悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染,其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。 目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂,脂质体转染是基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周 …
阅读更多 »体内转染(entranster)与信号素3A导致创伤性脑损伤后继发性血脑屏障损伤研究
创伤性脑损伤(TBI)是一种危害人类健康的高发病率疾病,随着社会的发展,这种疾病的发病率有上升的趋势。脑外伤死亡率为10.8%,致残率为12%。脑外伤已成为40岁以下人群的第五大死因,年轻人约占脑外伤患者的70%。信号素3A(SEMA 3A)是信号素家族的成员,是一类参与神经网络构建的膜相关蛋白。SEMA3A曾被报道可影响血管通透性,但其在创伤性脑损伤(TB …
阅读更多 »体内转染与LncRNACHRF调节大脑缺血/再灌注损伤研究
缺血性中风仍然是全世界致残和死亡的主要原因。长链非编码RNA(lncRNA)心脏肥大相关因子(chrf)被认为是心脏损伤和各种人类癌症的重要调节因子。然而,其对缺血性中风的作用和机制尚不清楚。现分享一篇体内转染(entranster)与LncRNA CHRF调节大脑缺血/再灌注损伤研究的文献,以供参考。 文献地址:https://sci-hub.shop/h …
阅读更多 »体内转染(entranster)与心肌缺血后背根神经节P2X4导致交感神经活动异常研究
冠状动脉阻塞继发心肌缺血(MI)是一种严重的心脏病,发病率和死亡率都很高。交感传入通路是心肌梗死信号传导的关键。背根神经节(DRG)神经元的感觉输入在控制交感神经输出到心脏的过程中起着重要作用。 心肌缺血可激活交感传入神经末梢,常伴有血压升高和交感传出兴奋,引起交感兴奋反射。冠状动脉闭塞模型还通过激活缺血左心室的感觉神经末梢来诱导交感神经反射。交感 …
阅读更多 »体内转染(entranster)与lncRNAuc.48+对2型糖尿病大鼠肝糖原的影响研究
糖尿病(diabetes mellitus,DM)是一组代谢性临床综合征,随着社会的发展和人们生活水平的提高,糖尿病的患病率逐年升高。在发达国家,糖尿病患病率已达3% ~7%,成为仅次于癌症、艾滋病、心脑血管病之后第4位需要优先考虑的疾病,已成为世界第5位死亡主因。我国糖尿病人群的构成,以2型糖尿病为主,占糖尿病人群的90%以上,严重影响着人民健康和社会发展 …
阅读更多 »体内转染(entranster)与缺血小鼠神经元凋亡调节机制研究
慢性脑缺血(CCI)可引起慢性缺血性神经损伤,它参与痴呆的发展,如阿尔茨海默病(AD)和血管性痴呆(VAD)。CCI导致持续性和进行性认知损伤和神经元损伤,其中海马神经元受损尤其严重。因此,对慢性脑缺血机制的研究可能为CCI治疗提供一种潜在的创新途径。现分享一篇体内转染(entranster)与缺血小鼠神经元凋亡调节机制研究的文献,以供参考。 文献地址:ht …
阅读更多 »体内转染(entranster)与NEMO结合域肽减轻实验性脑出血后血肿周围炎症损伤研究
炎症加重了脑出血(ICH)的致命后果。近年来,许多研究发现,核因子-κB(NF-κB)是一种重要的转录因子,可引起ICH血液周围区域的炎症。NF-κB必需调节剂(nemo)-结合域(nbd)肽,一种跨越ikkα或ikkβ的nbd的细胞渗透性肽,作为NF-κB的高特异性抑制剂发挥作用。这种肽能负调节NF-κB通路。现分享一篇体内转染(entranster)与N …
阅读更多 »细胞RNA转染注意事项
细胞RNA转染实验,需要注意以下几点: 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA …
阅读更多 »为什么我的细胞转染实验效率较低?
1)实验条件优不佳:质粒不同,所转染的细胞不同及定量的准确性等因素会导致在一些情况下所做的转染不在该优化条件内。这种情况下需要对质粒转染试剂的配比进行优化。另外,可选用更合适的转染试剂,如Entranster试剂。 2)抑制剂:不要在用于制备DNA-转染试剂复合物的培养基中使用抗生素,EDTA,柠檬酸盐,磷酸盐,RPMI,硫酸软骨素,透明质酸,硫酸葡聚糖或其 …
阅读更多 »细胞转染效率重复性差的原因
转染效率重复性差原因: 细胞融合度不同。保证同样的接种量及同样的时间。 细菌污染。可使用Entranster试剂,培养基可加抗生素,避免细胞污染。 细胞传代次数太高了。可重新复苏一管新的细胞。 血清质量不稳定。用同一批号的血清。
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