英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
要想做好细胞的电转染实验，应注意以下几点： 1. 选择合适的电场强度 合适的电场强度对于电转染实验非常重要，电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值，实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2. 选择合适的细胞 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞（15代以内 …
阅读更多 »如何达到更好的siRNA转染效率？
为了达到高的转染效率，在转染实验过程中，需要注意以下几点： 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与人结直肠癌细胞通路研究
瓜蒌提取物具有多种药用功能。最近，有报道称从瓜蒌中分离的一种丝氨酸蛋白酶TKP可以通过诱导细胞凋亡从而抑制人结直肠癌细胞的增殖。现分享一篇DNA转染（Entranster）与人结直肠癌细胞通路研究的文献，文献中研究了TKP对于大肠腺癌细胞上皮间质转化（EMT）的影响。
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与人类胚胎干细胞转染研究
如今，人类胚胎干细胞中小干扰RNA（siRNA）或质粒DNA（pDNA）低转染效率已经成为遗传操作的关键问题。对于高效转染siRNA和质粒进入胚胎干细胞的方法的发展需求变得越来越迫切。现分享一篇RNA转染（Entranster）与人类胚胎干细胞转染的文献，以供参考。
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与桥本甲状腺炎患者T辅助细胞1型细胞研究
桥本甲状腺炎（Hashimoto’s thyroiditis ，HT），又称慢性淋巴细胞性甲状腺炎，是一种器官特异性自身免疫性疾病，特点是甲状腺实质淋巴细胞浸润，弥漫性甲状腺肿大和自身抗体升高的升高，主要包括抗甲状腺球蛋白抗体（TGAb）和甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）。HT现在被认为是最常见的自身免疫性疾病，常与其他自身免疫性疾病相关，如Graves病 …
阅读更多 »ECL发光液（Enlight）与黍稷中纯化的阳离子过氧化物酶可诱导人结肠癌细胞程序性坏死研究
由于细胞通过不同的凋亡方式进行程序性死亡，抗凋亡剂的癌细胞可能会对程序性坏死的诱导剂敏感。许多传统的被批准进入市场或者临床试验的化疗或分子靶向药物被确定为某些癌细胞的程序性坏死的诱导剂。这些药物包括紫草素及其类似物，β-拉帕醌和eupomatenoid-5等。现分享一篇ECL发光液（Enlight）与黍稷中纯化的阳离子过氧化物酶可诱导人结肠癌细胞程序性坏死研 …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与血管生成素-2和肺癌转移研究
肺癌是最常见的恶性肿瘤，血管生成-2（Ang-2）升高，具有高转移率。然而，关于Ang-2促进肺癌细胞增殖和转移的机制仍不清楚。现分享一篇DNA转染（Entranster）与血管生成素-2和肺癌转移研究的文献，以供参考。
阅读更多 »RNA转染试剂的对比
近期，上海公卫临床研究中心的一位研究生应用两种转染试剂Turbofect transfection reagent（Thermo）和EntransterTM-R4000（Engreen）进行了一次RNA转染比较。比较情况如下： 实验方法 转染试剂：Turbofect transfection reagent（Thermo）和EntransterTM-R400 …
阅读更多 »悬浮细胞的siRNA转染步骤
悬浮细胞的siRNA转染操作步骤，以24孔板siRNA转染为例 1.提前1天细胞种植 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那么就用2×105的细胞进行转染。 2.转染过程 ⑴取0.67ug(50pmol)的siRNA，加入一定量无血清稀释液，充分混匀，制成RNA稀释液，终体积为25μ …
阅读更多 »如何做好细胞DNA转染实验？
我认为，要想做好质粒DNA细胞转染实验，应注意以下几点： 1， 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多，特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟，相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质粒正好比较大，又没有经验，选择特别注明可以转大质粒的转 …
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