物麻醉后，将尾尖剪去约5mm，从尾部向尾尖部按摩，血即从断端 …
阅读更多 »DNA转染与菱形蛋白酶RHBDD1诱导蛋白水解靶点研究
在过去的几十年中，研究发现，调节性膜内蛋白水解（RIP）在各种细胞过程中起着重要的作用，包括细胞信号转导、基因转录和凋亡。调节性膜内蛋白水解是蛋白酶在其跨膜区域内切割底物的过程。已鉴定出三种主要的膜内蛋白酶家族，包括金属蛋白酶型S2P家族、C-分泌酶和信号肽肽酶家族和菱形蛋白酶。现分享一篇DNA转染（En …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与TRPM7和肾脏保护作用研究
瞬时受体电位M型7（TRPM7）是一种膜离子通道和激酶。TRPM7在肾脏丰富表达，缺血再灌注损伤（IR）可上调TRPM7的表达。我们以前的研究表明，环螺旋B肽（CHBP）改善肾IR相关的损伤，但其作用机制尚不明确。现分享一篇体内转染（Entranster）与TRPM7和肾脏保护作用研究的文献，以供参考。
阅读更多 »RNA转染与膝关节骨性关节炎中WISP-1调控机制的研究
随着生活、工作方式的改变及社会人口的老龄化，骨关节退行性病变已成为高发疾病，其中代表性疾病之一为骨性关节炎（osteoarthritis, OA）。最近研究表明：WISP-１ 具有促进关节软骨破坏的作用 。WISP-１ 在正常软骨和滑膜中几乎不表达，而在退变的软骨及滑膜（如OA）中WISP-１异常增高，通 …
阅读更多 »ECL发光液与果胶减少环境污染物引起的小鼠肥胖研究
肥胖疾病的流行引起了全球的关注。环境污染物是导致肥胖的主要原因之一。许多研究表明，膳食纤维可以减少高脂肪饮食引起的肥胖，但环境污染引起的肥胖能否逆转还不得而知。现分享一篇ECL发光液（enlight）与果胶通过调节肠道微生物群减少环境污染物引起的小鼠肥胖研究的文献，以供参考。文献地址：https://www.sciencedirect.com/ …
阅读更多 »电穿孔转化感受态E.coli TG1细胞的制备
一、材料和试剂 恒温旋转式摇床 三角烧瓶（容量为1或2L） 50ml灭菌离心管 低温高速离心机 SB培养基 细菌培养用胰化蛋白胨 20g 细菌培养用酵母提取物 5g NaCl 0.5g 去离子水 950ml 250mmol/L KCl溶液 10ml 以5N …
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