英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
Periaxin蛋白是施旺细胞特异表达的一种蛋白，是其在周围神经髓鞘细胞骨架相关蛋白的筛选中首先被鉴定的。PRX蛋白在髓鞘形成和髓鞘的稳定起到了重要的作用，与肿瘤细胞侵袭转移密切相关。现分享一篇ECL发光液（enlight）与periaxin蛋白和施旺细胞研究的文献，以供参考。
阅读更多 »western-blot实验经验总结
我做了很久的WB，最大的一个难点感觉在于样品制备上！蛋白的降解有些时候是你想象不到的，可能出奇的糟糕，也可能完全没事~~如果单独做WB的话，感觉以“快速彻底裂解，先变性后保存”的原则比较有效，尽量选择足够强的裂解液，甚至直接给loading buffer裂解，然后取出部分蛋白定量，其余加入loading buffer100度充分变性，再分装保存。有些时候比蛋 …
阅读更多 »siRNA转染实验注意事项
为了做好siRNA转染实验，在转染过程中，需要注意以下几点： 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导 …
阅读更多 »细胞电转染实验注意事项
1. 选择合适的电场强度 合适的电场强度对于电转染实验非常重要，电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值，实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2. …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与睫状体神经营养因子和阿尔兹海默症治疗研究
通过其病理特征，即老年斑和神经纤维缠结来抑制阿尔茨海默病（AD）进展，是一种有效的治疗方法。许多研究表明睫状体神经营养因子（CNTF）不仅能够促进神经元生长和维持细胞存活，还可显著降低淀粉样蛋白β（Aβ）聚集和沉积。现分享一篇ECL发光液（enlight）与睫状体神经营养因子和阿尔兹海默症治疗研究的文献，以供参考。
阅读更多 »siRNA转染与卫星胶质细胞中P2X7受体研究
嘌呤信号能够引起炎症和免疫反应。卫星胶纸细胞（SGCs）中的P2X嘌呤受体7（P2X7）的激活可能是促进炎症和神经性疼痛中一个必不可少的组成部分。长链非编码RNAs（lncRNAs）参与多种生理和病理过程。现分享一篇针对lncRNA BC168687的小干扰RNA（Entranster）对高糖和高游离脂肪酸环境下卫星胶纸细胞P2X7受体表达的影响的文献，以供 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与SASH1和黑色素细胞研究
在小鼠胚胎中，成黑素细胞起源于背神经脊，沿着表皮和真皮之间的背侧通路迁徙，在真皮中分散，最终进入表皮，并广泛扩散。现分享一篇RNA转染（Entranster）与SASH1和黑色素细胞研究的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染（Entranster）与骨形态发生蛋白和人软骨肉瘤研究
软骨肉瘤，源自于软骨细胞的恶性肿瘤，是第二最常见的原发性骨肿瘤。对于大多数患者，手术切除仍是首选的治疗方法，但也有很多不能手术的软骨肉瘤位于骨盆和脊柱区。而且，通常的辅助治疗，如化疗和质子束辐射也不能改善治疗结果。因此，例软骨肉瘤继续预后差。因此，迫切需要探索一种新疗法可以应对软骨肉瘤。骨形态发生蛋白是一类生长因子，是肿瘤生长因子β超家族的一个大家族。它们在 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与TAT和小鼠下丘脑运动及昼夜节律基因表达研究
反式激活子（Transactivator，Tat），HIV-1的调节蛋白，可促进HIV病毒快速复制，在HIV-1感染中起着非常重要的作用。对TAT蛋白功能的研究主要集中在抑制免疫系统、促进血管内皮细胞生长和神经系统损伤方面。迄今为止，很少有研究涉及Tat在昼夜节律中的作用。现分享一篇体内转染（Entranster）与TAT和小鼠下丘脑运动及昼夜节律基因表达研 …
阅读更多 »细胞转染实验注意事项
1.如为贴壁生长细胞，一般要求在转染前一日，必须应用胰酶处理成单细胞悬液，重新接种于培养皿或瓶，转染当日的细胞密度以70-90%（贴壁细胞）或2×106-4×106细胞/ml（悬浮细胞）为宜，最好在转染前4h换一次新鲜培养液。 2.用于转染的质粒DNA必须无蛋白质，无RNA和其他化学物质的污染，OD260/280比值应在1.8以上。 3.培养基中的血清 在开 …
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