英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
败血性休克的特点是血管功能障碍，凝血障碍，多器官衰竭，最后死亡。细菌感染和随之产生的内毒素（脂多糖[lps]）暴露是败血症的原发原因，对lps的严重炎症反应被认为是败血症休克的重要介质。血管功能障碍，包括全身性低血压和肺动脉高压（PAH），是败血性休克的威胁生命的疾病。发现脂多糖诱导的炎症可影响肺动脉高压患者的血管内皮功能。然而，目前尚不清楚LP …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与巨噬细胞迁移抑制因子和弓形虫病研究
弓形虫是一种细胞内原生动物，属于顶端复合体门。这种寄生虫能感染各种温血哺乳动物，包括人类、牲畜和鸟类。据统计，世界上大约三分之一的人口是血清阳性。这种寄生虫在免疫功能低下的病人身上会引起严重的症状，在感染的孕妇身上也会导致流产。此外，流行病学调查的结果表明，弓形虫病的流行给畜牧业造成了巨大的经济损失。 目前，药物（嘧啶、磺胺嘧啶和螺旋 …
阅读更多 »动物体内转染技术可以做什么？
使用动物体内转染专用试剂Entranster-in vivo进行动物体内转染实验可以： ● 代替基因敲除动物，实验从数月缩短到3天，成本从数万减少到几千。 ● 代替转基因动物，动物数量任意，不用担心动物死亡，可任意重复实验。 ● 代替病毒感染动物，效率更高，可以做包括神经系统内到任意器官，全身器官。 ● 可转任意核酸，基因敲除，转基因动物，病毒感染动物无法进 …
阅读更多 »siRNA转染常见问题及解答
问：siRNA导入细胞有哪些方法，哪种最好？ 答：siRNA导入细胞有以下几种方法：化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素：细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术是最为常用的方法，而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好。 问：哪种转染试剂效果好？ …
阅读更多 »ECL发光液与塞来昔布抑制人肝癌细胞生长和侵袭研究
肝癌是全球第二大癌症死亡原因，每年新增78.25万例，死亡74.55万人。东亚地区肝癌发病率最高，仅中国就占世界总病例和死亡人数的50%左右。肝细胞癌（HCC）占原发性肝癌绝大多数。根据巴塞罗纳临床肝癌分期分类，肿瘤大小、血管浸润和转移是决定肝癌患者临床分期和预后的关键因素。因此，识别与肿瘤生长、侵袭和转移相关的关键分子和信号通路有助于我们了解 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与膜联蛋白A7和大鼠继发性脑损伤研究
谷氨酸兴奋性中毒参与了脑出血（ICH）引起的继发性脑损伤（SBI）。突触体相关蛋白23（SNAP23）和SNAP25分别参与突触前谷氨酸的释放和突触后谷氨酸受体（NMDA受体）运输，这两者对于谷氨酸介导的兴奋性毒性都是必不可少的。SNAP23和SNAP25具有较高的同源性，SNAP23被证明可与膜联蛋白A7（ANXA7）相互作用。现分享一篇体内 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与丝切蛋白敲降和小鼠出血性脑损伤研究
脑血管破裂引起的脑内出血（ICH）与死亡率和发病率显著相关。临床研究的重点是减轻原发性损伤，血肿形成和扩张，这在很大程度上是无效的，表明继发性损伤引起的炎症贯穿于整个损伤过程。现分享一篇 体内转染（Entranster）与丝切蛋白敲降和小鼠出血性脑损伤研究的文献，以供参考。
阅读更多 »动物体内转染实验效果如何检测
运用Entranster-in vivo进行体内转染后，一般根据课题研究要求进行，如果单纯检测转染效率，推荐用qRT-PCR方法和luciferase方法。还可根据研究，采用组织学和生理学，以及物理测量的方法进行。由于体内转染的复杂性，通常体外试验中常采用的转染GFP蛋白用荧光显微镜观察的方法，由于体内取出的组织材料背景高，检测较为困难。 &nbs …
阅读更多 »ECL发光液与上皮性卵巢癌差异表达蛋白的鉴定研究
卵巢癌是女性死亡的第五大死因，也是最致命的妇科肿瘤。每年新增卵巢癌病例22280例，死亡率15500例，占女性新增癌症病例的3%和所有癌症死亡病例的6%。卵巢上皮性癌（EOC）由于盆腔脏器位置深，早期诊断困难，因此初诊时60%以上的患者处于晚期。EOC的标准治疗是手术，其次是铂类辅助化疗。虽然EOC的治疗不断改进，但晚期患者的治愈率仍低于5～1 …
阅读更多 »siRNA细胞转染操作步骤
下面以Entranster-R4000试剂为例，说一下siRNA转染步骤（24孔板） 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞：提前一天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞汇合度（Confluence）在30％左右为宜，转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那 …
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