悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染,其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。 目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂,脂质体转染是基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞 …
阅读更多 »如何做好细胞转染实验?
1.选择合适的转染试剂 不同细胞系转染效率通常不同,但细胞系的选择通常是根据实验的需要,因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。每种转染试剂都会提供一些已经成功转染的细胞株列表和文献,通过这些资料可选择最适合实验设计的转染试剂。当然,最适合的是高效、低毒、方便、廉价的转染试剂。如英格恩的 …
阅读更多 »体内转染(entranster)与牛磺酸脱氧胆酸减轻早期脑损伤研究
创伤性脑损伤(TBI)是创伤性死亡和致残的主要原因之一,新的研究表明内质网应激在TBI的病理生理过程中起着重要作用。牛磺脱氧胆酸(TUDCA)是一种亲水性胆汁酸,已被报道为ER应激抑制剂和化学伴侣,并具有抑制细胞凋亡和炎症的潜力。 现分享一篇体内转染(Entranster)与牛磺酸脱氧胆酸通过Akt通路激活 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与JMJD6和p53及结肠癌发生之间关系研究
umonji域包含6(JMJD6)是JumonjiC结构域蛋白家族的一个成员。相比于其他的家庭成员,JMJD6细胞活性仍不明确,其生物学功能仍然是很大的未开发。现分享一篇文献,文献中我报道JMJD6与肿瘤抑制基因p53相关,文献中用RNA转染(Entranster)研究JMJD6和p53及结肠癌发生之间的关系,以供参考。
阅读更多 »悬浮细胞的siRNA转染操作步骤
悬浮细胞的siRNA转染操作步骤,以24孔板siRNA转染为例 1.提前1天细胞种植 悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105,那么就用2×105的细胞进行转染。 2.转染过程 ⑴取0.67ug(50pmol)的siRNA,加入一定量无血清稀释液,充分混匀,制成RNA稀释液,终体积为25μ …
阅读更多 »DNA转染与核受体Nur77和脂肪酸氧化及黑色素瘤细胞研究
脂肪酸氧化(FAO)是细胞获得ATP和NADPH来克服代谢应激的关键。然而,脂肪酸氧化(FAO)在肿瘤中调节的机制仍不清楚。现分享一篇DNA转染(Entranster)与核受体Nur77和脂肪酸氧化及黑色素瘤细胞研究的文献,以供参考。
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与mir-136诱导骨髓细胞分化研究
免疫细胞谱系规范和功能受祖源和环境因素的影响。免疫细胞,如中性粒细胞、单核细胞和髓系抑制因子细胞在炎症环境中分化的机制尚未完全阐明。现分享一篇RNA转染(Entranster)与mir-136诱导骨髓细胞分化研究的文献,以供参考。
阅读更多 »怎样做好siRNA细胞转染?
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮 …
阅读更多 »体内转染与细胞死亡因子4/NF-κB和猪心脏功能障碍研究
冠状动脉微栓塞(CME)是一种常见的和重要的临床现象,急性冠状综合征(ACS),和那些接受溶栓治疗、经皮冠状动脉介入治疗(PCI)的患者都会出现冠状动脉微栓塞现象。现分享一篇运用体内转染(Entranster-in vivo)方法研究细胞死亡因子4/NF-κB在猪冠状动脉微栓塞引起的心脏功能障碍中的发生机制的文献,以供参考。
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与丙戊酸钠增强肝细胞脂肪变性研究
丙戊酸钠(Valproate,VPA)是一种广谱抗癫痫药物,已广泛应用于各种抽搐,双极性,或分裂情感障碍等癫痫的治疗。据报道,VPA治疗是一个长期的过程,甚至需要终身服药。然而,在整个VPA抗癫痫治疗过程中会发生药物不良反应(ADR),如肝毒性、肥胖、出血性胰腺炎、骨髓抑制和血氨过多性脑病。其中肝毒性是限制丙 …
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