我认为,要想更高的细胞DNA转染效率,应注意以下几点: 1, 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果:超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多,特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟,相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质粒正好比较大,又没有经验,选择特别注明可以转大质粒的转染试剂成功几率 …
阅读更多 »DNA转染与bom-mir-2805在上调家蚕纤维蛋白轻链基因的表达研究
家蚕是世界上最重要的经济昆虫,也是鳞翅目重要的模式生物。家蚕丝腺是一种高度特异性,具有高效合成丝蛋白能力的特殊器官。丝蛋白主要由丝素和丝氨酸组成。丝素基因的表达主要在转录水平上受到时间和空间调控,表现为表达抑制模式。研究表明家蚕miRNAs参与丝蛋白基因的表达调控。另外,家蚕丝腺特异性转录因子(Tfs)如丝腺因子(SGF,包括SGF-1、SGF- …
阅读更多 »DNA转染效率影响因素
细胞DNA转染效率的影响因素 1.细胞密度 一般来说,当细胞密度达到60%~80%时进行转染可以取得较高的转染效率,过低或过高都会影响转染效果。 2.细胞状态 这点非常关键,很多时候传代次数太少或者太多都将导致细胞对转染试剂敏感度的改变。因此,为了提高转染效率以及转染稳定性、降低细胞毒性,应尽量使用适度传代的细胞系,并在不同次实验时保持细胞传代次数的 …
阅读更多 »如何通过电穿孔转染DNA?
试剂 运载 DNA l0mg/mL 细胞生长培养基 电穿孔缓冲液 指数生长的培养细胞 线性化或环状质粒DNA ( 1 ~ 5μg/μL , 溶于无菌去离子水) 磷酸盐缓冲液( PBS ) 胰岛素 设备 电穿孔杯 电穿孔仪器 血细胞计数器 组织培养皿或多孔培养板 组织培养瓶(75cm2) 方法 准备电穿孔用细胞。 对于贴壁细胞 电穿孔前一天,通过胰酶消化释放贴 …
阅读更多 »体内DNA转染(Entranster)与实验性脑出血大鼠继发性脑损伤神经保护作用研究
脑内出血(Intracerebral hemorrhage,ICH)是一种常见的致命型的,具有高发病率和死亡率的中风,这往往会导致长期的神经功能障碍。除了通过直接机械损伤引起的出血性原发性脑损伤,脑出血还会导致继发性脑损伤(SBI),这已被证明会导致神经功能恶化。现分享一篇体内DNA转染(Entranster)与实验性脑出血大鼠继发性脑损伤神经保护作用研究的 …
阅读更多 »RNA转染实验的影响因素
1. 转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染,因RNA与DNA大小不同,转染条件不同,所需的试剂也应不同,所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster试剂. 2. &n …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与巨噬细胞抗炎作用研究
巨噬细胞(macrophage)活化是宿主防御病原微生物的关键过程,可引起炎症级联反应和炎症介质的释放,如TNF-α、IL-6和NO。反过来这些介质会引起炎症反应以及对邻近组织和巨噬细胞本身产生伤害。现分享一篇DNA转染(Entranster)与巨噬细胞抗炎作用研究的文献,以供参考。
阅读更多 »质粒DNA转染注意事项
1.启动子的选择启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响,但是对转染结果却有着微妙的影响。2.质粒的大小和质量线性化还是超螺旋会影响转染结果:超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多,特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟,相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质粒 …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与多梳抑制复合物2(PRC2)和肿瘤研究
多梳抑制复合物2(PRC2),可对H3K27三甲基化(H3K27me3),是肿瘤发生发展的一部分,和/或维持成人组织特异性。PRC2癌症中的关键作用使它成为表观遗传学癌症治疗的治疗靶点。现分享一篇DNA转染(Entranster)与多梳抑制复合物2(PRC2)和肿瘤研究的文献,以供参考。
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与抗病毒天然免疫研究
天然免疫是保护宿主细胞免受微生物感染的第一道屏障。TANK结合激酶1(TBK1)介导的I型干扰素(IFN)诱导在宿主抗病毒反应及免疫平衡方面起着至关重要的作用。现分享一篇运用DNA转染(Entranster-H4000)研究抗病毒天然免疫的文献,以供参考。
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