microRNA(miRNA)是一种机体内源性表达的单链小分子RNA,位于基因组非编码区,本身不具有开放阅读框(open readingframe,ORF),具有高度保守性,时序性和组织特异性。miRNA广泛存在于各种真核细胞中,不编码任何蛋白质,长度仅为20~24nt。成熟的miRNA5′端有一个磷酸基团,3′端为羟基,由具有发夹状结构的约70~90nt的 …
阅读更多 »ELISA不得不懂的实验原理
ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。 在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体 …
阅读更多 »章鱼聪明的基因基础
章鱼(英文名Octopus),属于软体动物门头足纲八腕目,章鱼科章鱼属(Octopoda)。因其头上长有八腕,且腕间有膜相连,长短不一,腕上具有2行无柄的吸盘,所以称作“八腕类”。是海洋动物。拥有8个灵活肢体,像摄像机一样的眼睛,可随时改变颜色的伪造技术。 章鱼的高超生活智能是地球上任何其他生物都不具备的。章鱼能利用灵活的腕足在礁岩、石缝及海床间爬行,有时把 …
阅读更多 »duang~,细胞也来加特技
细胞培养在飞速发展的生物科学领域具有举足轻重的地位,尤其在医药领域的发展,细胞培养更具有特殊的作用和价值。细胞培养不仅与各种现代生物技术密切相关,而且在整个生物技术产业的发展中起到了很关键的核心作用。对于细胞培养,培养基的质量是关键,而培养基的主要成份–动物血清,更是重中之重。 胎牛血清(fetal calf serum ,简称FBS)是动物 …
阅读更多 »基因克隆连接到T载体是不是多此一举?
T载体是TA克隆载体的简称,就是利用载体的T末端和PCR产物的A末段连接而将目的基因克隆到载体中的方法。我们都知道,做基因克隆目的基因连接到载体,使目的基因能够在受体细胞进行稳定遗传。部分朋友是把目的片段先克隆到T载体后再酶切连接目的载体的,有部分朋友就直接将PCR产物酶切连接到能够将目的基因带入受体细胞进行稳定遗传的载体中。那么进行TA克隆到底是不是多此一 …
阅读更多 »跟师姐学做大鼠慢性肾衰竭(CRF)模型
慢性肾功能衰竭(CRF)是一种进行性不可逆的临床综合征,近年来国内外许多学者对慢性肾衰竭的动物模型进行了研究。造模技术不断完善的现在,仍较多偏于细微局部的观察研究,统一、简便、稳定的CRF动物模型是研究慢性肾衰实验过程中急需解决的问题。 目前常制备的CRF模型,相对较简便稳定,通过观察大鼠的生物学特征,对研究CRF的发病机制,预防终末期肾病的发生起到一定的作 …
阅读更多 »基因+人工智能,Deep Genomics将会把精准医疗带往何处?
最近基因产业有点儿火。上月17日,华大基因宣布组建以人工智能为核心的新业务机构,引起业界一片猜测;接着7月29日央视全面聚焦精准医疗,大篇幅介绍了基因检测,一下子连街头的大爷大妈们都唠起了基因。然而就在这期间,加拿大一家叫Deep Genomics的公司悄然成立了,并迅速占领了国外各大媒体的头条(国内却鲜有报道)。 那么这家公司究竟在做什么?又有哪些过人之处 …
阅读更多 »亲和层析纯化抗体,如何减少洗脱后中和沉淀的出现?
随着亲和层析技术的发展,蛋白纯化技术相对简单,蛋白纯化技术的应用也越来越普遍,一步亲和层析即可达到90%以上的纯度。然而,蛋白纯化的过程中各个环节不容忽视。样品处理,纯化介质的选择,纯化方法的考虑,等等,虽然纯化方法简单,但是蛋白不同,采用的纯化体系也不尽相同。只要达到最终的纯化目的就是最好的纯化方法。 对于亲和层析纯化抗体,不论是蛋白A/G还是特异性抗原亲 …
阅读更多 »师姐真传的一些引物设计技巧(师姐比师兄靠谱)
实验室小白遇上引物设计,一片迷茫,不知所措。 师姐:现在常用的的引物设计软件有Oligo、PrimerPremier、DNA man等等,还有在线引物设计软件。咱实验室的软件给你拿去。 (师姐比师兄靠谱,真的是手把手的教了,边操作边讲解。) 1. 在NCBI上搜索到该基因,找到该基因的mRNA,在CDS选项中,找到编码区所在位置,在下面的origin中 …
阅读更多 »琼脂糖凝胶电泳拖尾了怎么办?
跑过琼脂糖凝胶电泳的小伙伴,是不是经常遇到过电泳拖尾的现象啊?相信不少人点头如捣蒜了。提个质粒拖尾,提个DNA拖尾,连PCR也拖尾,拖尾什么的最常见了。验证也就算了,关键是图片拍出来不好看了,发文章什么的太影响档次了。下面我就跟据自己的经验跟大家讲讲琼脂糖凝胶电泳为什么会拖尾,有不足的希望大家多多评论补足啊(三人行必有我师嘛)!! 那琼脂糖凝胶电泳为什么会拖 …
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