质粒的构建:启动子的选择 启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响,但是对转染结果却有着微妙的影响。 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果:超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多,特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟,相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如 …
阅读更多 »DNA转染与中国冠鸭冠垫胚胎形态观察及hoxc8基因表达研究
中国冠鸭(凤头鸭)最近又出现在中国。除了白色的羽毛和黑色的嘴和脚之外,凤头鸭还有很高的羽毛冠。该品种可用于观赏或作为模式生物;然而,对其独特形态特征的遗传基础和发育知之甚少。现分享一篇DNA转染(entranster)与中国冠鸭冠垫胚胎形态观察及hoxc8基因表达研究的文献,以供参考 …
阅读更多 »如果细胞密度低,铺板48h可以转染吗?
如果细胞密度较低,一般来说,细胞在转染前的培养时间是很关键的。48小时的培养时间通常是足够的,但是否适合转染还要考虑几个因素: 1. 细胞的生长状态 细胞在转染时最好处于对数生长期,也就是细胞在活跃分裂和增殖中。若细胞密度过低,可能会处于生长迟缓或衰退状态,这会影响转染效率。 细胞密度太低(<30%):如果细胞太少,可能会影响转染试剂的吸附和细胞的转染 …
阅读更多 »如何通过电穿孔转染DNA?
试剂 运载 DNA l0mg/mL 细胞生长培养基 电穿孔缓冲液 指数生长的培养细胞 线性化或环状质粒DNA ( 1 ~ 5μg/μL , 溶于无菌去离子水) 磷酸盐缓冲液( PBS ) 胰岛素 设备 电穿孔杯 电穿孔仪器 血细胞计数器 组织培养皿或多孔培养板 组织培养瓶(75cm2) 方法 准备电穿孔用细胞。 对于贴壁细胞 电穿孔前一天,通过胰酶消化释放贴 …
阅读更多 »进行2个不同基因的siRNA共转染,需要加大核酸或者转染试剂的剂量吗?这个和做2个质粒共转染有什么区别?
进行2个不同基因的siRNA共转染时,确实可能需要调整核酸或者转染试剂的剂量,但和质粒共转染的情况有一些区别。 转染试剂的剂量: 当你进行siRNA共转染时,转染试剂的剂量通常依赖于转染效率。对于siRNA来说,一般情况下转染试剂的量不需要比单一siRNA转染时增加太多,因为转染试剂的作用主要是包裹和传递siRNA到细胞内,只要达到足够的转染效率就可以。如果 …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与HIV-1 TAT泛素化和羧基末端区的稳定性和活性调控研究
人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)的反转录激活因子(TAT)蛋白已知经历泛素化。然而,泛素化在调节TAT稳定性和活性方面的作用尚不清楚。 现分享一篇DNA转染(Entranster)与HIV-1 TAT泛素化和羧基末端区的稳定性和活性调控研究的文献,以供参考。
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与5-羟色胺和非酒精性脂肪性肝病研究
非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是世界范围内最常见的肝脏疾病之一,它由单纯性脂肪变性发展为炎性非酒精性脂肪性肝炎(NASH),在某些情况下甚至发展为肝硬化或肝细胞癌。NAFLD与2型糖尿病(T2DM)相关。在NAFLD中,肝脏发生过量脂质合成(ELS),主要包括新的脂肪生成和三酰甘油(TG)以及极低密度脂蛋白(VLDL)的合成,导致脂质积聚 …
阅读更多 »DNA转染与bom-mir-2805在上调家蚕纤维蛋白轻链基因的表达研究
家蚕是世界上最重要的经济昆虫,也是鳞翅目重要的模式生物。家蚕丝腺是一种高度特异性,具有高效合成丝蛋白能力的特殊器官。丝蛋白主要由丝素和丝氨酸组成。丝素基因的表达主要在转录水平上受到时间和空间调控,表现为表达抑制模式。研究表明家蚕miRNAs参与丝蛋白基因的表达调控。另外,家蚕丝腺特异性转录因子(Tfs)如丝腺因子(SGF,包括SGF-1、SGF- …
阅读更多 »DNA转染试剂对比
由此可见,Entranster-H4000具有更好的转染效果。
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与微管稳定性研究
微管介导的细胞事件如细胞内转运和细胞极性的维持高度依赖于微管的稳定性,微管稳定性由细胞中微管相关蛋白(MAPs)的集合控制。MAP7结构域蛋白3(Mdp3)近来被认为是微管稳定性的关键调节因子。然而,如何实现这一功能仍然是不清楚的。现分享一篇DNA转染(Entranster)与微 …
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