2025年 1 月 18日, 星期六
新闻

病毒感染

AAV病毒感染,tu/ml和vg/ml 的单位如何 换算

在AAV病毒感染实验中,TU/mL(转导单位每毫升,Transduction Unit per milliliter)和vg/mL(病毒基因组拷贝数每毫升,Viral Genome copy per milliliter)是两种常见的病毒滴度单位。它们表示的是病毒浓度的不同方面: TU/mL:代表的是真正具有转导能力的AAV颗粒的数量,也就是能够在宿主细胞中 …

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慢病毒感染后多长时间换液和多长时间检测?

在慢病毒感染的实验中,通常的做法是,在感染后24小时更换培养液,目的是去除未吸附的病毒和残留的病毒介质,避免对细胞的毒性影响。更换培养液后,细胞会继续培养,通常会保持培养在常规的全培液中。 对于延长观察时间的问题,感染后72小时一般是观察慢病毒感染效果的一个标准时间点,因为大多数慢病毒的转导效率在72小时内达到峰值。尽管感染后24小时更换培养液,但并不意味着 …

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慢病毒感染贴壁细胞实验方法

1.提前一天细胞铺板 提前一天种植细胞,以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整,不要采用过高的细胞密度)。 感染实验 ⑴将EnvirusTM-LV用无血清稀释液稀释(用量参见下表),充分混匀,制成增强剂稀释液。 ⑵将病毒浓缩液用无血清稀释液稀释(用量参见下表),充分混匀,制成病毒稀释液。 注:由于病毒浓度情况不同,具体病毒浓缩液用量酌情依据 …

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慢病毒滴度的计算

实验准备 目标细胞:选择适合慢病毒感染的细胞株(如 HEK293T 或靶细胞)。 病毒稀释:对病毒原液进行一系列梯度稀释(如 10−1,10−2,10−3,10−4)。 感染细胞:将稀释后的病毒感染到目标细胞中,确保设置对照组(未加病毒)。 培养:培养 48-72 小时(根据病毒系统和荧光/抗性蛋白表达时间调整)。 检测方法:检测报告基因表达水平(如荧光蛋白 …

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如何解决病毒感染细胞效率低的难题?

       病毒感染细胞本来效率就较低,一定要注意以下几点:1.感染时的培养基尽量少些;2. 使用Envirus-LV,可以提高效率约20-50倍。      病毒感染细胞本来效率就较低,整个过程相对复杂难操作,一般一次花费周期至少两三个月,多则几个月到十几个月不等,经费也是几万到十几万。万一实验失败需要重复操作会花费更多的时间和开支。所以有效提高病毒转染 …

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慢病毒感染中细胞密度需要考虑的因素

细胞类型: 不同细胞系对慢病毒的感染效率不同。例如,一些细胞对病毒更敏感,需要更低的病毒量和细胞密度。 敏感细胞系(如HEK293T):种植密度可稍低; 难感染细胞系(如原代细胞):需要更高密度。 病毒滴度: 如果病毒滴度高,细胞密度可以稍低。 如果病毒滴度较低,建议适当提高种植密度,并配合 增强试剂(如Envirus-LV) 提高感染效率。 LV感染目标: …

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请问那乳胶法能测出失活病毒么

乳胶法(Latex agglutination test)是一种常用于检测抗原或抗体的免疫学方法,通过抗原抗体反应引发乳胶微粒的凝集。乳胶试剂通常含有涂有已知抗原或抗体的乳胶微粒,这些微粒能够与相应的抗原或抗体结合,形成可见的凝集反应。 乳胶法检测失活病毒的可行性 乳胶法 本质上是基于抗原-抗体反应来进行检测的。如果病毒被“失活”(即病毒的活性丧失),但其结 …

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使用带有GFP荧光标记的慢病毒感染细胞,想要检测GFP阳性率,通常用什么方法?

如果您使用的是带有GFP荧光标记的慢病毒感染细胞,想要检测GFP阳性率,通常情况下可以通过流式细胞仪来实现,步骤如下: 收集细胞:首先收集感染后的细胞,并用适当的缓冲液进行重悬。 去除死细胞:可以通过加PI(碘化丙啶)或7-AAD等染料来排除死细胞,这样有助于提高检测的准确性。 流式检测:使用流式细胞仪时,选择FITC通道(通常是FL1通道),因为GFP的荧 …

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慢病毒转染贴壁细胞实验方法

1.提前一天细胞铺板 提前一天种植细胞,以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整,不要采用过高的细胞密度)。 感染实验 ⑴将EnvirusTM-LV用无血清稀释液稀释(用量参见下表),充分混匀,制成增强剂稀释液。 ⑵将病毒浓缩液用无血清稀释液稀释(用量参见下表),充分混匀,制成病毒稀释液。 注:由于病毒浓度情况不同,具体病毒浓缩液用量酌情依据 …

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病毒感染细胞效率低怎么办?

病毒感染细胞本来效率就较低,一定要注意以下几点:1.感染时的培养基尽量少些;2. 使用Envirus-LV,可以提高感染效率20-50倍。 病毒感染细胞本来效率就较低,整个过程相对复杂难操作,一般一次花费周期至少两三个月,多则几个月到十几个月不等,经费也是几万到十几万。万一实验失败需要重复操作会花费更多的时间和开支。所以有效提高病毒转染效率是病毒转染细胞的关 …

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