谷氨酸(Glu)是中枢神经系统中一种兴奋性神经递质,并根据其特定的谷氨酸受体发挥多种功能。谷氨酸也是一种营养氨基酸,存在于血液中。谷氨酸受体有两组,它们是离子型受体(IGLURs)和代谢型受体(MGLURs)。IGLURS是根据其对激动剂的选择性分为三个亚型:N-甲基-D-天门冬氨酸受体(NMDA),A-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体(AMPA …
阅读更多 »RNA转染与大鼠肺辐射损伤中microRNA和mRNA表达谱的整合研究
暴露与辐射中会引起细胞反应,这可能受到基因表达网络的调控。miRNA是一种小的非编码RNA,通过促进mRNA的降解或抑制蛋白质的翻译来调节基因的表达。在放射性肺损伤中miRNA和mRNA的表达模式还不是很清楚,并且miRNA在这个过程中的作用还未有研究。现分享一篇RNA转染(Entranster)与大鼠肺辐射损伤中microRNA和mRNA表达谱的整合研究的 …
阅读更多 »电转染实验影响因素
1 电场参数 电场是电转染的重要因素,细胞在电场的作用下,膜通透性增加或是形成小孔,以完成转染过程。因此电场强度是应该被优化的主要参数。电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。因此,一个适宜的电场强度至关重要。 不同细胞系具有不同的最佳场强值,其确定方法除了实验直接测定比较不同场强下转染率的高低外,还可以 …
阅读更多 »DNA转染与人IL-37b 基因真核表达载体的构建与表达研究
IL-37基因位于人类第二号染色体上,共有五种不同的剪切亚型,即IL-37a ~e,其中IL-37b 是五种亚型中分子量最大的一个 。IL-37 具有广泛的炎症抑制作用,可抑制外周血单个核细胞、树突状细胞、巨噬细胞及上皮细胞等细胞炎症因子的产生 ,另外在感染性休克、系统性红斑狼疮、炎症性肠病、肝损伤、肝癌等疾 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与DNA酶1和糖尿病研究
脱氧核糖核酸酶I(DNaseI)是38 kDa糖蛋白的非限制性核酸酶。它可以水解单链和双链DNA中的磷酸二酯键。内源性DNA酶I是促进细胞凋亡过程中染色质分解的核酸内切酶之一。作为分泌型内切酶,DNaseⅠ是体液中主要的核酸酶,如血清和尿液。在人类中,胰腺是DNASi I的合成和分泌的主要来源,占血清中D …
阅读更多 »细胞转染效率不可重复怎么办?
转染效率重复性差原因: 细胞融合度不同。保证同样的接种量及同样的时间。 细菌污染。可使用Entranster试剂,培养基可加抗生素,避免细胞污染。 细胞传代次数太高了。可重新复苏一管新的细胞。 血清质量不稳定。用同一批号的血清。
阅读更多 »悬浮细胞的siRNA转染实验步骤
悬浮细胞的siRNA转染操作步骤,以24孔板siRNA转染为例 1.提前1天细胞种植 悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105,那么就用2×105的细胞进行转染。 2.转染过程 ⑴取0.67ug(50pmol)的siRNA,加入一定量无血清稀释液,充分混匀,制成RNA稀释液,终体积为25μ …
阅读更多 »ECL发光液与褪黑激素降低吸烟引起的高血糖研究
吸烟是一种不健康的生活习惯。糖尿病是多因素的,与环境因素和生活方式有关。值得注意的是,糖尿病似乎受到吸烟的严重影响,包括稳态模型评估在内的临床流行病学调查表明吸烟可能会干扰血糖平衡,但吸烟对高血糖和β细胞的作用机制尚不清楚。现分享一篇ECL发光液(enlight)与褪黑激素降低吸烟引起的高血糖研究的文献,以 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与DNMT1过表达和废用性骨质疏松研究
废用性骨质疏松(DOP)属于继发性骨质疏松症的一种,是由于骨骼的机械张力刺激减少而引起的局部或全身性骨量减少。可以出现于运动能力受限或功能障碍,也可能发生于创伤或者术后制动。有关DOP的确切机制尚不清楚,尽管表观遗传修饰可能是主要原因。最近,有研究表明DNA甲基转移酶(DNMT)蛋白可将胞嘧啶催化为5-甲基胞嘧啶(5mC),改变DNA的表观遗传状态。现分享一 …
阅读更多 »ECL发光液与上皮性卵巢癌差异表达蛋白的鉴定及验证研究
卵巢癌是女性死亡的第五大死因,也是最致命的妇科肿瘤。每年新增卵巢癌病例22280例,死亡率15500例,占女性新增癌症病例的3%和所有癌症死亡病例的6%。卵巢上皮性癌(EOC)由于盆腔脏器位置深,早期诊断困难,因此初诊时60%以上的患者处于晚期。EOC的标准治疗是手术,其次是铂类辅助化疗。虽然EOC的治疗 …
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