吸入糖皮质激素,主要是皮质类固醇,目前治疗哮喘最有效的方法。然而,这种疗法去无法阻止重症哮喘或者顽固性哮喘的发展,被称作是非嗜酸细胞性哮喘(NEA)。NEA的特点是中性粒细胞(PMN)数目增加,并伴有单核细胞/巨噬细胞、肥大细胞和淋巴细胞相关的炎症反应。现分享一篇体内转染(Entranster-in vivo)与中性粒细胞气道炎症研究的文献,以 …
阅读更多 »细胞RNA转染的几点建议
为了做好RNA转染实验,提出几点关于细胞RNA转染实验的建议,供大家参考: 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »如何应对悬浮细胞转染难题?
悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染,其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。 目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂,脂质体转染是基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞 …
阅读更多 »体内转染siRNA(engreen)与衰老相关的神经炎症研究
作为衰老过程中的主要特征,神经性炎症参与几种与衰老相关疾病的发病机制,包括阿尔茨海默氏病(AD)。触发受体表达髓系细胞(TREM)2是一种新的AD致病基因,但是关于TREM2在与衰老相关的神经炎症、认知障碍等方便研究不足。现分享一篇运用体内转染siRNA(Entranster-in vivo)敲降TREM2的方法与神经炎症和认知障碍研究的文献 …
阅读更多 »如何做好siRNA转染实验?
为了做好siRNA转染实验,在转染过程中,需要注意以下几点: 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导 …
阅读更多 »mRNA细胞转染实验步骤
下面以Entranster-R4000试剂为例,说一下mRNA转染步骤(24孔板) 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞:提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞汇合度(Confluence)在30%左右为宜,转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105,那么 …
阅读更多 »miRNA转染(Entranster)与白细胞介素IL-23受体和甲状腺炎研究
Hashimoto甲状腺炎(HT)是一种典型的器官特异性自身免疫性疾病,其特征是自身对甲状腺抗原的耐受性降低。白细胞介素IL-23受体(IL-23R)越来越被认为是自身免疫性疾病的一个关键点,包括Hashimoto甲状腺炎(HT)。然而,调节IL-23R表达的分子机制尚不清楚。现分享一篇miRNA转染(Entranster-R4000)与白细 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与丹酚酸B和脓毒症相关急性肺损伤研究
脓毒症是一种危及生命的疾病,其特征是器官功能不全。脓毒症被广泛认为是由于感染引起的代偿性抗炎反应和全身炎症反应之间的平衡不稳定。在严重的情况下,炎症、脓毒症可导致急性肺损伤(ALI),更严重地可能会发生急性呼吸窘迫综合征(ARDS)。现分享一篇体内转染(Entranster)与丹酚酸B和脓毒症相关急性肺损伤研究的文献,以供参考。
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与咪康唑对早产大鼠脑白质损伤髓鞘保护作用研究
少突胶质细胞(ODNs)是中枢神经系统(CNS)的主要细胞,对神经元功能至关重要。中枢神经系统髓鞘异常是多种神经系统疾病的特征,包括白质损伤、多发性硬化和视神经脊髓炎。脱髓鞘的原因通常包括免疫损伤、兴奋毒性、病毒感染、肌营养不良和氧化应激。现分享一篇ECL发光液(Enlight)与咪康唑对早产大鼠脑白质损伤的髓鞘保护作用研究的文献,以供参考。
阅读更多 »怎样有效提高细胞转染实验效率?
1.选择合适的转染试剂 不同细胞系转染效率通常不同,但细胞系的选择通常是根据实验的需要,因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。每种转染试剂都会提供一些已经成功转染的细胞株列表和文献,通过这些资料可选择最适合实验设计的转染试剂。当然,最适合的是高效、低毒、方便、廉价的转染试剂。如英格恩的纳米材料的Entranster试剂。 2.保持最佳的 …
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