英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。 目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周 …
阅读更多 »RNA转染与大鼠肺辐射损伤中microRNA和mRNA表达谱研究
暴露与辐射中会引起细胞反应，这可能受到基因表达网络的调控。miRNA是一种小的非编码RNA，通过促进mRNA的降解或抑制蛋白质的翻译来调节基因的表达。在放射性肺损伤中miRNA和mRNA的表达模式还不是很清楚，并且miRNA在这个过程中的作用还未有研究。现分享一篇RNA转染（Entranster）与大鼠肺辐 …
阅读更多 »siRNA转染时细胞铺板密度为什么很重要？
RNA转染试剂Entranster-R4000成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这时转染效率和总的细胞数量就很重要，一般细胞数量较少时转染效率高，一些试剂由于本身毒性的影响，太低的细胞数量时毒性明显，所以会要求较高的细胞密度（汇合度），顺便说一句，看一个转染试剂的 …
阅读更多 »PCR扩增产物出现杂带怎么办？
可能的原因和对应的解决方案如下： 1.引物用量偏大，引物的特异性不高。应调换引物或降低引物的使用量。 2.循环的次数过多。适当增加模板的量，减少循环次数。 3.酶的用量偏高或酶的质量不好，应降低酶量或调换另一来源的酶。 4.退火温度偏低，退火及延伸时间偏长。应提高退火温度，减少变性与延伸时间，也可采用二种温度的 pcr 扩增。以 2 度为梯度设计梯度 PCR …
阅读更多 »怎样有效提高细胞转染实验效率？
1．选择合适的转染试剂 不同细胞系转染效率通常不同，但细胞系的选择通常是根据实验的需要，因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。每种转染试剂都会提供一些已经成功转染的细胞株列表和文献，通过这些资料可选择最适合实验设计的转染试剂。当然，最适合的是高效、低毒、方便、廉价的转染试剂。如英格恩的 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与环状RNA研究
环状RNA在许多生物系统中被发现。它们大多被认为是microRNA的分子“海绵”，具有许多未知的生物学活性。小干扰RNA作为许多非编码RNA之一，已成为基因表达调控和药物治疗的重要工具。虽然由siRNA介导的靶mRNA裂解具有高度的序列特异性，意外“脱靶”沉默内源基因在细胞中也观 …
阅读更多 »western-blot实验影响因素
western-blot实验成功的条件 1. 样品质量。所抽取样品的蛋白含量，蛋白变性是否充分等等，还有，蛋白样品的PH值是否在7~8之间。这会直接影响到样品浓缩的效果。此外，蛋白样品是否降解、目的蛋白是否已抽取充分都会对最终结果的可靠性有影响。 2. …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与糖尿病神经痛大鼠脊髓CGRP释放研究
糖尿病是一种以慢性高血糖为特征的代谢性疾病。2013，全球糖尿病患者超过3亿8200万人，预计到2035年底人数将达到5亿9200万人。糖尿病患者经常会出现并发症，例如心血管疾病、视网膜病变、神经病变等。糖尿病神经病理性疼痛（DNP）是糖尿病神经病变的主要临床症状之一，常表现在远端肢 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与小胶质细胞M2极化和脑炎性保护作用
小胶质细胞介导的炎症会导致脑出血（ICH）继发性损伤。活化的小胶质细胞在脑损伤和修复中具有促炎症（M1）和抗炎（M2）的双重功能。miR－124是一种有效的在脑损伤后抗小胶质细胞的抗炎药。然而，ICH后小胶质细胞的M1/M2极化的调节作用还未见报道。现分享一篇体内转染（Entranster）与小胶质细胞M2 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与新型抗癌药物抑制肺癌干细胞生长研究
肺癌是男性和女性癌症相关死亡的主要原因。肺癌细胞中含有少量的具有干细胞样特征的癌细胞，被称为肿瘤干细胞（CSCs）。CSCs通常对当前的治疗性治疗更具抵抗力。因此，迫切需要开发一种新的能抑制CSCs生长的药物。现分享一篇ECL发光液（enlight）与新型抗癌药物SNG1153抑制肺癌干/祖细胞生长的研究 …
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